| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-20页 |
| 1 热激蛋白研究概况与分类 | 第14-15页 |
| 2 小分子热激蛋白的生物学特性 | 第15-16页 |
| 3 小分子热激蛋白的生物学功能 | 第16-17页 |
| 4 小分子热激蛋白对热胁迫的响应机制 | 第17页 |
| 5 小分子热激蛋白与生长发育的关系 | 第17页 |
| 6 小分子热激蛋白与组织形成 | 第17-18页 |
| 7 小分子热激蛋白对20E的响应机制 | 第18页 |
| 8 其他胁迫因子对小分子热激蛋白的影响 | 第18-20页 |
| 引言 | 第20-22页 |
| 第二章 桔小实蝇小分子热激蛋白基因的克隆与序列分析 | 第22-40页 |
| 1 材料和方法 | 第22-27页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第22-23页 |
| 1.2 实验仪器及试剂 | 第23-24页 |
| 1.3 总RNA提取 | 第24页 |
| 1.4 总RNA中gDNA的去除 | 第24-25页 |
| 1.5 cDNA合成 | 第25页 |
| 1.6 引物设计和合成 | 第25-26页 |
| 1.7 PCR扩增反应 | 第26-27页 |
| 1.8 克隆和测序 | 第27页 |
| 1.9 生物信息学分析 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-39页 |
| 2.1 桔小实蝇小分子热激蛋白基因的cDNA克隆及保守氨基酸序列分析 | 第27-31页 |
| 2.2 Bdhsp20.4 | 第31-32页 |
| 2.3 Bdhsp21.6 | 第32-33页 |
| 2.4 Bdhsp23.8 | 第33-34页 |
| 2.5 Bdhsp23.0 | 第34-35页 |
| 2.6 Bdhsp17.6 | 第35-36页 |
| 2.7 Bdhsp20.6 | 第36-37页 |
| 2.8 Bdhsp18.4 | 第37页 |
| 2.9 Bdhsp11.1 | 第37-38页 |
| 2.10 3315 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 sHSP基因在桔小实蝇发育阶段和成虫组织的表达特异性 | 第40-50页 |
| 1 材料和方法 | 第40-44页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第40页 |
| 1.2 实验仪器及试剂 | 第40-41页 |
| 1.3 总RNA提取 | 第41-42页 |
| 1.4 cDNA合成 | 第42页 |
| 1.5 引物设计和合成 | 第42-43页 |
| 1.6 qPCR | 第43页 |
| 1.7 标准曲线制作 | 第43-44页 |
| 1.8 数据分析 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-48页 |
| 2.1 引物扩增效率 | 第44页 |
| 2.2 桔小实蝇sHSP基因在不同发育时期的表达分析 | 第44-46页 |
| 2.3 桔小实蝇sHSP基因在成虫不同组织中的表达分析 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 外源20E和热胁迫对sHSP基因表达的影响 | 第50-60页 |
| 1 材料和方法 | 第50-53页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第50页 |
| 1.2 实验仪器及试剂 | 第50-51页 |
| 1.3 20E注射 | 第51-52页 |
| 1.4 温度处理 | 第52页 |
| 1.5 总RNA提取 | 第52-53页 |
| 1.6 cDNA合成 | 第53页 |
| 1.7 引物设计和合成 | 第53页 |
| 1.8 qPCR | 第53页 |
| 1.9 数据分析 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-57页 |
| 2.1 20E胁迫对桔小实蝇小分子热激蛋白基因表达的影响 | 第53-56页 |
| 2.2 热胁迫对桔小实蝇小分子热激蛋白基因表达的影响 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-60页 |
| 第五章 桔小实蝇3个sHSP基因的功能初探 | 第60-72页 |
| 1 材料和方法 | 第60-66页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第60页 |
| 1.2 实验仪器及试剂 | 第60-61页 |
| 1.3 dsRNA引物的设计 | 第61页 |
| 1.4 dsRNA的cDNA模板制备 | 第61页 |
| 1.5 抽提质粒 | 第61-62页 |
| 1.6 高浓度DNA模板合成 | 第62-63页 |
| 1.7 dsRNA制备 | 第63-64页 |
| 1.8 dsRNA的纯化 | 第64页 |
| 1.9 dsRNA检测 | 第64-65页 |
| 1.10 RNA干扰水平检测和表型观察 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-70页 |
| 2.1 dsRNA合成 | 第66页 |
| 2.2 沉默效率 | 第66-69页 |
| 2.3 表型变化 | 第69页 |
| 2.4 生测结果 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 第六章 主要结果、结论与展望 | 第72-74页 |
| 1 主要结果与结论 | 第72-73页 |
| 1.1 克隆获得了橘小实蝇9个sHSP基因的cDNA序列 | 第72页 |
| 1.2 解析了小分子热激蛋白基因在桔小实蝇不同发育阶段的表达模式 | 第72页 |
| 1.3 明确了小分子热激蛋白基因在桔小实蝇成虫不同组织中的表达模式 | 第72页 |
| 1.4 阐明了桔小实蝇小分子热激蛋白基因对20E和热胁迫的响应机制 | 第72-73页 |
| 1.5 验证了桔小实蝇Bdhsp23.8、Bdhsp20.6和3315基因的功能 | 第73页 |
| 2 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 发表论文与科研成果 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
