| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-14页 |
| 第一章 前言综述 | 第14-22页 |
| ·太平洋鳕研究综述 | 第14-15页 |
| ·太平洋鳕生物学简介 | 第14页 |
| ·太平洋鳕增养殖前景及国内外研究现状 | 第14-15页 |
| ·鱼类干扰素系统的研究进展 | 第15-20页 |
| ·鱼类干扰素系统研究意义及研究进展 | 第15-16页 |
| ·鱼类干扰素的信号通路 | 第16-20页 |
| ·TLR3研究进展 | 第17页 |
| ·MDA5研究进展 | 第17-18页 |
| ·ATG5研究进展 | 第18页 |
| ·IPS1研究进展 | 第18-19页 |
| ·IRF3研究进展 | 第19页 |
| ·IRF7研究进展 | 第19-20页 |
| ·研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 第二章 太平洋鳕TLR3的克隆与表达分析 | 第22-34页 |
| ·材料与方法 | 第22-28页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要药品、试剂盒和菌株 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·主要溶液的配置 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·太平洋鳕各组织总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·反转录反应 | 第24页 |
| ·太平洋鳕TLR3基因cDNA的扩增 | 第24-25页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第25页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第25-26页 |
| ·热击法转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞 | 第26页 |
| ·PCR法鉴定阳性克隆 | 第26页 |
| ·核酸序列测定 | 第26页 |
| ·质粒提取 | 第26-27页 |
| ·计算标准品质粒拷贝数 | 第27页 |
| ·太平洋鳕TLR3基因绝对荧光定量 | 第27页 |
| ·绝对荧光定量PCR检测TLR3基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第27页 |
| ·生物信息学分析 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第28页 |
| ·太平洋鳕TLR3基因cDNA序列及氨基酸序列推导和分析 | 第28-30页 |
| ·标准品质粒的制备及拷贝数计算 | 第30页 |
| ·太平洋鳕TLR3基因绝对定量反应体系的建立 | 第30-32页 |
| ·TLR3基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 太平洋鳕MDA5的克隆与表达分析 | 第34-42页 |
| ·材料与方法 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·主要药品、试剂盒和菌株 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·主要溶液的配置 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·太平洋鳕各组织总RNA的提取 | 第34页 |
| ·反转录反应 | 第34页 |
| ·太平洋鳕MDA5基因cDNA的扩增 | 第34-35页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第35页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第35页 |
| ·热击法转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞 | 第35页 |
| ·PCR法鉴定阳性克隆 | 第35-36页 |
| ·核酸序列测定 | 第36页 |
| ·质粒提取 | 第36页 |
| ·计算标准品质粒拷贝数 | 第36页 |
| ·太平洋鳕MDA5基因绝对荧光定量 | 第36页 |
| ·绝对荧光定量PCR检测MDA5基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第36页 |
| ·生物信息学分析 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-41页 |
| ·总RNA的提取 | 第36页 |
| ·太平洋鳕MDA5基因cDNA序列及氨基酸序列推导和分析 | 第36-38页 |
| ·标准品质粒的制备及拷贝数计算 | 第38页 |
| ·太平洋鳕MDA5基因绝对定量反应体系的建立 | 第38-40页 |
| ·MDA5基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 太平洋鳕ATG5的克隆与表达分析 | 第42-53页 |
| ·材料与方法 | 第42-45页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·实验动物 | 第42页 |
| ·主要药品、试剂盒和菌株 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·主要溶液的配置 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·太平洋鳕各组织总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·反转录反应 | 第43页 |
