个人简历 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 栝楼属植物鲨烯合酶(SS)基因克隆及序列分析 | 第14-51页 |
一、截叶栝楼鲨烯合酶SS基因全长cDNA序列克隆 | 第14-29页 |
1. 材料与仪器 | 第14-16页 |
·植物材料 | 第14页 |
·实验仪器 | 第14页 |
·主要试剂 | 第14-15页 |
·溶液配制 | 第15页 |
·RNA酶处理 | 第15-16页 |
2. 方法 | 第16-29页 |
·截叶栝楼总RNA的提取及电泳检测 | 第16-17页 |
·截叶栝楼SS基因3'RACE扩增 | 第17-23页 |
·截叶栝楼SS基因5'RACE扩增 | 第23-28页 |
·截叶栝楼SS基因全长cDNA拼接及生物信息学分析 | 第28-29页 |
二、栝楼鲨烯合酶SS基因cDNA克隆 | 第29-35页 |
1 材料与仪器 | 第29页 |
2 方法 | 第29-35页 |
·栝楼总RNA的提取及电泳检测 | 第29页 |
·栝楼SS基因3'RACE扩增 | 第29-32页 |
·栝楼SS基因5'RACE扩增 | 第32-34页 |
·栝楼SS基因cDNA拼接及生物信息学分析 | 第34-35页 |
三、结果与分析 | 第35-51页 |
·植物总RNA电泳检测 | 第35页 |
·3'RACE及5'RACE扩增电泳结果 | 第35-36页 |
·菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第36-38页 |
·栝楼属植物鲨烯合酶SS基因生物信息学分析 | 第38-51页 |
第二部分 栝楼属植物鲨烯合酶SS基因的原核表达 | 第51-64页 |
1 材料与仪器 | 第51-53页 |
·实验材料 | 第51页 |
·实验仪器 | 第51页 |
·溶液配制 | 第51-53页 |
2 方法 | 第53-59页 |
·目的片段SS与pET32a(+)原核表达载体构建重组体 | 第53-58页 |
·重组质粒pET32a(+)-SS诱导表达及SDS-PAGE电泳鉴定 | 第58页 |
·诱导表达蛋白SDS-PAGE电泳鉴定 | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-61页 |
·栝楼属植物SS基因ORF扩增 | 第59页 |
·栝楼属植物SS基因原核表达SDS-PAGE电泳结果 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-64页 |
小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
综述 | 第69-83页 |
参考文献 | 第78-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第84页 |