| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| ·弓形虫及弓形虫病简介 | 第10-11页 |
| ·传染来源及传播途径 | 第11页 |
| ·诊断方法 | 第11-12页 |
| ·病原学诊断 | 第11页 |
| ·免疫学诊断 | 第11-12页 |
| ·分子生物学方法 | 第12页 |
| ·治疗与防治 | 第12-13页 |
| ·蛋白激酶 | 第13-14页 |
| ·酪蛋白激酶（CKs） | 第13页 |
| ·钙依赖蛋白激酶（CDPKs） | 第13-14页 |
| ·丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs) | 第14页 |
| ·基因敲除 | 第14-16页 |
| ·基因敲除技术 | 第14-15页 |
| ·转基因技术 | 第15页 |
| ·RNA干扰（RNAi） | 第15-16页 |
| 第二章 弓形虫酪蛋白激酶CK1β 的原核表达与虫体定位 | 第16-33页 |
| ·材料 | 第16-19页 |
| ·菌株、虫株和载体 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·仪器设备 | 第17页 |
| ·试剂配制 | 第17-19页 |
| ·方法 | 第19-27页 |
| ·弓形虫的RNA提取 | 第19-20页 |
| ·弓形虫CK1β 基因cDNA合成 | 第20-21页 |
| ·扩增弓形虫CK1β 基因 | 第21-24页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第24-25页 |
| ·Western blot分析 | 第25页 |
| ·重组蛋白的可溶性鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第26页 |
| ·重组蛋白的浓缩和浓度测定 | 第26页 |
| ·多抗制备 | 第26-27页 |
| ·利用间接免疫荧光（IFA）对TgCK1β 蛋白虫体定位 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-31页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第27页 |
| ·重组克隆质粒提取和酶切鉴定结果 | 第27-28页 |
| ·重组表达质粒提取和酶切鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·表达产物SDS-PAGE检测结果 | 第29页 |
| ·表达产物Western blot分析结果 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的可溶性鉴定结果 | 第30页 |
| ·重组蛋白的纯化结果 | 第30-31页 |
| ·检测TgCK1β 蛋白的虫体定位 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 弓形虫酪蛋白激酶CK1β 基因缺失株的构建 | 第33-48页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·菌株、虫株和载体 | 第33-34页 |
| ·试剂及仪器设备 | 第34页 |
| ·试剂配制 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-42页 |
| ·弓形虫的DNA提取 | 第35-36页 |
| ·TgCK1β 缺失株载体构建 | 第36-40页 |
| ·TgCK1β 缺失株的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·ΔTgCK1β 的Southtern blot鉴定 | 第41-42页 |
| ·结果 | 第42-45页 |
| ·TgCK1β 的 5'-UTR和 3'-UTR克隆 | 第42-43页 |
| ·5’UTR-pBluescript-3’UTR-phle转染质粒酶切鉴定 | 第43页 |
| ·5’UTR-T-pBluescript-3’UTR-phle质粒线性化 | 第43-44页 |
| ·PCR鉴定缺失株结果 | 第44页 |
| ·Southern blot分析结果 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·结论 | 第46-48页 |
| 第四章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 缩略词表 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
