| 内容提要 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 绪论 | 第16-18页 |
| 第一篇 文献综述 | 第18-42页 |
| 第1章 转基因动物技术研究概况 | 第18-26页 |
| ·使用腺病毒载体的基因转移 | 第18-20页 |
| ·精子介导的DNA 转移 | 第20-21页 |
| ·体细胞克隆的DNA 转移 | 第21-25页 |
| ·基因序列的改造 | 第21-22页 |
| ·目的DNA 的插入 | 第22-24页 |
| ·小染色体转移 | 第24-25页 |
| ·结论 | 第25-26页 |
| 第2章 反转录病毒载体在基因修饰中的应用 | 第26-42页 |
| ·反转录病毒 | 第27-28页 |
| ·反转录病毒的生命周期 | 第28-30页 |
| ·反转录病毒载体 | 第30-37页 |
| ·慢病毒载体 | 第31-35页 |
| ·IRES 机制 | 第35-36页 |
| ·2A 原件 | 第36-37页 |
| ·反转录病毒载体在基因治疗上的应用 | 第37页 |
| ·反转录病毒载体的插入诱变 | 第37-38页 |
| ·慢病毒载体基因治疗的未来 | 第38-39页 |
| ·慢病毒载体设计的改进 | 第39-42页 |
| 第二篇 研究内容 | 第42-88页 |
| 第1章 含抗口蹄病毒基因重组反转录病毒载体的构建 | 第42-60页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·载体及菌株 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·主要溶液的配制 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-51页 |
| ·抗口蹄疫病毒基因的筛选及合成 | 第44页 |
| ·含抗口蹄疫病毒基因的重组反转录病毒载体的构建 | 第44-50页 |
| ·含抗口蹄疫病毒基因的重组反转录病毒载体的鉴定 | 第50页 |
| ·对照组重组反转录病毒载体的构建和鉴定 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·抗口蹄疫病毒基因的合成结果 | 第51-54页 |
| ·含抗口蹄疫病毒基因的重组反转录病毒载体的鉴定结果 | 第54-55页 |
| ·对照组质粒pFB- EGFP 的鉴定 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-60页 |
| 第2章 含抗口蹄疫病毒基因的猪成纤维细胞系的建立 | 第60-78页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·质粒 | 第61页 |
| ·细胞 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·实验耗材 | 第61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61-62页 |
| ·主要溶液的配制 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-71页 |
| ·质粒的大量制备 | 第62-64页 |
| ·细胞的准备 | 第64-65页 |
| ·含抗口蹄疫病毒基因的重组反转录病毒的包装 | 第65-67页 |
| ·重组反转录病毒对猪成纤维细胞的感染 | 第67-68页 |
| ·含抗口蹄疫病毒基因的猪成纤维细胞的筛选 | 第68页 |
| ·阳性细胞的鉴定 | 第68-71页 |
| ·结果 | 第71-76页 |
| ·细胞使用FuGENE HD 转染试剂量的测定结果 | 第71页 |
| ·重组质粒pFB-EGFP 共转染HEK-293T 细胞 | 第71-72页 |
| ·重组反转录病毒MMLV-EGFP 感染猪成纤维细胞 | 第72页 |
| ·G418 对猪成纤维细胞WMP 最佳筛选浓度测定结果 | 第72-73页 |
| ·含抗口蹄疫病毒基因的猪成纤维细胞的筛选结果 | 第73-74页 |
| ·对照组含增强型绿色荧光蛋白基因的猪成纤维细胞的筛选结果 | 第74-75页 |
| ·阳性细胞基因组的PCR 鉴定结果 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-77页 |
| ·小结 | 第77-78页 |
| 第3章 抗口蹄疫病毒猪成纤维细胞的功能验证 | 第78-88页 |
| ·材料 | 第78-79页 |
| ·病毒 | 第78页 |
| ·细胞 | 第78-79页 |
| ·主要试剂 | 第79页 |
| ·主要仪器设备 | 第79页 |
| ·主要溶液配制 | 第79页 |
| ·方法 | 第79-80页 |
| ·细胞的制备 | 第79页 |
| ·MTT 检测 | 第79-80页 |
| ·结果 | 第80-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·小结 | 第86-88页 |
| 结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-111页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
