| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-21页 |
| ·CXCR4的概述 | 第8-13页 |
| ·CXCR4和CXCL12的结构及功能 | 第8-9页 |
| ·CXCR4在肿瘤细胞内的表达情况 | 第9-10页 |
| ·CXCR4对肿瘤的作用 | 第10-13页 |
| ·CXCR4对肿瘤治疗的作用 | 第13页 |
| ·肿瘤干细胞的概念及特性 | 第13-15页 |
| ·肿瘤干细胞的来源 | 第13-14页 |
| ·肿瘤干细胞的特征 | 第14-15页 |
| ·单链抗体的概述 | 第15-17页 |
| ·单链抗体的表达方式 | 第15-16页 |
| ·单链抗体在治疗肿瘤上的应用 | 第16-17页 |
| ·酵母双杂交体系 | 第17-19页 |
| ·酵母双杂交的基本原理 | 第17页 |
| ·酵母双杂交的应用 | 第17-18页 |
| ·酵母双杂交的优缺点 | 第18-19页 |
| ·选题的目的、意义 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-40页 |
| ·实验材料 | 第21-28页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·实验试剂 | 第22-23页 |
| ·细菌及质粒 | 第23-24页 |
| ·主要溶液 | 第24-28页 |
| ·实验方法 | 第28-40页 |
| ·诱饵质粒pGBKT7-CXCR4的构建 | 第28-29页 |
| ·将诱饵质粒pGBKT7-CXCR4转化到酵母AH109内及其自激活检测 | 第29-31页 |
| ·单链抗体文库的筛选 | 第31页 |
| ·候选阳性克隆的划线筛选 | 第31页 |
| ·将候选阳性克隆质粒进行回转验证 | 第31-33页 |
| ·阳性克隆的DNA序列分析 | 第33页 |
| ·含有单链抗体基因的表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·单链抗体的表达纯化 | 第36-39页 |
| ·采用ELISA检测单链抗体与抗原CXCR4的结合 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-51页 |
| ·诱饵质粒pGBKT7-CXCR4测序鉴定 | 第40页 |
| ·AH109表型鉴定 | 第40-41页 |
| ·检测诱饵质粒pGBKT7-CXCR4的自激活作用 | 第41页 |
| ·单链抗体文库的筛选 | 第41-42页 |
| ·候选阳性克隆的划线筛选 | 第42-43页 |
| ·候选阳性克隆的回转验证 | 第43-46页 |
| ·阳性克隆的DNA序列分析 | 第46页 |
| ·含有单链抗体基因的表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·单链抗体的包涵体纯化 | 第47-50页 |
| ·诱导温度的优化 | 第47-48页 |
| ·采用WB验证单链抗体 | 第48页 |
| ·单链抗体的包涵体纯化 | 第48-50页 |
| ·检测单链抗体与抗原CXCR4的结合 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-54页 |
| ·抗原CXCR4的选择 | 第51页 |
| ·酵母双杂交技术的选择 | 第51-52页 |
| ·假阳性的排除 | 第52页 |
| ·阳性克隆的DNA序列分析以及单链抗体的表达纯化 | 第52-53页 |
| ·检测单链抗体与抗原CXCR4的结合 | 第53-54页 |
| 第五章 结论和展望 | 第54-56页 |
| ·实验结论： | 第54-55页 |
| ·诱饵质粒pGBKT7-CXCR4的鉴定 | 第54页 |
| ·利用酵母双杂交技术筛选抗CXCR4的单链抗体及初步分析 | 第54页 |
| ·阳性克隆的DNA序列分析、表达载体构建及其表达纯化 | 第54页 |
| ·单链抗体与抗原CXCR4的结合 | 第54-55页 |
| ·实验展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 在学期间发表论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
