| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 符号及縮略语 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 第一部分 文献综述 | 第19-63页 |
| 第一章 体细胞核移植与转基因动物生产 | 第19-47页 |
| 1 动物体细胞核移植 | 第19-20页 |
| ·体细胞核移植技术研究简史 | 第20-29页 |
| ·体细胞核移植程序 | 第20-26页 |
| ·受体细胞准备 | 第21-22页 |
| ·供核细胞的选择 | 第22-23页 |
| ·重构胚的构建 | 第23页 |
| ·重构胚激活 | 第23-25页 |
| ·克隆胚胎培养 | 第25-26页 |
| ·体细胞核移植重编程机理 | 第26-29页 |
| ·DNA甲基化 | 第26-27页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第27-28页 |
| ·基因印迹 | 第28-29页 |
| ·端粒问题 | 第29页 |
| 2 转基因动物生产 | 第29-34页 |
| ·转基因动物的制作方法 | 第29-32页 |
| ·原核注射法 | 第29-30页 |
| ·病毒载体法 | 第30页 |
| ·精子载体法 | 第30-31页 |
| ·胚胎干细胞法 | 第31页 |
| ·体细胞核移植法 | 第31-32页 |
| ·转基因动物应用 | 第32-34页 |
| ·在生命科学研究领域的应用 | 第32页 |
| ·在医学研究领域的应用 | 第32-33页 |
| ·在畜牧改良上的应用 | 第33页 |
| ·动物抗病育种 | 第33-34页 |
| ·动物生物反应器 | 第34页 |
| 3 影响转基因克隆动物生产的因素 | 第34-37页 |
| ·克隆程序 | 第34-35页 |
| ·受体卵母细胞质量 | 第35页 |
| ·供核细胞 | 第35页 |
| ·表观遗传修饰对外源基因表达的影响 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-47页 |
| 第二章 RNAi技术在动物抗病毒研究中的应用前景 | 第47-63页 |
| 1 RNAi技术 | 第47-48页 |
| 2 RNAi技术原理 | 第48-50页 |
| 3 RNAi技术在动物抗病毒研究中的应用 | 第50-53页 |
| 4 病毒逃逸RNAi | 第53-54页 |
| 5 基于RNAi技术的转基因动物生产 | 第54-56页 |
| 6 RNAi的问题和展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 第二部分 试验研究 | 第63-131页 |
| 第三章 靶向PRRSV的shRNA转基因表达载体构建及其功能验证 | 第63-79页 |
| 摘要 | 第63-64页 |
| 1 材料 | 第64-65页 |
| 2 方法 | 第65-72页 |
| 3 结果 | 第72-76页 |
| ·shRNA转基因表达载体构建结果 | 第72-75页 |
| ·shRNA转基因表达载体在Marc145细胞上抑制PRRSV复制试验 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-77页 |
| 5 小结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| 第四章 核供体细胞对猪转基因克隆胚胎体外生产的影响 | 第79-97页 |
| 摘要 | 第79-80页 |
| 1 材料 | 第80-84页 |
| 2 方法 | 第84-88页 |
| 3 结果 | 第88-92页 |
| ·猪成纤维细胞建系 | 第88-89页 |
| ·G418筛选 | 第89-90页 |
| ·阳性细胞克隆的PCR鉴定 | 第90-91页 |
| ·转基因核供体细胞对猪克隆胚胎发育的影响 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-94页 |
| ·猪成纤维细胞的分离培养 | 第92-93页 |
| ·转基因阳性细胞克隆的筛选、传代培养和保存 | 第93页 |
| ·不同转基因供核细胞对猪克隆胚发育的影响 | 第93-94页 |
| 5 小结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 第五章 猪转基因克隆胚胎体外发育的研究 | 第97-109页 |
| 摘要 | 第97-98页 |
| 1 材料 | 第98页 |
| 2 方法 | 第98-100页 |
| 3 结果 | 第100-102页 |
| ·培养液对猪孤雌激活胚胎体外发育的影响 | 第100页 |
| ·激活方法对猪转基因克隆胚胎体外发育的影响 | 第100-101页 |
| ·曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎体外发育的影响 | 第101-102页 |
| 4 讨论 | 第102-105页 |
| ·胚胎体外培养液 | 第102-103页 |
| ·重构胚激活 | 第103-104页 |
| ·曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎体外发育的影响 | 第104-105页 |
| 5 小结 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-109页 |
| 第六章 曲古抑菌素A影响猪转基因克隆胚胎发育的机理研究 | 第109-131页 |
| 摘要 | 第109-110页 |
| 1 材料 | 第110-111页 |
| 2 方法 | 第111-115页 |
| 3 结果 | 第115-121页 |
| ·曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎组蛋白乙酰化水平的影响 | 第115-117页 |
| ·曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎发育相关基因表达的影响 | 第117-118页 |
| ·曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎外源基因表达的影响 | 第118-121页 |
| 4 讨论 | 第121-125页 |
| ·猪转基因克隆胚胎表观遗传修饰状态与胚胎的发育 | 第121-122页 |
| ·猪转基因克隆胚胎发育相关基因表达与胚胎的发育 | 第122-124页 |
| ·猪转基因克隆胚胎表观遗传修饰状态与外源基因表达 | 第124-125页 |
| 5 小结 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-131页 |
| 全文结论 | 第131-133页 |
| 创新点 | 第133-135页 |
| 攻读博士学位期间论文发表情况 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137页 |
