| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| ·颠茄概况 | 第10-11页 |
| ·托品烷类生物碱的概况 | 第11页 |
| ·托品烷类生物碱的生物合成途径 | 第11-12页 |
| ·托品烷类生物碱生物合成途径上的基因和酶 | 第12-13页 |
| ·环境因子对多胺和TAs生物合成的影响 | 第13-14页 |
| ·精氨酸脱羧酶基因的相关研究 | 第14页 |
| ·植物转基因技术 | 第14-15页 |
| ·毛状根体系在药用植物次生代谢生产中的应用 | 第15-16页 |
| 第二章 绪论 | 第16-18页 |
| ·研究的目的和意义 | 第16页 |
| ·研究范围和内容 | 第16-17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| 第三章 材料与方法 | 第18-36页 |
| ·实验材料及试剂耗材 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·仪器和设备 | 第18页 |
| ·试剂盒及试剂购买 | 第18-19页 |
| ·常规试剂和培养基的配制 | 第19页 |
| ·常规方法介绍 | 第19-23页 |
| ·颠茄总RNA的提取与检测 | 第19-20页 |
| ·DNA产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第20页 |
| ·目的条带的回收 | 第20页 |
| ·连接反应 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌DH5α 感受态细胞的制备（Ca Cl2法） | 第21页 |
| ·连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第21-22页 |
| ·重组质粒转化发根农杆菌C58C1感受态细胞 | 第22页 |
| ·重组子的鉴定、测序 | 第22页 |
| ·质粒的提取 | 第22页 |
| ·TPS法抽提颠茄基因组DNA | 第22-23页 |
| ·Ab ADC基因的克隆与分析 | 第23-27页 |
| ·颠茄总RNA的提取与检测 | 第23页 |
| ·从颠茄总RNA合成第一链c DNA | 第23页 |
| ·Ab ADC基因的克隆 | 第23-25页 |
| ·Ab ADC基因 5'RACE的获得 | 第25-27页 |
| ·Ab ADC基因全长c DNA的克隆 | 第27页 |
| ·Ab ADC基因的生物信息学分析 | 第27-28页 |
| ·颠茄植物RNAi沉默载体的构建及工程菌的获得 | 第28-31页 |
| ·颠茄发根培养体系的建立 | 第31-33页 |
| ·工程菌的的活化 | 第31页 |
| ·工程菌菌株转化颠茄外植体 | 第31页 |
| ·转基因颠茄发根的PCR鉴定 | 第31-33页 |
| ·转基因颠茄发根的扩大培养 | 第33页 |
| ·根癌农杆菌C58C1诱导颠茄发根的建立 | 第33页 |
| ·基因表达量分析 | 第33-34页 |
| ·Ab ADC基因的组织表达谱分析 | 第33-34页 |
| ·Ab ADC基因的诱导谱分析 | 第34页 |
| ·转基因发根中Ab ADC基因的表达量分析 | 第34页 |
| ·颠茄发根中生物碱含量的检测 | 第34-36页 |
| 第四章 结果与分析 | 第36-54页 |
| ·颠茄Ab ADC基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·Ab ADC基因的生物信息学分析 | 第37-43页 |
| ·Ab ADC基因的序列分析 | 第37-39页 |
| ·Ab ADC编码蛋白二级结构预测 | 第39-40页 |
| ·Ab ADC氨基酸序列与保守结构域分析 | 第40-42页 |
| ·Ab ADC编码蛋白信号肽和亚细胞定位预测分析 | 第42页 |
| ·Ab ADC分子进化树的构建 | 第42-43页 |
| ·Ab ADC基因的组织表达谱分析 | 第43-44页 |
| ·不同处理对颠茄发根的影响 | 第44-47页 |
| ·颠茄发根的获得 | 第44-45页 |
| ·颠茄发根的胁迫处理 | 第45-47页 |
| ·干扰载体PBIN19- Ab ADC1和PBIN19- Ab ADC2的构建及工程菌的获得 | 第47-48页 |
| ·干扰载体PBIN19- Ab ADC1和PBIN19- Ab ADC2的构建 | 第47-48页 |
| ·工程菌的获得 | 第48页 |
| ·转基因颠茄发根的获得及分析 | 第48-52页 |
| ·转基因发根的荧光定量PCR检测 | 第51页 |
| ·转基因颠茄发根中生物碱含量的测定 | 第51-52页 |
| ·结论与展望 | 第52-54页 |
| ·结论 | 第52-53页 |
| ·展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录 缩略词表 | 第59-60页 |
| 硕士期间发表论文 | 第60页 |
| 参加课题 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
