摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 高原养猪业现状 | 第12页 |
1.2 荣昌猪简介 | 第12-13页 |
1.2.1 荣昌猪的历史 | 第12页 |
1.2.2 荣昌猪的生产性能 | 第12页 |
1.2.3 荣昌猪的开发利用 | 第12-13页 |
1.3 高原环境适应性 | 第13-17页 |
1.3.1 高原低氧适应性 | 第13-14页 |
1.3.2 高原低氧环境对血液生理指标的影响 | 第14页 |
1.3.3 一氧化氮酶活性对机体高原低氧环境的适应性 | 第14页 |
1.3.4 线粒体基因与高原环境的适应性 | 第14-15页 |
1.3.5 高原低氧相关基因的功能 | 第15-17页 |
1.4 低氧环境对哺乳动物胚胎发育的影响 | 第17-18页 |
1.5 线粒体DNA拷贝数与能量代谢 | 第18-21页 |
1.5.1 线粒体结构 | 第18-19页 |
1.5.2 线粒体功能 | 第19页 |
1.5.3 线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA) | 第19-20页 |
1.5.4 线粒体DNA拷贝数 | 第20-21页 |
1.6 荧光定量PCR | 第21-22页 |
2 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
3 材料与方法 | 第23-30页 |
3.1 试验动物 | 第23页 |
3.2 样品采集 | 第23页 |
3.3 主要仪器及试剂 | 第23-25页 |
3.4 实验方法 | 第25-30页 |
3.4.1 DNA提取及检测 | 第25页 |
3.4.2 RNA提取及检测 | 第25-26页 |
3.4.3 PCR引物设计及合成 | 第26-27页 |
3.4.4 定量各样品中mtDNA拷贝数 | 第27-28页 |
3.4.5 mRNA反转录 | 第28-29页 |
3.4.6 定量各样品中相关基因表达 | 第29页 |
3.4.7 数据分析 | 第29-30页 |
4 结果分析 | 第30-38页 |
4.1 扩增标准曲线 | 第30页 |
4.2 高原与平原出生仔猪不同组织线粒体拷贝数的差异 | 第30-32页 |
4.3 线粒体基因在各组织中的表达情况 | 第32-34页 |
4.3.1 ND1基因在高原与正常仔猪中的表达差异 | 第32页 |
4.3.2 ATP6基因在高原妊娠与正常妊娠荣昌仔猪的表达差异 | 第32-33页 |
4.3.3 COX1基因在高原妊娠与正常妊娠仔猪中的表达差异 | 第33页 |
4.3.4 mtDNA拷贝数与线粒体基因表达量相关性 | 第33-34页 |
4.4 核基因表达量差异分析 | 第34-38页 |
4.4.1 HIF-1α基因在高原妊娠与正常妊娠仔猪中的表达差异 | 第34页 |
4.4.2 GOT2基因在高原妊娠与正常妊娠仔猪中的表达差异 | 第34-35页 |
4.4.3 VEGF、ET1和NOS基因在高原妊娠与正常妊娠仔猪中的表达差异 | 第35-37页 |
4.4.4 核基因表达量与线粒体拷贝数存在显著负关系 | 第37-38页 |
5 讨论 | 第38-42页 |
5.1 通过荧光定量PCR检测MTDNA拷贝数具有参考性 | 第38页 |
5.2 初生仔猪线粒体DNA拷贝数的组织差异 | 第38-39页 |
5.3 高原妊娠环境初生仔猪MTDNA拷贝数显著降低 | 第39-40页 |
5.4 血管生成基因对高原环境下猪胚胎发育的影响 | 第40-42页 |
6 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-52页 |
致谢 | 第52页 |