| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词简表 | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 1 材料与试剂 | 第10-16页 |
| ·实验材料 | 第10页 |
| ·主要试剂 | 第10-12页 |
| ·试剂配制方法 | 第12-16页 |
| ·实验仪器 | 第16页 |
| 2 实验方法 | 第16-26页 |
| ·COMT 简并引物的设计 | 第16-17页 |
| ·COMT酶基因全长序列的扩增及检测 | 第17-18页 |
| ·PCR扩增COMT酶基因全长序列 | 第17页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第17-18页 |
| ·凝胶回收PCR产物 | 第18页 |
| ·凝胶回收PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测 | 第18页 |
| ·TA连接及克隆 | 第18-20页 |
| ·构建pMD-COMT重组质粒 | 第18-19页 |
| ·提取pMD-COMT重组质粒 | 第19-20页 |
| ·质粒双酶切及回收 | 第20-21页 |
| ·pMD-COMT重组质粒及PET双酶切 | 第20-21页 |
| ·pMD-COMT重组质粒及PET酶切产物回收 | 第21页 |
| ·pMD-COMT重组质粒及PET酶切回收产物浓度及纯度测定 | 第21页 |
| ·TA连接及克隆 | 第21-22页 |
| ·构建pET-COMT质粒 | 第21-22页 |
| ·提取pET-COMT重组质粒：(同2.3.2) | 第22页 |
| ·重组质粒的验证(双酶切法) | 第22-23页 |
| ·双酶切法 | 第22页 |
| ·PCR 法 | 第22-23页 |
| ·质粒克隆转化至BL21(DE3)中 | 第23页 |
| ·诱导外源基因的表达 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测表达蛋白 | 第23-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-32页 |
| ·PCR扩增COMT酶基因全长序列检测结果和分析 | 第26页 |
| ·pMD-COMT重组质粒检测结果和分析 | 第26-27页 |
| ·pMD-COMT重组质粒及pET-30a双酶切结果和分析 | 第27-28页 |
| ·pET-COMT重组质粒检测及其验证结果和分析 | 第28-31页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测表达蛋白结果和分析 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 5 结论 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 综述一 | 第38-46页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 综述二 | 第46-54页 |
| 参考文献 | 第53-54页 |