目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第9-11页 |
材料 | 第11-14页 |
一、主要试剂 | 第11-12页 |
二、主要仪器 | 第12-13页 |
三、研究对象 | 第13-14页 |
方法 | 第14-21页 |
一、 尿道瘢痕组织成纤维细胞的培养 | 第14-16页 |
1 培养液配置 | 第14页 |
2 转化生长因子β1(TGF-β1)的配置 | 第14页 |
3 盐酸法舒地尔的配置 | 第14页 |
4 磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,PBS)的配制 | 第14页 |
5 细胞的原代培养和传代 | 第14-15页 |
6 细胞的冻存 | 第15页 |
7 细胞的复苏 | 第15-16页 |
二、.MTT比色法检测尿道成纤维细胞活力:(MTT浓度为5mg/ml) | 第16-17页 |
1 接种细胞 | 第16页 |
2 添加药物 | 第16页 |
3 生长期 | 第16页 |
4 存活细胞数的估算 | 第16-17页 |
5 结果分析 | 第17页 |
三、流式细胞技术检测成纤维增殖和凋亡情况: | 第17-18页 |
1 制备单细胞悬液 | 第17页 |
2 标记对照组和试验组 | 第17页 |
3 洗涤 | 第17页 |
4 加样 | 第17页 |
5 混匀 | 第17页 |
6 反应 | 第17-18页 |
7 结果 | 第18页 |
四、Western blot 检测蛋白: | 第18-21页 |
1 裂解细胞 | 第18页 |
2 蛋白质定量 | 第18-19页 |
3 SDS-PAGE 电泳 | 第19-20页 |
4 免疫印记 | 第20-21页 |
结果 | 第21-32页 |
一、法舒地尔对 TGF-β1 诱导的尿道瘢痕成纤维细胞活力的影响 | 第21-23页 |
二、法舒地尔对 TGF-β1 诱导的尿道瘢痕成纤维细胞凋亡的影响 | 第23-26页 |
三、法舒地尔对 TGF-β1 诱导的尿道瘢痕成纤维细胞的 α-SMA 蛋白的表达影响 | 第26-27页 |
四、法舒地尔对 TGF-β1 诱导的尿道瘢痕成纤维细胞的 p-MLC 蛋白的表达影响 | 第27-28页 |
五、法舒地尔对 TGF-β1 诱导的尿道瘢痕成纤维细胞的 LIMK-1 蛋白的表达影响 | 第28-29页 |
六、法舒地尔对 TGF-β1 诱导的尿道瘢痕成纤维细胞的 p-Cofilin 蛋白的表达影响 | 第29-30页 |
七、法舒地尔对TGF-β1诱导的尿道瘢痕成纤维细胞的I型胶原蛋白的表达影响 | 第30-31页 |
八、法舒地尔对 TGF-β1 诱导的尿道瘢痕成纤维细胞的 III 型胶原蛋白的表达影响: | 第31-32页 |
讨论 | 第32-36页 |
结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
综述 | 第40-48页 |
参考文献 | 第46-48页 |
缩略语 | 第48-49页 |