摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
1 引言 | 第10-16页 |
1.1 Ghrelin的发现 | 第10页 |
1.2 Ghrelin及其受体 | 第10-11页 |
1.3 Ghrelin的基因结构 | 第11页 |
1.4 Ghrelin的分布及定位 | 第11页 |
1.5 Ghrelin的主要生理作用 | 第11-14页 |
1.5.1 促进生长激素的释放 | 第11-12页 |
1.5.2 调节能量正平衡 | 第12页 |
1.5.3 对胃肠道功能的影响 | 第12-13页 |
1.5.4 对胰腺的影响 | 第13页 |
1.5.5 Ghrelin其他作用 | 第13-14页 |
1.6 Ghrelin的应用前景 | 第14页 |
1.7 试验目的及意义 | 第14-16页 |
2 材料与方法 | 第16-28页 |
2.1 试验材料 | 第16页 |
2.1.1 试验动物及其组织 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第16页 |
2.2 试验方法 | 第16-28页 |
2.2.1 引物设计及合成 | 第16-18页 |
2.2.2 驯鹿皱胃内DNA的提取 | 第18页 |
2.2.3 目的片段的PCR扩增 | 第18-19页 |
2.2.4 目的片段的回收与纯化 | 第19页 |
2.2.5 重组克隆质粒的构建 | 第19-20页 |
2.2.5.1 目的片段与克隆载体的连接 | 第19-20页 |
2.2.5.2 重组克隆质粒的转化 | 第20页 |
2.2.6 重组克隆质粒的筛选及PCR鉴定 | 第20页 |
2.2.7 驯鹿DNA末端序列扩增 | 第20-23页 |
2.2.8 驯鹿各器官内总RNA的提取及检测 | 第23页 |
2.2.9 反转录反应 | 第23-24页 |
2.2.10 PCR反应 | 第24-25页 |
2.2.11 RT-qPCR反应 | 第25-26页 |
2.2.12 数据处理 | 第26页 |
2.2.13 数据统计分析 | 第26页 |
2.2.14 免疫组织化学染色 | 第26-28页 |
3 试验结果 | 第28-41页 |
3.1 驯鹿Ghrelin基因克隆 | 第28-31页 |
3.1.1 菌液PCR鉴定阳性克隆 | 第28页 |
3.1.2 末端序列扩增 | 第28-29页 |
3.1.3 DNA测序 | 第29-31页 |
3.2 驯鹿Ghrelin在各器官内的表达 | 第31-34页 |
3.2.1 驯鹿总RNA的检测 | 第31-32页 |
3.2.2 驯鹿Ghrelin在各器官内的定性检测 | 第32-33页 |
3.2.3 驯鹿Ghrelin在各器官内相对定量检测 | 第33-34页 |
3.3 驯鹿Ghrelin在各器官内的定位检测 | 第34-41页 |
3.3.1 驯鹿Ghrelin在消化管内的定位 | 第34-37页 |
3.3.2 驯鹿Ghrelin在消化腺内的定位 | 第37页 |
3.3.3 驯鹿Ghrelin在其他实质性器官内的定位 | 第37-41页 |
4 讨论 | 第41-44页 |
4.1 驯鹿Ghrelin基因克隆 | 第41页 |
4.2 驯鹿Ghrelin在各器官内的定性检测 | 第41页 |
4.3 驯鹿Ghrelin在各器官内的相对定量检测 | 第41-42页 |
4.4 驯鹿Ghrelin在各器官内的的定位检测 | 第42-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
作者简介 | 第53页 |