摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1 萝卜硫素与抗癌防癌作用 | 第12-17页 |
·萝卜硫素的结构 | 第12页 |
·萝卜硫素的合成 | 第12-14页 |
·萝卜硫素的合成途径 | 第12-13页 |
·黑芥子酶 | 第13-14页 |
·萝卜硫素的抗癌防癌作用 | 第14-15页 |
·萝卜硫素的抗癌防癌机制 | 第15-17页 |
2 硒与硒的抗癌防癌作用 | 第17-20页 |
·硒 | 第17页 |
·硒的抗癌防癌作用 | 第17-18页 |
·硒的抗癌防癌机制 | 第18-20页 |
·硒预防癌症的有效形态 | 第18-19页 |
·硒化合物预防癌症的机制 | 第19-20页 |
3 萝卜硫素与硒的互作 | 第20-22页 |
·植物体内硫与硒竞争效应 | 第20页 |
·人体内硒与萝卜硫素的协同生理作用 | 第20-21页 |
·硒甲基转移酶的发现和利用 | 第21-22页 |
4 小结 | 第22-24页 |
5 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 萝卜硫素合成相关基因黑芥子酶的功能分析 | 第25-49页 |
1 材料与方法 | 第25-37页 |
·材料 | 第25页 |
·方法 | 第25-37页 |
·植物表达载体的构建 | 第25-33页 |
·无菌苗的获得 | 第33页 |
·黑芥子酶遗传转化青花菜 | 第33-34页 |
·转基因植株PCR 检测 | 第34-35页 |
·荧光定量PCR 鉴定基因表达量 | 第35-37页 |
·转基因植株苗组织GUS 染色检测 | 第37页 |
·转基因植株Southern blot 检测 | 第37页 |
·转基因植株萝卜硫素含量测定 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-47页 |
·植物表达载体构建过程重组质粒的验证 | 第37-42页 |
·过量表达载体1301-MY 的构建 | 第37-39页 |
·RNAi 表达载体1301-MY RNAi 的构建 | 第39-42页 |
·青花菜转基因苗的获得 | 第42页 |
·转基因青花菜PCR 检测 | 第42-43页 |
·转基因植物Southern blot 检测 | 第43-44页 |
·转基因青花菜组织GUS 染色 | 第44-45页 |
·转基因青花菜荧光定量检测 | 第45-46页 |
·转基因植株萝卜硫素含量检测 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
第三章 萝卜硫素调控相关基因硒甲基转移酶的功能分析 | 第49-62页 |
1 材料与方法 | 第49-52页 |
·材料 | 第49页 |
·方法 | 第49-52页 |
·植物表达载体的构建 | 第49-51页 |
·无菌苗的获得 | 第51页 |
·表达载体遗传转化青花菜与转基因植株检测 | 第51-52页 |
·转基因植株生化指标鉴定 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-60页 |
·植物表达载体构建过程重组质粒的验证 | 第52-55页 |
·过量表达载体1301-SMT 的构建 | 第52-53页 |
·RNAi 表达载体1301-SMT RNAi 的构建 | 第53-55页 |
·转基因青花菜植株的获得 | 第55-56页 |
·转基因青花菜PCR 检测 | 第56-57页 |
·转基因青花菜Southern blot 检测 | 第57-58页 |
·转基因青花菜组织GUS 染色 | 第58页 |
·转基因青花菜荧光定量检测 | 第58-60页 |
·富硒环境下转基因植株萝卜硫素含量分析 | 第60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
第四章 总结与展望 | 第62-65页 |
1 总结 | 第62-63页 |
·基因功能验证的技术 | 第62页 |
·MY 基因的功能 | 第62页 |
·SMT 基因的功能 | 第62-63页 |
2 展望 | 第63-65页 |
·MY 基因 | 第63页 |
·SMT 基因 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-75页 |
附录 | 第75-79页 |
附录1 主要仪器设备 | 第75-76页 |
附录2 MS 培养基配方 | 第76-77页 |
附录3 部分实验方法 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
作者简介 | 第80-81页 |