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代谢工程改造大肠杆菌合成粘康酸的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-17页
   ·粘康酸简介第8-9页
   ·生物法合成粘康酸第9-14页
     ·邻苯二酚邻位裂解途径第9页
     ·以芳香族化合物为底物合成粘康酸第9-10页
     ·以可再生原料为底物合成粘康酸第10-14页
   ·本论文的研究意义第14-15页
   ·本论文研究内容第15-17页
第二章 材料与方法第17-25页
   ·实验材料第17-21页
     ·菌株与质粒第17-18页
     ·引物第18-19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·主要仪器与设备第20-21页
     ·培养基与培养条件第21页
   ·实验方法第21-25页
     ·分子生物学相关操作第21-22页
     ·基因获取与重组质粒构建第22-23页
     ·反转录荧光定量PCR(RT-PCR)第23页
     ·Jm-1a转化2,3-DHB产粘康酸验证第23页
     ·发酵罐中合成粘康酸第23页
     ·分析方法第23-25页
第三章 结果与讨论第25-40页
   ·重组粘康酸合成途径的构建第25-30页
     ·构建胞内转化2,3-DHB产粘康酸的重组大肠杆菌第26-28页
     ·强化2,3-DHB合成途径积累粘康酸第28-29页
     ·强化莽草酸途径第29-30页
   ·重组粘康酸合成途径的调控第30-33页
     ·增加2,3-DHB到粘康酸重组途径基因拷贝数提高粘康酸积累第30-31页
     ·通过缓解Jm-5的代谢负担提高粘康酸积累第31-33页
   ·重组菌E. coli Jm-5的 3L发酵罐试验第33-34页
   ·一步法水相催化邻苯二酚合成粘康酸第34-38页
     ·基因catA克隆及载体构建第34页
     ·重组蛋白的SDS-PAGE结果第34-35页
     ·catA的表达条件优化第35-36页
       ·温度对catA表达的影响第35页
       ·IPTG浓度对catA表达的影响第35-36页
       ·诱导后培养时间对catA表达的影响第36页
     ·E. coli MA转化邻苯二酚产粘康酸的条件优化第36-38页
       ·温度对转化效率的影响第36-37页
       ·pH对转化效率的影响第37页
       ·转速对转化效率的影响第37-38页
   ·利用分批补料策略全细胞催化邻苯二酚生产MA第38-40页
主要结论与展望第40-41页
 主要结论第40页
 展望第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-47页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第47页

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