| ·太平洋鳕ATG5基因cDNA的扩增 | 第43-44页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第44页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第44页 |
| ·热击法转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞 | 第44页 |
| ·PCR法鉴定阳性克隆 | 第44页 |
| ·核酸序列测定 | 第44页 |
| ·质粒提取 | 第44页 |
| ·计算标准品质粒拷贝数 | 第44页 |
| ·太平洋鳕ATG5基因绝对荧光定量 | 第44页 |
| ·绝对荧光定量PCR检测ATG5基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第44页 |
| ·生物信息学分析 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-51页 |
| ·总RNA的提取 | 第45页 |
| ·太平洋鳕ATG5基因cDNA序列及氨基酸序列推导和分析 | 第45-46页 |
| ·太平洋鳕ATG5基因氨基酸序列物种间比较 | 第46-47页 |
| ·脊椎动物ATG5基因系统发育树的构建 | 第47-48页 |
| ·标准品质粒的制备及拷贝数计算 | 第48-49页 |
| ·太平洋鳕ATG5基因绝对定量反应体系的建立 | 第49-50页 |
| ·ATG5基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 太平洋鳕IPS1的克隆与表达分析 | 第53-60页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·实验动物 | 第53页 |
| ·主要药品、试剂盒和菌株 | 第53页 |
| ·主要仪器设备 | 第53页 |
| ·主要溶液的配置 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·太平洋鳕各组织总RNA的提取 | 第53页 |
| ·反转录反应 | 第53页 |
| ·太平洋鳕IPS1基因cDNA的扩增 | 第53-54页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第54页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第54页 |
| ·热击法转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞 | 第54页 |
| ·PCR法鉴定阳性克隆 | 第54页 |
| ·核酸序列测定 | 第54页 |
| ·质粒提取 | 第54-55页 |
| ·计算标准品质粒拷贝数 | 第55页 |
| ·太平洋鳕MDA5基因绝对荧光定量 | 第55页 |
| ·绝对荧光定量PCR检测IPS1基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第55页 |
| ·生物信息学分析 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-59页 |
| ·总RNA的提取 | 第55页 |
| ·太平洋鳕IPS1基因cDNA序列及氨基酸序列推导和分析 | 第55-56页 |
| ·标准品质粒的制备及拷贝数计算 | 第56页 |
| ·太平洋鳕IPS1基因绝对定量反应体系的建立 | 第56-58页 |
| ·IPS1基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 第六章 太平洋鳕IRF3的克隆与表达分析 | 第60-70页 |
| ·材料与方法 | 第60-62页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·主要药品、试剂盒和菌株 | 第60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60页 |
| ·主要溶液的配置 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·太平洋鳕各组织总RNA的提取 | 第60页 |
| ·反转录反应 | 第60-61页 |
| ·太平洋鳕IRF3基因cDNA的扩增 | 第61页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第61页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第61页 |
| ·热击法转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞 | 第61页 |
| ·PCR法鉴定阳性克隆 | 第61页 |
| ·核酸序列测定 | 第61-62页 |
| ·质粒提取 | 第62页 |
| ·计算标准品质粒拷贝数 | 第62页 |
| ·太平洋鳕IRF3基因绝对荧光定量 | 第62页 |
| ·绝对荧光定量PCR检测IRF3基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第62页 |
| ·生物信息学分析 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-68页 |
| ·总RNA的提取 | 第62页 |
| ·太平洋鳕IRF3基因cDNA序列及氨基酸序列推导和分析 | 第62-63页 |
| ·太平洋鳕IRF3基因氨基酸序列物种间比较 | 第63-64页 |
