| 摘要 | 第1-10页 |
| Summary | 第10-14页 |
| 缩略表 | 第14-15页 |
| 1 前言 | 第15-27页 |
| ·问题的提出 | 第15-17页 |
| ·前人研究进展 | 第17-27页 |
| ·休眠芽组织培养的现状及优势 | 第17-18页 |
| ·玻璃化超低温保存的概念、原理及其应用价值 | 第18-19页 |
| ·影响玻璃化法超低温保存的因素 | 第19-25页 |
| ·植物材料的生理状态 | 第19页 |
| ·保存材料大小 | 第19-20页 |
| ·植物的基因型 | 第20页 |
| ·植物材料的预处理 | 第20-21页 |
| ·装载(Loading) | 第21-22页 |
| ·玻璃化(Vitrification) | 第22-23页 |
| ·液氮冻存时间 | 第23页 |
| ·化冻与卸载 | 第23-24页 |
| ·恢复生长培养 | 第24-25页 |
| ·玻璃化超低温保存过程中的细胞超微结构变化 | 第25页 |
| ·超低温保存再生植株的遗传稳定性 | 第25-27页 |
| ·本研究的内容和创新点 | 第27页 |
| 2 秦艽和党参离体快繁体系的建立 | 第27-41页 |
| ·材料与方法 | 第27-30页 |
| ·试验材料 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-30页 |
| ·秦艽休眠芽培养 | 第28页 |
| ·党参休眠芽和茎段的离体培养 | 第28-29页 |
| ·培养条件 | 第29页 |
| ·试管苗的驯化移栽 | 第29-30页 |
| ·试验统计方法 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-39页 |
| ·秦艽休眠芽培养 | 第30-34页 |
| ·无菌外植体的获得 | 第30-31页 |
| ·休眠芽的初代培养 | 第31-33页 |
| ·丛生芽的继代培养 | 第33页 |
| ·丛生芽的生根培养与驯化移栽 | 第33-34页 |
| ·党参的休眠芽培养 | 第34-39页 |
| ·无菌外植体的获得 | 第34-35页 |
| ·休眠芽和茎段的初代培养 | 第35-36页 |
| ·丛生芽的继代培养 | 第36-37页 |
| ·丛生芽的生根培养与驯化移栽 | 第37-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 3 秦艽和党参玻璃化超低温保存技术体系的建立 | 第41-59页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·试验材料 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-42页 |
| ·预培养和装载 | 第41-42页 |
| ·玻璃化液类型和处理时间 | 第42页 |
| ·化冻和恢复培养 | 第42页 |
| ·秦艽休眠芽玻璃化超低温保存技术体系的优化 | 第42页 |
| ·党参休眠芽玻璃化超低温保存技术体系的建立 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-55页 |
| ·秦艽休眠芽玻璃化超低温保存技术体系的建立 | 第42-44页 |
| ·玻璃化保护液类型对休眠芽成活率的影响 | 第42-43页 |
| ·玻璃化保护液处理时间对保存后成活率的影响 | 第43页 |
| ·休眠芽大小对成活率的影响 | 第43-44页 |
| ·秦艽休眠芽玻璃化超低温保存技术体系的优化 | 第44-52页 |
| ·预培养对休眠芽成活率的影响 | 第44-45页 |
| ·装载和 PVS2 处理时间对休眠芽冻存后成活率的影响 | 第45-46页 |
| ·PVS2 处理温度对休眠芽冻存后成活率的影响 | 第46-47页 |
| ·不同采材时期对超低温保存效果的影响 | 第47页 |
| ·化冻温度对秦艽休眠芽成活率的影响 | 第47-48页 |
| ·卸载时间对秦艽休眠芽成活率的影响 | 第48-49页 |
| ·暗培养时间对秦艽休眠芽超低温保存后成活率的影响 | 第49页 |
| ·液氮保存时间对秦艽休眠芽活力的影响 | 第49-50页 |
| ·各处理环节对休眠芽活力的损伤程度 | 第50页 |
| ·缺少超低温保存某环节对休眠芽成活率的影响 | 第50-51页 |
| ·不同种质的超低温保存 | 第51页 |
| ·恢复培养 | 第51-52页 |
