摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
·粘康酸简介 | 第8-9页 |
·生物法合成粘康酸 | 第9-14页 |
·邻苯二酚邻位裂解途径 | 第9页 |
·以芳香族化合物为底物合成粘康酸 | 第9-10页 |
·以可再生原料为底物合成粘康酸 | 第10-14页 |
·本论文的研究意义 | 第14-15页 |
·本论文研究内容 | 第15-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-25页 |
·实验材料 | 第17-21页 |
·菌株与质粒 | 第17-18页 |
·引物 | 第18-19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器与设备 | 第20-21页 |
·培养基与培养条件 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-25页 |
·分子生物学相关操作 | 第21-22页 |
·基因获取与重组质粒构建 | 第22-23页 |
·反转录荧光定量PCR(RT-PCR) | 第23页 |
·Jm-1a转化2,3-DHB产粘康酸验证 | 第23页 |
·发酵罐中合成粘康酸 | 第23页 |
·分析方法 | 第23-25页 |
第三章 结果与讨论 | 第25-40页 |
·重组粘康酸合成途径的构建 | 第25-30页 |
·构建胞内转化2,3-DHB产粘康酸的重组大肠杆菌 | 第26-28页 |
·强化2,3-DHB合成途径积累粘康酸 | 第28-29页 |
·强化莽草酸途径 | 第29-30页 |
·重组粘康酸合成途径的调控 | 第30-33页 |
·增加2,3-DHB到粘康酸重组途径基因拷贝数提高粘康酸积累 | 第30-31页 |
·通过缓解Jm-5的代谢负担提高粘康酸积累 | 第31-33页 |
·重组菌E. coli Jm-5的 3L发酵罐试验 | 第33-34页 |
·一步法水相催化邻苯二酚合成粘康酸 | 第34-38页 |
·基因catA克隆及载体构建 | 第34页 |
·重组蛋白的SDS-PAGE结果 | 第34-35页 |
·catA的表达条件优化 | 第35-36页 |
·温度对catA表达的影响 | 第35页 |
·IPTG浓度对catA表达的影响 | 第35-36页 |
·诱导后培养时间对catA表达的影响 | 第36页 |
·E. coli MA转化邻苯二酚产粘康酸的条件优化 | 第36-38页 |
·温度对转化效率的影响 | 第36-37页 |
·pH对转化效率的影响 | 第37页 |
·转速对转化效率的影响 | 第37-38页 |
·利用分批补料策略全细胞催化邻苯二酚生产MA | 第38-40页 |
主要结论与展望 | 第40-41页 |
主要结论 | 第40页 |
展望 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |