| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-16页 |
| ·DNA甲基化在哺乳动物早期胚胎发育中的作用 | 第10-11页 |
| ·转录因子对早期胚胎发育的影响 | 第11-12页 |
| ·DNA甲基化与转录因子之间的关系 | 第12页 |
| ·转录因子Oct4在早期胚胎的中的表达 | 第12-13页 |
| ·Dnmtl在早期胚胎中的表达 | 第13-14页 |
| ·转录因子调控靶基因的研究方法 | 第14-16页 |
| ·启动子分析 | 第14-15页 |
| ·凝胶阻滞迁移分析 | 第15页 |
| ·染色质免疫共沉淀分析 | 第15页 |
| ·DNA基因芯片技术 | 第15页 |
| ·生物信息学分析 | 第15-16页 |
| 2 引言 | 第16-17页 |
| 第一部分 小鼠植入前各时期胚胎中Dnmt1表达模式分析 | 第17-24页 |
| 1 实验材料和方法 | 第17-21页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·实验药品及耗材 | 第17页 |
| ·仪器设备 | 第17页 |
| ·实验药品的配制 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-21页 |
| 2. 结果与分析 | 第21-24页 |
| ·小鼠体内发育植入前各时期胚胎的收集 | 第21-22页 |
| ·Real-time PCR引物的验证 | 第22-23页 |
| ·Real-time PCR分析Dnmt1在植入前各时期胚胎中的表达差异 | 第23-24页 |
| 第二部分 Dnmtl启动子克隆及转录因子Oct4对Dnmt1启动子活性的影响 | 第24-39页 |
| 1. 材料与方法 | 第24-32页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-32页 |
| 2. 结果与分析 | 第32-39页 |
| ·小鼠Dnmt1基因启动子5'端缺失片段的扩增 | 第32-33页 |
| ·小鼠Dnmt1基因启动子5'端缺失片段与pGL3-Basic载体重组质粒鉴定 | 第33-36页 |
| ·启动子活性检测 | 第36-39页 |
| 第三部分 Oct4调控Dnmt1的分子机制 | 第39-48页 |
| 1. 材料与仪器 | 第39-40页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第39页 |
| ·实验仪器 | 第39-40页 |
| ·试剂的配制 | 第40页 |
| 2. 免疫共沉淀实验 | 第40-44页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-44页 |
| 3. 凝胶阻滞迁移实验 | 第44-48页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·凝胶阻滞迁移实验结果 | 第46-48页 |
| 第四部分 过表达Oct4对Dnmt1酶活力的影响 | 第48-54页 |
| 1. 材料与方法 | 第48-54页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第48页 |
| ·实验仪器 | 第48页 |
| ·实验试剂的配制 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| ·实验结果 | 第52-54页 |
| 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
| 硕士期间发表的主要研究论文 | 第65页 |
