中文摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-11页 |
中英文缩略词对照表 | 第14-15页 |
第1章 文献综述 | 第15-35页 |
1.1 干扰素的抗肿瘤作用 | 第15-32页 |
1.1.1 干扰素的发现与发展 | 第15-17页 |
1.1.2 干扰素的分类及理化性质 | 第17-20页 |
1.1.3 干扰素受体简介 | 第20-21页 |
1.1.4 干扰素的常见不良反应 | 第21-24页 |
1.1.5 干扰素抗肿瘤的应用现状 | 第24-28页 |
1.1.6 干扰素抗肿瘤作用的机制 | 第28-32页 |
1.2 PLGF-2 肽的由来和PLGF-2 肽修饰后的合成干扰素(SIFα) | 第32-33页 |
1.2.1 PLGF-2 肽的由来 | 第32页 |
1.2.2 基因工程方法合成新型干扰素(synthetic interferon α, SIFα) | 第32-33页 |
1.3 小结及本研究选题依据 | 第33-35页 |
第2章 研究路线 | 第35-37页 |
第3章 材料与方法 | 第37-63页 |
3.1 实验材料 | 第37-40页 |
3.1.1 实验细胞 | 第37页 |
3.1.2 细胞培养耗材及试剂 | 第37-38页 |
3.1.3 主要仪器 | 第38-39页 |
3.1.4 细胞DNA/RNA提取、逆转录、PCR相关试剂 | 第39页 |
3.1.5 琼脂糖凝胶电泳相关试剂及耗材 | 第39-40页 |
3.2 实验方法及步骤 | 第40-61页 |
3.2.1 细胞培养 | 第40页 |
3.2.2 干扰素增强肽(IEP)质粒文库构建及最优IEP筛选 | 第40-42页 |
3.2.3 构建新型干扰素质粒(SIFα) | 第42-48页 |
3.2.4 SIFα质粒的慢病毒包装 | 第48-49页 |
3.2.5 ELISA | 第49页 |
3.2.6 利用SRB测定细胞增殖 | 第49-51页 |
3.2.7 检测细胞上清液中SIFα及其对细胞增殖的影响 | 第51-55页 |
3.2.8 流式细胞仪检测细胞周期 | 第55-56页 |
3.2.9 逆转录PCR(RT-PCR)检测IFN相关基因表达 | 第56-60页 |
3.2.10 SIFα与细胞亲和能力检测 | 第60-61页 |
3.3 数据统计 | 第61-63页 |
第4章 结果 | 第63-81页 |
4.1 发现干扰素增强肽(IEP)并构建SIFα的表达载体 | 第63-65页 |
4.1.1 发现干扰素增强肽(IEP) | 第63页 |
4.1.2 构建新合成干扰素SIFα的表达载体 | 第63-64页 |
4.1.3 预测的新合成干扰素SIFα的结构 | 第64-65页 |
4.2 新合成干扰素SIFα的表达测定 | 第65-69页 |
4.2.1 293T细胞表达SIFα | 第65-67页 |
4.2.2 携带干扰素质粒的慢病毒感染肿瘤细胞及SIFα的表达 | 第67-69页 |
4.3 SIFα抑制胰腺癌细胞增殖的作用 | 第69-81页 |
4.3.1 SIFα质粒经慢病毒载体介导后对胰腺癌细胞增殖的影响 | 第69-71页 |
4.3.2 分泌出的SIFα对肿瘤细胞增殖的抑制作用 | 第71-73页 |
4.3.3 SIFα增强吉西他滨对胰腺癌细胞增殖的抑制作用 | 第73-74页 |
4.3.4 SIFα将胰腺癌细胞阻滞于S期 | 第74-75页 |
4.3.5 SIFα激活干扰素信号传导通路 | 第75-78页 |
4.3.6 SIFα与胰腺癌细胞膜的干扰素受体具有更强亲和力 | 第78-81页 |
第5章 讨论 | 第81-85页 |
第6章 结论 | 第85-87页 |
课题创新性 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-101页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第101-103页 |
致谢 | 第103页 |