| ·党参休眠芽玻璃化超低温保存技术体系的建立 | 第52-55页 |
| ·恢复培养时的光照条件对休眠芽成活率的影响 | 第52-53页 |
| ·苞片对休眠芽超低温保存效果的影响 | 第53页 |
| ·低温锻炼时间对休眠芽超低温保存效果的影响 | 第53-54页 |
| ·预培养方法对休眠芽超低温保存效果的影响 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 4 秦艽休眠芽超低温保存过程中的生理生化指标变化 | 第59-68页 |
| ·材料与方法 | 第59-60页 |
| ·试验材料 | 第59页 |
| ·试验方法 | 第59-60页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第59页 |
| ·淀粉含量测定 | 第59-60页 |
| ·可溶性蛋白质含量测定 | 第60页 |
| ·POD 酶活性测定 | 第60页 |
| ·SOD 酶活性测定 | 第60页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-66页 |
| ·秦艽休眠芽超低温保存过程中的可溶性糖含量变化 | 第60-61页 |
| ·秦艽休眠芽超低温保存过程中的淀粉含量变化 | 第61-62页 |
| ·秦艽休眠芽超低温保存过程中的可溶性蛋白质含量变化 | 第62-64页 |
| ·秦艽休眠芽超低温保存过程中的脯氨酸含量变化 | 第64-65页 |
| ·秦艽休眠芽超低温保存过程中的 SOD 含量变化 | 第65页 |
| ·秦艽休眠芽超低温保存过程中的 POD 含量变化 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 5 秦艽休眠芽超低温保存过程中的超微结构变化 | 第68-74页 |
| ·材料与方法 | 第68-69页 |
| ·试验材料 | 第68-69页 |
| ·试验方法 | 第69页 |
| ·结果与分析 | 第69-71页 |
| ·对照休眠芽茎尖的细胞超微结构 | 第69页 |
| ·预培养处理后休眠芽茎尖细胞的超微结构变化 | 第69-70页 |
| ·装载处理后休眠芽茎尖细胞的超微结构变化 | 第70页 |
| ·PVS2 处理后休眠芽茎尖细胞的超微结构变化 | 第70页 |
| ·化冻处理后休眠芽茎尖细胞的超微结构变化 | 第70页 |
| ·卸载处理后休眠芽茎尖细胞的超微结构变化 | 第70页 |
| ·恢复生长 2d 后休眠芽茎尖细胞的超微结构变化 | 第70页 |
| ·恢复生长 7d 后休眠芽茎尖细胞的超微结构变化 | 第70-71页 |
| ·直接投入液氮的休眠芽茎尖的细胞超微结构 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| 6 党参和秦艽休眠芽超低温保存再生植株的遗传稳定性 | 第74-83页 |
| ·材料与方法 | 第74-75页 |
| ·试验材料 | 第74页 |
| ·试验方法 | 第74-75页 |
| ·基因组 DNA 的提取及检测 | 第74页 |
| ·ISSR-PCR 体系的建立与优化 | 第74页 |
| ·产物的检测 | 第74-75页 |
| ·数据的采集、统计 | 第75页 |
| ·结果与分析 | 第75-81页 |
| ·DNA 的提取 | 第75页 |
| ·党参 ISSR-PCR 体系的建立 | 第75-78页 |
| ·退火温度对 ISSR 扩增的影响 | 第75-76页 |
| ·MgCl2浓度对 ISSR 扩增的影响 | 第76页 |
| ·dNTPs 浓度对 ISSR 扩增的影响 | 第76-77页 |
| ·引物浓度对 ISSR 扩增的影响 | 第77页 |
| ·Taq DNA 聚合酶对 ISSR 扩增的影响 | 第77-78页 |
| ·模板 DNA 用量对 ISSR 扩增的影响 | 第78页 |
| ·党参玻璃化超低温保存再生植株的遗传变异 | 第78-80页 |
| ·引物筛选 | 第78-79页 |
| ·党参超低温再生植株的 ISSR 分析 | 第79-80页 |
| ·秦艽 ISSR-PCR 体系的建立 | 第80-81页 |
| ·小结 | 第81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 附录 | 第95-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 导师简介 | 第110-111页 |
| 作者简介 | 第111-112页 |
