中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
1 前言 | 第17-40页 |
·植物启动子的基本结构 | 第17-19页 |
·转录起始位点 | 第17-18页 |
·TATA-box | 第18页 |
·CAAT-box | 第18页 |
·GC-box | 第18页 |
·特殊的上游元件 | 第18-19页 |
·组成型启动子 | 第19页 |
·诱导型启动子 | 第19-25页 |
·植物激素诱导型启动子 | 第20-24页 |
·生长素诱导型启动子 | 第20页 |
·赤霉素诱导型启动子 | 第20-21页 |
·脱落酸诱导型启动子 | 第21-22页 |
·乙烯诱导型启动子 | 第22页 |
·水杨酸诱导型启动子 | 第22-23页 |
·茉莉酸诱导型启动子 | 第23-24页 |
·光诱导型启动子 | 第24页 |
·伤诱导型启动子 | 第24-25页 |
·高温诱导型启动子 | 第25页 |
·组织特异性启动子 | 第25-29页 |
·根特异性启动子 | 第25-26页 |
·叶片特异性启动子 | 第26-27页 |
·花特异性启动子 | 第27-28页 |
·花药特异性表达启动子 | 第27页 |
·花粉特异性表达启动子 | 第27-28页 |
·果实特异性启动子 | 第28页 |
·种子特异性启动子 | 第28-29页 |
·启动子的分离技术 | 第29-31页 |
·启动子的研究方法 | 第31-32页 |
·顺式作用元件的预测分析 | 第31页 |
·瞬时表达分析 | 第31页 |
·缺失分析 | 第31-32页 |
·突变分析 | 第32页 |
·植物萜类物质 | 第32-38页 |
·植物萜类物质的作用 | 第32页 |
·植物萜类的代谢途径 | 第32-34页 |
·MVA途径 | 第33页 |
·MEP途径 | 第33-34页 |
·萜类代谢途径中的相关酶对发育的影响 | 第34-36页 |
·乙酰辅酶A酞基转移酶(AACT) | 第34页 |
·3-烃基3甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGS) | 第34页 |
·异戊烯基焦磷酸异构酶(IPI) | 第34-35页 |
·法呢基焦磷酸合酶(FPS) | 第35页 |
·香叶基香叶基二磷酸合酶(GGPPS) | 第35页 |
·脱氧木酮糖磷酸盐还原异构酶(DXR) | 第35-36页 |
·4-磷酸胞苷2甲基赤藓糖激酶(CMK) | 第36页 |
·3-烃基3甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)的研究进展 | 第36-38页 |
·本研究的目的和意义 | 第38-40页 |
2 材料与方法 | 第40-57页 |
·实验材料 | 第40-42页 |
·植物材料 | 第40页 |
·菌株与质粒 | 第40页 |
·酶与各种生化试剂 | 第40页 |
·实验用的引物和寡核苷酸 | 第40-42页 |
·实验方法 | 第42-57页 |
·总RNA的提取 | 第42-43页 |
·RNA反转录 | 第43-44页 |
·实时荧光定量PCR | 第44页 |
·苹果基因组总DNA的提取 | 第44页 |
·HMGR启动子的克隆 | 第44-45页 |
·DNA产物纯化回收 | 第45页 |
·连接反应 | 第45-46页 |
·重组载体转化大肠杆菌及克隆的筛选 | 第46页 |
·质粒提取试剂盒提取质粒DNA | 第46-47页 |
·酶切鉴定 | 第47-48页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第48页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第48页 |
·5′RACE法确定苹果HMGR基因的转录起始位点 | 第48-50页 |
·苹果HMGR启动子的生物信息学分析 | 第50页 |
·MdHMGR2启动子-GUS重组表达载体的构建 | 第50页 |
·花浸法转化拟南芥 | 第50-51页 |
·GUS组织化学染色 | 第51页 |
·GUS荧光定量分析 | 第51-53页 |
·试剂的配制 | 第51-52页 |
·蛋白标准曲线及蛋白标准曲线的制作 | 第52页 |
·GUS荧光定量检测 | 第52-53页 |
·苹果及转基因拟南芥的激素处理 | 第53页 |
·植物核蛋白提取 | 第53页 |
·化学发光法凝胶阻滞实验(EMSA) | 第53-56页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第54页 |
·EMSA结合反应 | 第54-55页 |
·电泳 | 第55页 |
·转膜 | 第55页 |
·化学发光法检测生物素标记的探针 | 第55-56页 |
·拟南芥瞬时表达 | 第56-57页 |
3 结果与分析 | 第57-92页 |
·苹果HMGR基因家族的表达模式分析 | 第57-63页 |
·苹果HMGR基因的组织表达分析 | 第57-59页 |
·苹果HMGR基因的激素诱导表达分析 | 第59-63页 |
·MdHMGR2启动子的功能分析 | 第63-79页 |
·MdHMGR2启动子的克隆 | 第63-64页 |
·MdHMGR2基因转录起始位点的确定 | 第64-65页 |
·MdHMGR2启动子的生物信息学分析 | 第65-67页 |
·MdHMGR2启动子-GUS重组表达载体的构建 | 第67-70页 |
·含有MdHMGR2启动子系列片段的转基因拟南芥植株的获得与鉴定 | 第70-71页 |
·MdHMGR2全长启动子在转基因拟南芥中的GUS表达模式分析 | 第71-72页 |
·MdHMGR2启动子系列缺失片段在转基因拟南芥中的GUS表达模式分析 | 第72-76页 |
·含有MdHMGR2启动子的转基因拟南芥的GUS诱导表达分析 | 第76-77页 |
·EMSA分析 | 第77-79页 |
·MdHMGR3及MdHMGR3-like启动子的研究进展 | 第79-92页 |
·MdHMGR3-like基因的克隆及序列分析 | 第79-81页 |
·MdHMGR3-like基因的组织表达分析 | 第81-82页 |
·MdHMGR3-like基因的激素诱导表达分析 | 第82-83页 |
·MdHMGR3及MdHMGR3-like启动子的克隆 | 第83-84页 |
·MdHMGR3及MdHMGR3-like基因转录起始位点的确定 | 第84页 |
·MdHMGR3及MdHMGR3-like启动子生物信息学分析 | 第84-85页 |
·MdHMGR3及MdHMGR3-like启动子-GUS重组表达载体的构建 | 第85-87页 |
·MdHMGR3及MdHMGR3-like启动子全长在转基因拟南芥中的表达模式分析 | 第87-89页 |
·MdHMGR3-like启动子系列片段在拟南芥中的瞬时表达分析 | 第89-90页 |
·苹果HMGR基因家族启动子的序列分析 | 第90-92页 |
4 讨论 | 第92-95页 |
5 结论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第106页 |