| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1. 前言 | 第10-20页 |
| ·课题的提出 | 第10-11页 |
| ·植物抗寒性研究进展 | 第11-12页 |
| ·胁迫诱导基因表达 | 第11页 |
| ·植物冷诱导基因和蛋白 | 第11-12页 |
| ·转录因子 | 第12-14页 |
| ·转录因子的概念 | 第12页 |
| ·转录因子的结构 | 第12-13页 |
| ·转录因子的活性调控 | 第13页 |
| ·AP2/EREBP转录因子 | 第13-14页 |
| ·CBF/DREB类转录因子研究进展 | 第14-17页 |
| ·DRE/CRT元件及CBF/DREB转录因子的发现 | 第14-15页 |
| ·CBF/DREB类转录因子结构特征 | 第15-16页 |
| ·CBF/DREB类转录因子的表达特性 | 第16页 |
| ·CBF/DREB转录因子与植物的抗寒性 | 第16-17页 |
| ·Southern杂交技术 | 第17-18页 |
| ·实验的目的与意义 | 第18-20页 |
| 2、材料与方法 | 第20-36页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·实验菌株及载体 | 第20页 |
| ·仪器及设备 | 第20页 |
| ·酶及化学试剂 | 第20-21页 |
| ·PCR引物 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-36页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·PCR反应体系及反应条件 | 第22-23页 |
| ·凝胶电泳条带的回收 | 第23页 |
| ·目的片段的连接 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌的转化(热激法) | 第25页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第25页 |
| ·鉴定转化子 | 第25-26页 |
| ·质粒提取 | 第26页 |
| ·酶切反应 | 第26-27页 |
| ·southern杂交 | 第27-31页 |
| ·农杆菌LBA4404感受态的制备 | 第31-32页 |
| ·外源RNase灭菌处理 | 第32页 |
| ·总RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第33页 |
| ·笃斯越橘转录因子DREB基因序列分析及功能预测方法 | 第33-34页 |
| ·笃斯越橘转录因子DREB基因表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 3. 结果与分析 | 第36-50页 |
| ·RNA的定性定量分析 | 第36页 |
| ·笃斯越橘DREB基因全长的克隆 | 第36-38页 |
| ·笃斯越橘CBF全长基因的序列分析与功能预测 | 第38-48页 |
| ·序列开放阅读框分析 | 第38-40页 |
| ·氨基酸序列同源性比对分析 | 第40-42页 |
| ·疏水性分析 | 第42-44页 |
| ·跨膜结构预测 | 第44-45页 |
| ·核定位信号分析 | 第45页 |
| ·卷曲螺旋预测 | 第45页 |
| ·信号肽预测 | 第45-46页 |
| ·二级结构预测 | 第46-47页 |
| ·同源性分析 | 第47-48页 |
| ·植物表达载的构建 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·提取笃斯越橘DNA方法和材料的比较 | 第50页 |
| ·southern杂交中常见的问题 | 第50-51页 |
| ·笃斯越橘转录因子VuDREB的序列分析 | 第51-52页 |
| ·笃斯越橘DREB基因转化烟草 | 第52-53页 |
| 5. 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |