| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 研究背景综述 | 第12-57页 |
| 第一节. miRNA研究进展概述 | 第13-25页 |
| 一. miRNA的基本概念 | 第13-15页 |
| 1. miRNA发现过程 | 第13-14页 |
| 2. miRNA的命名规则 | 第14页 |
| 3. miRNA的结构特征及基因组织形式 | 第14-15页 |
| 二. miRNA的加工成熟过程及作用机制 | 第15-19页 |
| 1. miRNA的加工过程 | 第15-18页 |
| 2. miRNA的作用机制 | 第18-19页 |
| 三. miRNA的生物学意义 | 第19-22页 |
| 1. miRNA与癌症的关系 | 第20-21页 |
| 2. miRNA与胰岛功能及2型糖尿病的关系 | 第21-22页 |
| 四. 血清中的miRNA | 第22-25页 |
| 1. 血清中稳定存在miRNA | 第22页 |
| 2. 血清miRNA可以作为疾病的分子标志物 | 第22-24页 |
| 3. 血清miRNA的来源 | 第24-25页 |
| 第二节. Microvesicle及其生理学功能 | 第25-34页 |
| 一. Microvesicle的定义及发现 | 第25-26页 |
| 二. Microvesicle的形成和生理学功能 | 第26-31页 |
| 1. Shedding vesicle的形成和生理学功能 | 第26-29页 |
| 2. Exosome的形成及生物学功能 | 第29-31页 |
| 三. MV的分子组成 | 第31页 |
| 四. MV与miRNA | 第31-34页 |
| 第三节. 胰岛素抵抗及2型糖尿病 | 第34-41页 |
| 一. 胰岛素抵抗概述 | 第34-35页 |
| 二. 胰岛素的信号通路 | 第35-38页 |
| 1. 胰岛素受体 | 第35页 |
| 2. 胰岛素受体底物 | 第35-36页 |
| 3. 磷脂酰肌醇-3激酶 | 第36-37页 |
| 4. 胰岛素的信号通路 | 第37-38页 |
| 三. 炎症因子、自由脂肪酸等不良因素对胰岛素信号通路的破坏 | 第38-39页 |
| 四. 胰岛素抵抗发生的器官 | 第39-41页 |
| 第四节. 血管再生 | 第41-47页 |
| 一. 血管再生的定义及过程 | 第41页 |
| 二. 肿瘤血管再成的机制 | 第41-44页 |
| 三. 血管再生的促进因子和抑制因子 | 第44-45页 |
| 四. miRNA与血管再生 | 第45页 |
| 五. 血管再生与动脉粥样硬化 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 第二章 实验部分 | 第57-111页 |
| 第一节. 胰岛分泌的miR-29通过降低p85α的表达促进胰岛素抵抗的发生 | 第58-93页 |
| 一. 前言 | 第58-59页 |
| 二. 主要实验材料和仪器 | 第59-70页 |
| 1. 实验材料 | 第59-61页 |
| 1.1 主要细胞系来源 | 第59页 |
| 1.2 实验动物 | 第59页 |
| 1.3 主要试剂 | 第59-60页 |
| 1.4 主要仪器 | 第60-61页 |
| 2. 实验方法 | 第61-70页 |
| 2.1 细胞的培养方法 | 第61-62页 |
| 2.2 原代小鼠胰岛的提取 | 第62-63页 |
| 2.3 小鼠原代肝细胞的提取 | 第63-64页 |
| 2.4 胰岛素耐量测试 | 第64页 |
| 2.5 细胞的转染 | 第64页 |
| 2.6 细胞培养液中MV的提取 | 第64页 |
| 2.7 组织及细胞中RNA的提取 | 第64-65页 |
| 2.8 血清中RNA的提取 | 第65页 |
| 2.9 MV中RNA的提取 | 第65页 |
| 2.10 Western Blot | 第65-67页 |
| 2.11 qRT-PCR技术检测miRNAs的表达量 | 第67-68页 |
| 2.12 ob/ob小鼠的饲养与鉴定 | 第68-69页 |
| 2.13 共培养 | 第69页 |
| 2.14 数值的统计分析 | 第69页 |
| 2.15 试剂的配置 | 第69-70页 |
| 三.实验结果 | 第70-91页 |
| 1. 高脂刺激胰岛分泌miR-29并进入肝脏 | 第70-78页 |
| 2. miR-29进入肝细胞后降低肝细胞p85α的表达 | 第78-81页 |
| 3. 胰岛分泌的miR-29比高脂更早的降低p85α的表达 | 第81-85页 |
| 4. 分泌的miR-29促进小鼠胰岛素抵抗的发生 | 第85-91页 |
| 四. 讨论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-95页 |
| 第二节. THP-1分泌的miR-150促进血管新生 | 第95-109页 |
| 一. 引言 | 第95页 |
| 二. 材料与方法 | 第95-97页 |
| 1. 实验材料实验材料 | 第95-97页 |
| 1.1 细胞系来源 | 第95页 |
| 1.2 试剂 | 第95-96页 |
| 1.3 仪器 | 第96-97页 |
| 2. 实验方法 | 第97页 |
| 2.1 HMEC-1细胞成环实验 | 第97页 |
| 2.2 体内血管生成实验 | 第97页 |
| 三. 实验结果 | 第97-108页 |
| 1. THP-1的MVs促进HMEC-1的迁移 | 第97-99页 |
| 2. 分泌的miR-150促进HMEC-1成环 | 第99-103页 |
| 3. THP-1的MVs促进小鼠体内的血管新生 | 第103-105页 |
| 4. THP-1分泌的miR-150促进小鼠体内的血管新生 | 第105-106页 |
| 5. 动脉粥样硬化病人的血清促进小鼠体内血管的再生 | 第106-108页 |
| 四. 讨论 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-111页 |
| Publications | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
