| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-21页 |
| ·鸡毒支原体的生物学特征 | 第14页 |
| ·鸡毒支原体的危害及防治 | 第14-15页 |
| ·MG-HS株研究进展 | 第15-16页 |
| ·miRNA在疾病中的研究进展 | 第16-17页 |
| ·miR-19在疾病中的研究进展 | 第17-19页 |
| ·ZMYND11研究进展 | 第19-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 实验材料和方法 | 第21-44页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验试剂及相关溶液的配制 | 第21-24页 |
| ·主要生化试剂及分子生物学材料 | 第21-22页 |
| ·实验溶液的配制 | 第22-24页 |
| ·主要器材 | 第24-25页 |
| ·生物信息学分析相关的软件及数据库 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-44页 |
| ·鸡毒支原体(MG-HS)的复苏及扩大培养 | 第25-27页 |
| ·鸡胚人工感染MG及组织样的采集 | 第27-28页 |
| ·肺组织总RNA的提取与检测 | 第28-29页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第29-30页 |
| ·cDNA质量的检测与MG黏附蛋白pMGA1.2的扩增 | 第30-31页 |
| ·MG-HS在攻毒鸡胚肺组织中相对生长曲线的绘制 | 第31-32页 |
| ·肺组织中gga-miR-19a的扩增检测 | 第32页 |
| ·肺组织总RNA的提取及质量检测 | 第32页 |
| ·反转录 | 第32-33页 |
| ·gga-miR-19a的cDNA质量检测及目的片段的扩增 | 第33页 |
| ·qPCR检测鸡胚肺组织中gga-miR-19a的相对表达量 | 第33-34页 |
| ·靶基因3'UTR的扩增 | 第34页 |
| ·ZMYND11 3'UTR片段回收 | 第34-35页 |
| ·T-A克隆连接 | 第35页 |
| ·连接产物的转化 | 第35-36页 |
| ·ZMYND11 3'UTR与T载体连接产物的检测 | 第36-37页 |
| ·ZMYND11 3'UTR双荧光素酶报告基因载体的构建 | 第37-39页 |
| ·细胞培养及质粒转染 | 第39-41页 |
| ·双荧光素酶报告基因的检测 | 第41页 |
| ·转染后细胞水平ZMYND11基因相对表达量的检测 | 第41-42页 |
| ·感染鸡胚肺组织中ZMYND11基因相对表达水平的检测 | 第42页 |
| ·感染鸡胚肺组织中TNF-α、NF-κB基因相对表达水平的检测 | 第42-43页 |
| ·数据统计及分析 | 第43-44页 |
| 3 实验结果 | 第44-58页 |
| ·鸡毒支原体的活力 | 第44页 |
| ·肺组织总RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·cDNA质量的检测与MG黏附蛋白pMGA1.2的扩增 | 第45-46页 |
| ·内参基因β-actin检测cDNA的质量 | 第45页 |
| ·鸡胚攻毒后肺组织感染情况 | 第45-46页 |
| ·qPCR检测MG在鸡胚肺组织中的相对生长量 | 第46-47页 |
| ·gga-miR-19a的cDNA质量检测及目的片段的扩增 | 第47-48页 |
| ·内参基因5s-rRNA检测cDNA的质量 | 第47页 |
| ·gga-miR-19a的扩增及检测 | 第47-48页 |
| ·qPCR检测鸡胚肺组织中gga-miR-19a的相对表达量 | 第48页 |
| ·gg-miR-19a靶基因的预测及分析 | 第48-50页 |
| ·ZMYND11 3'UTR双荧光素酶报告基因载体的构建 | 第50-52页 |
| ·ZMYND11 3'UTR序列的扩增 | 第50-51页 |
| ·T-ZMYND重组质粒的酶切鉴定 | 第51页 |
| ·P-Z重组质粒的酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·P-Z重组质粒测序结果 | 第52页 |
| ·DF-1细胞培养 | 第52-53页 |
| ·双荧光素酶报告基因 | 第53-54页 |
| ·qPCR检测细胞水平ZMYND11的相对表达量 | 第54-55页 |
| ·qPCR检测ZMYND11在鸡胚不同时期肺组织中的相对表达量 | 第55-56页 |
| ·qPCR检测TNF-α在鸡胚不同时期肺组织中的相对表达量 | 第56页 |
| ·qPCR检测NF-κB在鸡胚不同时期肺组织中的相对表达量 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-65页 |
| ·MG-HS在感染鸡胚肺组织中的相对生长曲线 | 第58-59页 |
| ·MG-HS感染鸡胚肺组织中gga-miR-19a基因的表达 | 第59-60页 |
| ·生物信息学预测鸡miRNA的靶基因 | 第60-61页 |
| ·靶基因的鉴定及分析 | 第61-62页 |
| ·MG感染鸡胚后组织相关基因的表达变化及可能的调控机制 | 第62-65页 |
| 5 小结 | 第65-67页 |
| ·本研究所取得的结果 | 第65页 |
| ·本研究的创新点 | 第65页 |
| ·本研究的不足之处 | 第65-66页 |
| ·下一步研究的问题 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
