| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 第一章 基于杆状病毒展示技术的H5N1流感疫苗的制备 | 第13-33页 |
| 1 材料与方法 | 第13-28页 |
| ·材料 | 第13-15页 |
| ·病毒和细胞 | 第13页 |
| ·质粒及菌株 | 第13页 |
| ·工具酶及试剂 | 第13-14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·引物设计合成 | 第14-15页 |
| ·方法 | 第15-28页 |
| ·质粒操作基本实验方法 | 第15-16页 |
| ·pFastBac-HA-NA供体质粒的构建和鉴定 | 第16-20页 |
| ·Bacmid-HA-NA重组穿梭载体的构建和鉴定 | 第20-22页 |
| ·流感疫苗Bac-HA-NA的制备 | 第22-24页 |
| ·表面展示蛋白HA-NA的鉴定 | 第24-28页 |
| 2 结果 | 第28-32页 |
| ·杆状病毒载体表达质粒的酶切鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·pFast-HA以及pFast-NA的酶切鉴定结果 | 第28页 |
| ·pFast-HA-NA的酶切鉴定及Bacmid-HA-NA的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·Western bbtting实验鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·电镜观察 | 第30-31页 |
| ·HA血凝以及NA酶活鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·HA血凝实验结果 | 第31页 |
| ·NA酶活鉴定结果 | 第31-32页 |
| 3 小结 | 第32-33页 |
| 第二章 疫苗免疫效果及交叉保护效果评价 | 第33-49页 |
| 1 材料与方法 | 第33-40页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·疫苗 | 第33页 |
| ·H5N1流感病毒和细胞 | 第33页 |
| ·试剂及仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-40页 |
| ·小鼠免疫 | 第34-35页 |
| ·血清和脾淋巴细胞的采集 | 第35页 |
| ·流感病毒攻毒实验 | 第35-36页 |
| ·ELISA法检测血清中特异性IgG | 第36页 |
| ·ELISPOT实验 | 第36-38页 |
| ·病毒半数组织感染量(TCID_(50))测定 | 第38-39页 |
| ·小鼠肺组织病理HE染色 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-44页 |
| ·HA特异性抗体ELISA实验结果 | 第40-41页 |
| ·ELISPOT实验结果 | 第41-42页 |
| ·TCID_(50)实验结果 | 第42-43页 |
| ·小鼠肺组织病理结果 | 第43页 |
| ·小鼠体重变化率及生存率监测结果 | 第43-44页 |
| 3 小结 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| ·疫苗株及靶抗原的选择 | 第46-47页 |
| ·疫苗载体的选择 | 第47-48页 |
| ·免疫策略的研究 | 第48-49页 |
| 第三章 结论与展望 | 第49-51页 |
| 1 主要研究成果 | 第49页 |
| 2 创新点 | 第49-50页 |
| 3 存在的不足 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 综述 | 第53-63页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 附录1——主要英文缩写词 | 第65-67页 |
| 附录2——实验所用主要试剂配制 | 第67-68页 |
