| 摘要 | 第7-9页 |
| 主要缩略语英文索引 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-15页 |
| (1) MeCP2基因和蛋白的结构特点 | 第10-11页 |
| (2) MeCP2的功能研究 | 第11-12页 |
| (3) 斑马鱼神经发育模型 | 第12-13页 |
| (4) Notch信号通路 | 第13-15页 |
| 材料和方法 | 第15-29页 |
| 1 材料 | 第15-20页 |
| 1.1 斑马鱼品系 | 第15页 |
| 1.2 表达质粒 | 第15页 |
| 1.3 主要耗材 | 第15-20页 |
| 1.3.1 主要仪器 | 第15-16页 |
| 1.3.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.3.3 主要试剂的配制 | 第17-20页 |
| 2 方法 | 第20-29页 |
| 2.1 抗体制备的技术路线 | 第20页 |
| 2.2 抗原选择及引物设计 | 第20-21页 |
| 2.3 重组质粒pGEX-4T-1/MeCP2(170-223)构建与验证 | 第21-22页 |
| 2.3.1 目的基因的获得 | 第21页 |
| 2.3.2 重组质粒pGEX-4T-1/zMeCP2(170-223)的构建 | 第21-22页 |
| 2.3.3 重组质粒pGEX-4T-1/zMeCP2(170-223)的验证 | 第22页 |
| 2.4 GST-zMeCP2(170-223)融合蛋白的表达和纯化 | 第22-23页 |
| 2.4.1 GST-zMeCP2(170-223)融合蛋白表达条件的摸索 | 第22页 |
| 2.4.2 GST-zMeCP2(170-223)融合蛋白的纯化 | 第22-23页 |
| 2.5 兔抗斑马鱼zMeCP2(170-223)抗体的获得 | 第23页 |
| 2.6 Western检测和免疫共沉淀 | 第23-24页 |
| 2.6.1 Western检测 | 第23页 |
| 2.6.2 免疫共沉淀 | 第23-24页 |
| 2.7 斑马鱼脑组织冷冻切片的制备及免疫荧光 | 第24页 |
| 2.8 斑马鱼的饲养 | 第24-25页 |
| 2.9 斑马鱼的显微注射 | 第25-26页 |
| 2.10 斑马鱼胚胎免疫荧光染色 | 第26页 |
| 2.11 荧光成像拍摄 | 第26页 |
| 2.12 斑马鱼胚胎原位杂交 | 第26-29页 |
| 结果 | 第29-44页 |
| 1 PCR扩增结果和重组质粒的构建及验证结果 | 第29-30页 |
| 2 融合蛋白GST-zMeCP2(170-223)的表达条件摸索及纯化结果 | 第30-32页 |
| 3 zMeCP2抗体的IP-western blot分析与免疫荧光 | 第32-34页 |
| 4 部分质谱鉴定结果及相关IP-western blot验证结果 | 第34-35页 |
| 5 MeCP2在斑马鱼神经发育过程中的表达 | 第35-36页 |
| 6 注射MeCP2-MO斑马鱼表型变化 | 第36-37页 |
| 7 注射MeCP2-MO后NOTCH信号的表达变化 | 第37-39页 |
| 8 敲低MeCP2的胚胎对神经因子表达影响 | 第39-42页 |
| 9 注射MeCP2-MO后转录抑制因子hey2的表达变化 | 第42-44页 |
| 讨论 | 第44-47页 |
| 全文结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| Abstract | 第53-55页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
