目录 | 第1-7页 |
CONTENTS | 第7-10页 |
中文摘要 | 第10-18页 |
ABSTRACT | 第18-27页 |
符号说明 | 第27-30页 |
序言 | 第30-32页 |
第一部分 rFliC对小鼠同种皮肤移植物的影响及与TLR5表达的相关性 | 第32-50页 |
前言 | 第32-34页 |
材料和方法 | 第34-45页 |
一、实验材料 | 第34-38页 |
二、实验仪器 | 第38-39页 |
三、实验方法 | 第39-45页 |
1. 小鼠同种皮肤移植模型的构建 | 第39页 |
2. 基因重组鞭毛蛋白(rFliC)的制备 | 第39-42页 |
3. SDS-PAGE鉴定提取纯化的rFliC | 第42-43页 |
4. Western blot鉴定提取纯化的rFliC | 第43-44页 |
5. 移植物病理(HE)染色 | 第44页 |
6. 移植物免疫组化(IHC)染色 | 第44-45页 |
实验结果 | 第45-47页 |
一、成功构建小鼠同种皮肤移植模型 | 第45页 |
二、成功制备高纯度rFliC | 第45-46页 |
三、rFliC对小鼠同种皮肤移植物生存的影响 | 第46页 |
1. rFliC对同种皮肤移植物生存期的影响 | 第46页 |
2. rFliC对同种皮肤移植物组织病理变化的影响 | 第46页 |
四、rFliC体内处理对同种皮肤移植物TLR5表达的影响 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
第二部分 rFliC对小鼠同种移植受体Treg细胞的影响 | 第50-72页 |
前言 | 第50-53页 |
材料和方法 | 第53-64页 |
一、实验材料 | 第53-56页 |
二、实验仪器 | 第56-57页 |
三、实验方法 | 第57-64页 |
1. 流式细胞术检测同种移植受体CD4~+CD25~+Foxp3~+细胞比例 | 第57-58页 |
2. 免疫组化染色观察移植受体脾细胞Foxp3表达情况 | 第58-59页 |
3. qRT-PCR检测同种移植受体Treg相关分子表达 | 第59-61页 |
4. Western blot检测移植受体Treg相关分子表达 | 第61-62页 |
5. 移植受体Treg细胞增殖实验 | 第62页 |
6. 移植受体Treg细胞抑制功能实验 | 第62-63页 |
7. 制备同种抗原 | 第63页 |
8. 半定量RT-PCR检测同种抗原刺激的Treg细胞分子表达 | 第63页 |
9. Western blot检测同种抗原刺激的Treg细胞分子表达 | 第63-64页 |
10. 同种抗原刺激的Treg细胞增殖实验 | 第64页 |
11. 同种抗原刺激的Treg细胞抑制功能实验 | 第64页 |
实验结果 | 第64-69页 |
一、rFliC对同种移植受体CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的影响 | 第64-65页 |
1. rFliC对移植受体CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比例的影响 | 第64-65页 |
2. rFliC对移植受体Treg细胞Foxp3表达的影响 | 第65页 |
二、rFliC对移植受体Treg细胞相关分子表达的影响 | 第65-66页 |
三、rFliC对移植受体Treg细胞功能的影响 | 第66-67页 |
1. rFliC对移植受体Treg细胞增殖的影响 | 第66页 |
2. rFliC对移植受体Treg细胞抑制功能的影响 | 第66-67页 |
四、rFliC体外处理对同种抗原刺激的Treg细胞分子表达的影响 | 第67页 |
五、rFliC体外处理对同种抗原刺激的Treg细胞活性的影响 | 第67-69页 |
1. rFliC对同种抗原刺激的Treg细胞增殖的影响 | 第68页 |
2. rFliC对同种抗原刺激的Treg细胞抑制功能的影响 | 第68-69页 |
讨论 | 第69-72页 |
第三部分 rFliC对同种抗原激活的Treg细胞Foxp3表达影响的分子机理与调控 | 第72-84页 |
前言 | 第72-75页 |
材料和方法 | 第75-79页 |
一、实验材料 | 第75页 |
二、实验仪器 | 第75-76页 |
三、实验方法 | 第76-79页 |
1. 检测rFliC对Treg细胞JNK、p38 MAPK信号的活化情况 | 第76-77页 |
2. 检测rFliC活化Treg细胞JNK/p38 MAPK信号与Foxp3表达的相关性 | 第77页 |
3. 检测rFliC对Treg细胞PI3K-Akt信号活化情况 | 第77页 |
4. 检测Treg细胞中rFliC激活的PI3K-Akt信号对p38 MAPK活化的影响 | 第77-78页 |
5. 检测rFliC激活的PI3K-Akt信号与Foxp3表达的相关性 | 第78页 |
6. 检测rFliC激活的PI3K-Akt/p38 MAPK信号与Foxp3表达的相关性 | 第78-79页 |
实验结果 | 第79-81页 |
一、rFliC对同种抗原刺激Treg细胞JNK/p38 MAPK信号的影响 | 第79页 |
二、rFliC上调同种抗原刺激Treg细胞的Foxp3表达与p38活化相关 | 第79-80页 |
三、rFliC对同种抗原刺激Treg细胞PI3K-Akt信号的影响 | 第80页 |
四、rFliC-同种抗原刺激Treg细胞PI3K信号对p38 MAPK信号活化的影响 | 第80页 |
五、PI3K对rFliC-同种抗原激活Treg细胞的p38-Foxp3通路的影响 | 第80-81页 |
讨论 | 第81-84页 |
全文小结 | 第84-85页 |
论文创新点 | 第85-86页 |
附图表 | 第86-102页 |
参考文献 | 第102-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第112-113页 |
攻读学位期间参与科研项目情况 | 第113-114页 |
攻读学位期间获奖励情况 | 第114-115页 |
已发表SCI论文 | 第115-139页 |
待发表SCI论文 | 第139-154页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第154页 |