| ·脊椎动物IRF3基因系统发育树的构建 | 第64-66页 |
| ·标准品质粒的制备及拷贝数计算 | 第66页 |
| ·太平洋鳕IRF3基因绝对定量反应体系的建立 | 第66-68页 |
| ·IRF3基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第七章 太平洋鳕IRF7的克隆与表达分析 | 第70-82页 |
| ·材料与方法 | 第70-72页 |
| ·材料 | 第70页 |
| ·实验动物 | 第70页 |
| ·主要药品、试剂盒和菌株 | 第70页 |
| ·主要仪器设备 | 第70页 |
| ·主要溶液的配置 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-72页 |
| ·太平洋鳕各组织总RNA的提取 | 第70页 |
| ·反转录反应 | 第70-71页 |
| ·太平洋鳕IRF7基因cDNA的扩增 | 第71页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第71页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第71页 |
| ·热击法转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞 | 第71页 |
| ·PCR法鉴定阳性克隆 | 第71页 |
| ·核酸序列测定 | 第71-72页 |
| ·质粒提取 | 第72页 |
| ·计算标准品质粒拷贝数 | 第72页 |
| ·太平洋鳕IRF7基因绝对荧光定量 | 第72页 |
| ·绝对荧光定量PCR检测IRF7基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第72页 |
| ·生物信息学分析 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-80页 |
| ·总RNA的提取 | 第72页 |
| ·太平洋鳕IRF7基因cDNA序列及氨基酸序列推导和分析 | 第72-73页 |
| ·太平洋鳕IRF7基因氨基酸序列物种间比较 | 第73-75页 |
| ·脊椎动物IRF7基因系统发育树的构建 | 第75-77页 |
| ·标准品质粒的制备及拷贝数计算 | 第77-78页 |
| ·太平洋鳕IRF7基因绝对定量反应体系的建立 | 第78-79页 |
| ·IRF7基因在太平洋鳕不同组织中的表达差异 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| 第八章 太平洋鳕仔鱼期干扰素各相关基因表达规律的研究 | 第82-89页 |
| ·材料与方法 | 第82-84页 |
| ·材料 | 第82页 |
| ·实验动物 | 第82页 |
| ·主要仪器设备 | 第82页 |
| ·主要溶液的配置 | 第82页 |
| ·实验方法 | 第82-84页 |
| ·太平洋鳕各组织总RNA的提取 | 第82-83页 |
| ·反转录反应 | 第83页 |
| ·质粒提取 | 第83页 |
| ·计算标准品质粒拷贝数 | 第83页 |
| ·太平洋鳕干扰素系统基因绝对荧光定量 | 第83页 |
| ·绝对荧光定量PCR检测干扰素系统相关基因在太平洋鳕仔鱼期不同日龄中的表达差异 | 第83页 |
| ·生物信息学分析 | 第83-84页 |
| ·结果 | 第84-88页 |
| ·总RNA的提取 | 第84页 |
| ·标准品质粒的制备及拷贝数计算 | 第84页 |
| ·太平洋鳕干扰素系统相关基因绝对定量反应体系的建立 | 第84页 |
| ·TR3基因在太平洋鳕仔鱼期不同日龄中的表达规律 | 第84-85页 |
| ·MDA5基因在太平洋鳕仔鱼期不同日龄中的表达规律 | 第85-86页 |
| ·IPS1基因在太平洋鳕仔鱼期不同日龄中的表达规律 | 第86页 |
| ·IRF3基因在太平洋鳕仔鱼期不同日龄中的表达规律 | 第86-87页 |
| ·IRF7基因在太平洋鳕仔鱼期不同日龄中的表达规律 | 第87-88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| 第九章 太平洋鳕干扰素相关基因在太平洋鳕仔鱼应答Poly(I:C)的表达规律 | 第89-102页 |
| ·材料与方法 | 第89-91页 |
| ·材料 | 第89-90页 |
| ·实验动物 | 第89页 |
| ·主要药品、试剂盒和菌株 | 第89页 |
| ·主要仪器设备 | 第89-90页 |
| ·主要溶液的配置 | 第90页 |
| ·实验方法 | 第90-91页 |
| ·太平洋鳕各组织总RNA的提取 | 第90页 |
| ·反转录反应 | 第90页 |
| ·相对荧光定量PCR检测干扰素系统相关基因在太平洋鳕2日龄和12日龄仔鱼的处理组和空白对照组中的表达差异 | 第90-91页 |
| ·生物信息学分析 | 第91页 |
| ·结果 | 第91-99页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第91-92页 |
| ·太平洋鳕TLR3在PolyIC处理后的表达规律 | 第92-93页 |
| ·太平洋鳕MDA5在PolyIC处理后的表达规律 | 第93-95页 |
| ·太平洋鳕ATG5在PolyIC处理后的表达规律 | 第95-96页 |
| ·太平洋鳕IPS1在PolyIC处理后的表达规律 | 第96-97页 |
| ·太平洋鳕IRF3在PolyIC处理后的表达规律 | 第97-98页 |
| ·太平洋鳕IRF7在PolyIC处理后的表达规律 | 第98-99页 |
| ·讨论 | 第99-102页 |
| 参考文献 | 第102-113页 |
| 攻读学位期间发表的论文目录 | 第113-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
