| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 前言 | 第14-19页 |
| 第一节 利用生物信息学软件预测STRA6基因的上游的mircroRNAs | 第19-24页 |
| 第二节 应用双荧光素酶报告基因技术验证miR-455-5p调控STRA6基因 | 第24-41页 |
| 一、双荧光素酶载体构建 | 第24-37页 |
| 二、miRNA靶点验证 | 第37-41页 |
| 第三节 动物模型的建立,QPCR检测miR-455-5p、STRA6 mRNA和ELISA检测维生素A浓度在Nitrofen诱导的先天性膈疝肺发育不良模型的表达变化 | 第41-55页 |
| 一、实验动物,试剂,材料及仪器 | 第41-42页 |
| 二、Nitrofen诱导的先天性膈疝肺发育不良动物模型的建立的及标本的收集 | 第42-43页 |
| 三、总RNA提取,总RNA浓度、完整性的检测 | 第43-46页 |
| 四、cDNA逆转录反应 | 第46-48页 |
| 五、QPCR检测miR-455-5p,STRA6 mRNA的相对表达量 | 第48-51页 |
| 六、ELISA检测Nitrofen诱导的先天性膈疝肺发育不良模型胎鼠肺的维生素A浓度的变化 | 第51-55页 |
| 第四节 免疫组织化学及免疫荧光组织化学方法检测胎鼠肺STRA6蛋白的表达 | 第55-62页 |
| 一、实验动物,试剂,材料及仪器 | 第55-56页 |
| 二、免疫组织化学及免疫荧光组织化学的标本收集及石蜡切片 | 第56页 |
| 三、免疫组织化学 | 第56-59页 |
| 四、免疫荧光组织化学 | 第59-62页 |
| 第五节 miR-455-5p在大鼠肺上皮细胞过表达后对其靶基因STRA6、细胞维生素A浓度和细胞增殖功能的影响 | 第62-89页 |
| 一、主要试剂和仪器 | 第62-63页 |
| 二、pre-miR-455-5p 载体构建 | 第63-70页 |
| 三、重组腺病毒载体包装及滴度测定 | 第70-74页 |
| 四、Western blotting检测miR-455-5p在大鼠肺上皮细胞过表达后STRA6蛋白的表达变化 | 第74-81页 |
| 五、酶联免疫吸附测定检测miR-455-5p在大鼠肺上皮细胞过表达后细胞维生素A浓度的变化 | 第81-84页 |
| 六、CCK8检测miR-455-5p过表达后对大鼠肺上皮细胞细胞增殖功能影响 | 第84-89页 |
| 全文讨论 | 第89-103页 |
| 全文结论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-116页 |
| 附录 | 第116-117页 |
| 攻读博士学位期间成果 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
