| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-16页 |
| 目录 | 第16-18页 |
| 第1章 前言 | 第18-30页 |
| ·呼吸道病毒流行情况概述 | 第18-19页 |
| ·呼吸道病毒鉴别诊断技术概述 | 第19-23页 |
| ·实时荧光定量 RT-PCR 方法常用探针概述 | 第23-26页 |
| ·多色组合探针编码（MCPC）技术概述 | 第26-27页 |
| ·同源加尾（HAND）系统概述 | 第27-28页 |
| ·总述 | 第28-30页 |
| 第2章 材料与方法 | 第30-53页 |
| ·引物与探针设计 | 第30-32页 |
| ·目的序列阳性克隆菌和体外 RNA 转录 | 第32-33页 |
| ·临床样本核酸模板的制备 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 反应体系的建立 | 第34-36页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 反应退火延伸温度的探索 | 第36-37页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 的灵敏度与标准曲线的建立 | 第37-38页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 的重复性检验 | 第38页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 的特异性检验 | 第38-39页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 反应体系的建立 | 第39-41页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 的灵敏度与标准曲线的建立 | 第41-42页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 的重复性检验 | 第42-43页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 的特异性检验 | 第43页 |
| ·加尾引物浓度探索 | 第43-46页 |
| ·探针浓度探索 | 第46-49页 |
| ·HAND 多重荧光 RT-PCR 的灵敏度与标准曲线的建立 | 第49-50页 |
| ·HAND 多重荧光 RT-PCR 的重复性检验 | 第50-52页 |
| ·HAND 多重荧光 RT-PCR 的特异性检验 | 第52-53页 |
| 第3章 结果 | 第53-80页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 反应体系的建立 | 第53页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 反应退火延伸温度的探索 | 第53页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 的灵敏度检验 | 第53-56页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 标准曲线的建立 | 第56-59页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 的重复性检验 | 第59-60页 |
| ·单重荧光 RT-PCR 的特异性检验 | 第60-61页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 反应体系的建立 | 第61页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 的灵敏度检验 | 第61-63页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 标准曲线的建立 | 第63-66页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 的重复性检验 | 第66-67页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 的特异性检验 | 第67页 |
| ·加尾引物浓度探索 | 第67-70页 |
| ·探针浓度探索 | 第70-73页 |
| ·HAND 多重荧光 RT-PCR 的灵敏度检验 | 第73-75页 |
| ·HAND 多重荧光 RT-PCR 标准曲线的建立 | 第75-78页 |
| ·HAND 多重荧光 RT-PCR 的重复性检验 | 第78-79页 |
| ·HAND 多重荧光 RT-PCR 的特异性检验 | 第79-80页 |
| 第4章 讨论 | 第80-87页 |
| ·引物及探针的设计 | 第81-82页 |
| ·荧光元素种类及荧光基团选择 | 第82页 |
| ·荧光探针种类选择 | 第82-83页 |
| ·退火延伸温度探索 | 第83-84页 |
| ·扩增效率 | 第84页 |
| ·多重荧光 RT-PCR 与 HAND 多重荧光 RT-PCR 比较 | 第84-87页 |
| 第5章 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-93页 |
| 附录1 缩写词表 | 第93页 |
| 附录2 在读期间发表或待发表论文和著作 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
