| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词表（Abbreiation) | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-22页 |
| 1 NDV | 第13-15页 |
| ·NDV概况 | 第13页 |
| ·NDV基因组结构及特性研究 | 第13-14页 |
| ·NDV TS09-C株研究进展 | 第14页 |
| ·NDV疫苗研究进展 | 第14-15页 |
| 2 反向遗传操作系统的研究进展 | 第15-21页 |
| ·不分节段负链RNA病毒反向遗传操作系统 | 第15-16页 |
| ·NDV反向遗传操作系统 | 第16-18页 |
| ·外源基因的表达 | 第18-19页 |
| ·NDV作为疫苗载体的作用 | 第19-21页 |
| 3 目的与意义 | 第21-22页 |
| 第一章 新城疫病毒TS09-C株反向遗传操作系统的建立 | 第22-33页 |
| 1 材料与方法 | 第22-26页 |
| ·细胞、病毒株、质粒及SPF鸡胚 | 第22页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第22页 |
| ·引物设计与合成 | 第22-23页 |
| ·辅助质粒的构建 | 第23页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·转化实验 | 第23-24页 |
| ·测序分析 | 第24页 |
| ·病毒拯救 | 第24-25页 |
| ·荧光定量PCR鉴定 | 第25页 |
| ·间接免疫荧光 | 第25页 |
| ·重组病毒蔗糖梯度纯化及电镜观察 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第26页 |
| 2 结果 | 第26-31页 |
| ·辅助质粒的构建结果 | 第26-28页 |
| ·目的片段的扩增 | 第26-27页 |
| ·辅助质粒酶切鉴定结果 | 第27-28页 |
| ·重组病毒的拯救及鉴定结果 | 第28-31页 |
| ·荧光定量RT-PCR结果 | 第28-29页 |
| ·IFA结果 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第29-30页 |
| ·电镜观察 | 第30-31页 |
| ·磷酸钙、脂质体转染方法的比较 | 第31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| ·辅助质粒的构建 | 第31页 |
| ·重组病毒的拯救 | 第31-33页 |
| 第二章 重组新城疫病毒生物学特性的研究 | 第33-38页 |
| 1 材料与方法 | 第33-35页 |
| ·细胞、病毒株及SPF鸡胚 | 第33页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第33页 |
| ·重组病毒的致病性试验 | 第33-34页 |
| ·鸡胚及细胞增殖滴度测定 | 第33-34页 |
| ·血凝活性效价(HA)测定 | 第34页 |
| ·MDT测定 | 第34页 |
| ·ICPI测定 | 第34页 |
| ·IVPI测定 | 第34页 |
| ·重组病毒在细胞、鸡胚上的生长特性 | 第34-35页 |
| ·重组病毒的耐热性试验 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-37页 |
| ·毒力测定 | 第35页 |
| ·生长曲线测定 | 第35-36页 |
| ·耐热性测定 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 表达绿色荧光蛋白重组新城疫病毒TS09-C疫苗株的构建 | 第38-44页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| ·细胞、病毒株、质粒及SPF鸡胚 | 第38页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第38页 |
| ·引物 | 第38-39页 |
| ·pBR-GFP-TS09-C/NP的构建 | 第39页 |
| ·pBR-GFP-TS09-C/M的构建 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-42页 |
| ·目的片段的扩增 | 第40-41页 |
| ·两个位点插入GFP基因重组新城疫病毒全长cDNA的构建 | 第41页 |
| ·表达GFP基因重组病毒的拯救及鉴定结果 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| ·pBR-GFP-TS09-C/NP、pBR-GFP-TS09-C/M的构建策略 | 第42-43页 |
| ·rGFP-TS09-C/NP与rGFP-TS09-C/M的拯救 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 附录 硕士期间发表文章情况 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
