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槲寄生多糖分离纯化及对人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第16-26页
    1.1 植物多糖的研究概况第16-18页
        1.1.1 植物多糖的提取及纯化技术第16-17页
        1.1.2 植物多糖的结构分析及鉴定第17页
        1.1.3 植物多糖的抗病毒、抗肿瘤活性研究第17-18页
    1.2 槲寄生的研究概况第18-20页
        1.2.1 槲寄生的分布第18-19页
        1.2.2 槲寄生的化学成分及生理功能第19-20页
        1.2.3 槲寄生多糖的研究第20页
    1.3 细胞凋亡第20-22页
        1.3.1 细胞凋亡的概述第20页
        1.3.2 细胞凋亡的主要途径第20-22页
    1.4 蛋白质组学的研究第22-24页
    1.5 课题来源与目的意义第24-26页
        1.5.1 课题来源第24页
        1.5.2 研究的目的与意义第24-26页
2 槲寄生多糖分离纯化、性质及结构研究第26-46页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 材料第26页
        2.1.2 主要试剂及配制第26-27页
        2.1.3 主要仪器第27页
    2.2 实验方法第27-31页
        2.2.1 槲寄生多糖的提取第27-28页
        2.2.2 槲寄生多糖及蛋白质含量测定第28-29页
        2.2.3 槲寄生多糖的分离纯化第29页
        2.2.4 槲寄生多糖的分子量测定第29页
        2.2.5 槲寄生多糖的单糖组成分析第29-30页
        2.2.6 槲寄生多糖的旋光度测定第30页
        2.2.7 槲寄生多糖的紫外光谱(UV)检测第30页
        2.2.8 槲寄生多糖的红外光谱(FT-IR)检测第30页
        2.2.9 槲寄生多糖的核磁共振谱(NMR)检测第30页
        2.2.10 槲寄生多糖的甲基化分析第30-31页
    2.3 结果与分析第31-44页
        2.3.1 槲寄生粗多糖的提取及含量测定第31-33页
        2.3.2 槲寄生多糖的分离纯化第33页
        2.3.3 槲寄生多糖的分子量测定第33-35页
        2.3.4 槲寄生多糖的单糖组成测定第35-36页
        2.3.5 槲寄生多糖的UV光谱分析第36-37页
        2.3.6 槲寄生多糖的FT-IR分析第37-39页
        2.3.7 槲寄生多糖的NMR分析第39-42页
        2.3.8 槲寄生多糖的甲基化分析第42-44页
    2.4 讨论第44-45页
    2.5 本章小结第45-46页
3 槲寄生多糖抑制HepG2.2.15细胞增殖及体外抗乙肝病毒研究第46-56页
    3.1 实验材料第46-47页
        3.1.1 材料第46页
        3.1.2 主要试剂及配制第46-47页
        3.1.3 主要仪器第47页
    3.2 实验方法第47-50页
        3.2.1 细胞的培养第47-48页
        3.2.2 槲寄生多糖对HepG2.2.15细胞增殖抑制研究第48页
        3.2.3 槲寄生多糖对HBV-DNA抑制研究第48-49页
        3.2.4 槲寄生多糖对HBV抗原抑制研究第49-50页
    3.3 结果与分析第50-53页
        3.3.1 槲寄生多糖对HepG2.2.15细胞增殖抑制作用第50-51页
        3.3.2 槲寄生多糖对HBV-DNA抑制作用第51-52页
        3.3.3 槲寄生多糖对HBV抗原抑制研究第52-53页
    3.4 讨论第53-55页
    3.5 本章小结第55-56页
4 槲寄生多糖对人肝癌细胞HepG2增殖抑制和凋亡的研究第56-75页
    4.1 实验材料第56-58页
        4.1.1 材料第56页
        4.1.2 主要试剂及配置第56-57页
        4.1.3 主要抗体第57页
        4.1.4 主要引物第57-58页
        4.1.5 主要仪器第58页
    4.2 实验方法第58-63页
        4.2.1 细胞培养第58-59页
        4.2.2 槲寄生多糖对HepG2细胞增殖抑制研究第59-60页
        4.2.3 槲寄生多糖对HepG2细胞周期的影响第60页
        4.2.4 槲寄生多糖对HepG2细胞凋亡的影响第60页
        4.2.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测相关mRNA表达第60-62页
        4.2.6 蛋白免疫印迹(Western blot)检测相关蛋白表达第62-63页
    4.3 结果与分析第63-73页
        4.3.1 槲寄生多糖对HepG2细胞增殖抑制作用第63-64页
        4.3.2 槲寄生多糖对HepG2细胞周期的影响第64-65页
        4.3.3 槲寄生多糖对HepG2细胞凋亡的影响第65-66页
        4.3.4 槲寄生多糖对HepG2细胞周期蛋白mRNA及蛋白表达的影响第66-69页
        4.3.5 槲寄生多糖对HepG2细胞凋亡蛋白mRNA及蛋白表达的影响第69-73页
    4.4 讨论第73-74页
    4.5 本章小结第74-75页
5 槲寄生多糖调控HepG2细胞差异表达蛋白的鉴定及生物信息学分析第75-96页
    5.1 实验材料第75-76页
        5.1.1 材料第75页
        5.1.2 主要试剂及配制第75页
        5.1.3 主要仪器第75-76页
        5.1.4 主要软件第76页
    5.2 实验方法第76-78页
        5.2.1 蛋白质提取第76页
        5.2.2 蛋白浓度测定第76页
        5.2.3 SDS-PAGE电泳检测第76页
        5.2.4 蛋白还原烷基化及酶解第76页
        5.2.5 iTRAQ标记第76-77页
        5.2.6 2D-LC-MSMS分析第77-78页
        5.2.7 蛋白的定量与定性第78页
        5.2.8 生物信息学分析第78页
    5.3 结果与分析第78-93页
        5.3.1 蛋白提取及浓度测定第78-79页
        5.3.2 差异表达蛋白的鉴定第79-82页
        5.3.3 生物信息学分析第82-93页
    5.4 讨论第93-95页
    5.5 本章小结第95-96页
结论第96-98页
参考文献第98-113页
攻读学位期间发表的学术论文第113-114页
致谢第114-116页
博士学位论文修改情况滿认表第116-117页

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