| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 本文部分缩略符号对照 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1 骨骼肌的发育 | 第15-18页 |
| 1.1 骨骼肌的形成 | 第15页 |
| 1.2 骨骼肌发育的调控因子 | 第15-16页 |
| 1.3 Myostatin基因对骨骼肌发育的调控 | 第16-18页 |
| 2 microRNA基本特征 | 第18-24页 |
| 2.1 microRNA的生物合成 | 第18-21页 |
| 2.2 microRNA的生物学功能 | 第21页 |
| 2.3 microRNA的作用机制 | 第21-22页 |
| 2.4 microRNA的靶基因预测与验证 | 第22-24页 |
| 3 miRNAs与肌肉的发生 | 第24-25页 |
| 3.1 肌肉组织特异性的miRNAs | 第24页 |
| 3.2 非肌肉组织特异性的miRNAs | 第24页 |
| 3.3 miR-128的研究进展 | 第24-25页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-29页 |
| 第二章 试验部分 | 第29-83页 |
| 1 试验材料 | 第29-39页 |
| 1.1 试验动物 | 第29页 |
| 1.2 实验细胞 | 第29页 |
| 1.3 实验菌株及质粒 | 第29-31页 |
| 1.4 主要试剂与试剂盒 | 第31-33页 |
| 1.5 实验相关溶液、试剂配制 | 第33-37页 |
| 1.6 主要试验仪器 | 第37-38页 |
| 1.7 生物学软件与数据库 | 第38-39页 |
| 2 试验方法 | 第39-55页 |
| 2.1 小鼠肌肉样品采集 | 第39页 |
| 2.2 肌肉组织RNA的提取 | 第39-40页 |
| 2.3 肌肉组织样品总蛋白的提取 | 第40页 |
| 2.4 小鼠骨骼肌冰冻切片免疫荧光染色 | 第40-41页 |
| 2.5 细胞培养准备 | 第41页 |
| 2.6 C2C12细胞、HEK293T细胞复苏 | 第41页 |
| 2.7 细胞传代 | 第41页 |
| 2.8 C2C12成肌细胞的转染 | 第41-42页 |
| 2.9 C2C12成肌细胞诱导分化 | 第42页 |
| 2.10 细胞总RNA提取 | 第42-43页 |
| 2.11 C2C12成肌细胞总蛋白的提取: | 第43-44页 |
| 2.12 C2C12成肌细胞免疫荧光染色分析 | 第44页 |
| 2.13 茎环引物设计与miRNA反转录cDNA的合成 | 第44-45页 |
| 2.14 反转录合成cDNA相关步骤 | 第45-46页 |
| 2.15 普通基因检测反转录合成cDNA | 第46-48页 |
| 2.16 琼脂糖凝胶电泳 | 第48页 |
| 2.17 荧光定量PCR (Realtime-PCR) | 第48-49页 |
| 2.18 Western Blot | 第49-51页 |
| 2.19 双荧光报告检测试验 | 第51-53页 |
| 2.20 无内毒质粒DNA大量提取 | 第53-54页 |
| 2.21 C2C12细胞与HEK293T细胞的转染 | 第54页 |
| 2.22 荧光素酶活性检测 | 第54-55页 |
| 3 数据统计分析 | 第55-56页 |
| 4 实验结果与分析 | 第56-74页 |
| 4.1 miRNA-128在体内骨骼肌细胞中的表达分析 | 第56页 |
| 4.2 miRNA-128在C2C12成肌细分化过程中的表达 | 第56-58页 |
| 4.3 MSTN基因在体内外骨骼肌细胞中的表达分析 | 第58-61页 |
| 4.4 生物信息学分析 | 第61-62页 |
| 4.5 双荧光报告检测分析 | 第62-64页 |
| 4.6 C2C12成肌细胞增殖过程中miRNA差异表达对MSTN基因的影响 | 第64-68页 |
| 4.7 C2C12成肌细胞分化过程中miRNA差异表达对MSTN基因的影响 | 第68-70页 |
| 4.8 miRNA-128差异表达对C2C12成肌细胞增殖的影响 | 第70-72页 |
| 4.9 miRNA-128差异表达对C2C12成肌细胞分化的影响 | 第72-74页 |
| 5 讨论 | 第74-78页 |
| 6 结论与创新点 | 第78-79页 |
| 6.1 结论 | 第78页 |
| 6.2 创新点 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
