| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 1 蟹病毒研究进展 | 第14-21页 |
| ·杆状病毒(Baculovirus) | 第14-15页 |
| ·类布尼亚病毒(Bunya-Like Viruses) | 第15页 |
| ·副粘病毒 | 第15页 |
| ·疱疹样病毒 | 第15-16页 |
| ·弹状病毒 | 第16页 |
| ·细小病毒 | 第16页 |
| ·小RNA病毒 | 第16页 |
| ·线头病毒科 | 第16-17页 |
| ·虹彩样病毒 | 第17-18页 |
| ·呼肠孤病毒 | 第18-19页 |
| ·双顺反子病毒 | 第19-21页 |
| ·其他 | 第21页 |
| 2 环境因子对于青蟹生理生化的影响 | 第21-22页 |
| 3 环境因子对于病毒增殖的影响 | 第22-23页 |
| 第二章 温度对青蟹双顺反子病毒-1和青蟹呼肠孤病毒增殖的影响 | 第23-38页 |
| 1 材料与方法 | 第23-29页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·试验动物 | 第23页 |
| ·酶、试剂 | 第23-24页 |
| ·溶液配制 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·常用仪器 | 第24-25页 |
| ·病毒粗提液 | 第25页 |
| ·样品的采集及预处理 | 第25页 |
| ·引物及探针 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26页 |
| ·人工感染组 | 第26页 |
| ·自然感染组 | 第26页 |
| ·样品检测 | 第26-29页 |
| ·引物与探针序列 | 第26-27页 |
| ·总RNA的提取 | 第27页 |
| ·cDNA的合成 | 第27-28页 |
| ·MCDV-1标准品的制备 | 第28页 |
| ·MCRV标准品的制备 | 第28页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第28页 |
| ·MCDV-1和MCRV荧光定量PCR检测反应条件 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-33页 |
| ·两种病毒实时荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第29页 |
| ·MCDV-1荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第29页 |
| ·MCRV荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第29页 |
| ·人工感染组拟穴青蟹血淋巴中MCDV-1和MCRV的增殖 | 第29-31页 |
| ·自然感染组拟穴青蟹血淋巴中MCDV-1和MCRV的增殖 | 第31-33页 |
| ·不同温度下拟穴青蟹的死亡情况 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-38页 |
| 第三章 青蟹双顺反子病毒-1和青蟹呼肠孤病毒的组织分布 | 第38-47页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试验动物 | 第38页 |
| ·酶、试剂 | 第38页 |
| ·溶液配制 | 第38页 |
| ·常用仪器 | 第38页 |
| ·病毒粗提液 | 第38-39页 |
| ·样品的采集及预处理 | 第39页 |
| ·引物及探针 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39页 |
| ·人工感染组 | 第39页 |
| ·自然感染组 | 第39页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第39-40页 |
| ·总RNA的提取及cDNA的合成 | 第39页 |
| ·MCDV-1标准品的制备 | 第39-40页 |
| ·MCRV标准品的制备 | 第40页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第40页 |
| ·MCDV-1和MCRV荧光定量PCR检测反应条件 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-43页 |
| ·两种病毒实时荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第40-41页 |
| ·MCDV-1荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第40页 |
| ·MCRV荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第40-41页 |
| ·青蟹双顺反子病毒-1的组织分布 | 第41-42页 |
| ·青蟹呼肠孤病毒的组织分布 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-47页 |
| 第四章 青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立及其组织定位 | 第47-57页 |
| 1 材料与方法 | 第47-52页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·试验样品 | 第47页 |
| ·酶、试剂 | 第47页 |
| ·溶液配制 | 第47-48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·常用仪器设备 | 第48页 |
| ·拟穴青蟹组织样品的处理 | 第48-49页 |
| ·总RNA的提取 | 第48-49页 |
| ·逆转录反应 | 第49页 |
| ·原位杂交组织切片制备 | 第49页 |
| ·探针的制备 | 第49-51页 |
| ·MCDV-1模板的制备 | 第49-50页 |
| ·探针标记 | 第50页 |
| ·探针特异性试验 | 第50-51页 |
| ·探针灵敏度试验 | 第51页 |
| ·原位杂交 | 第51-52页 |
| ·原位杂交 | 第51页 |
| ·对照设置 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·探针的特异性实验 | 第52页 |
| ·探针的灵敏度实验 | 第52-53页 |
| ·原位杂交结果 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-57页 |
| 小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
| 专利及发表文章 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
