| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述及选题目的和意义 | 第11-23页 |
| 1 马立克病研究进展 | 第11-22页 |
| ·病原学 | 第11-13页 |
| ·病毒形态 | 第11-12页 |
| ·血清型分型 | 第12页 |
| ·MDV理化性质 | 第12-13页 |
| ·马立克病毒基因组的研究进展 | 第13-18页 |
| ·全基因测序情况 | 第13-14页 |
| ·已经鉴定的主要基因及其编码蛋白的基本功能 | 第14-17页 |
| ·MDV-1强弱毒株之间的主要差异性基因 | 第17-18页 |
| ·流行病学和致病机理 | 第18-20页 |
| ·流行病学 | 第18页 |
| ·致病机理 | 第18-20页 |
| ·临床症状、病理变化及疾病的诊断与防控 | 第20-22页 |
| ·临床症状 | 第20页 |
| ·病理变化 | 第20-21页 |
| ·疾病的诊断与防控 | 第21-22页 |
| 2 选题的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 试验部分 | 第23-60页 |
| 1 实验材料 | 第23-28页 |
| ·鸡胚和实验动物 | 第23页 |
| ·病毒、宿主菌及菌体 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·试剂配制 | 第26-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-45页 |
| ·新ORF初步筛选及引物设计 | 第28-30页 |
| ·CVI988/Rispens复苏及病毒PFU的测定 | 第30-31页 |
| ·CEF的制备 | 第30页 |
| ·复苏CVI988/Rispens | 第30-31页 |
| ·PFU的测定 | 第31页 |
| ·新ORF基因的初步鉴定 | 第31-34页 |
| ·总RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·总RNA反转录为cNDA | 第33页 |
| ·PCR反应 | 第33-34页 |
| ·新ORF的克隆测序 | 第34-36页 |
| ·胶回收 | 第34页 |
| ·克隆载体的构建及测序 | 第34-36页 |
| ·新ORF的原核表达 | 第36-40页 |
| ·表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·表达重组菌的构建及表达条件的筛选 | 第37-38页 |
| ·大量表达及纯化 | 第38-40页 |
| ·兔抗重组目的蛋白和鸡抗CVI988/Rispens高免血清的制备 | 第40-42页 |
| ·兔抗重组目的蛋白高免血清的制备 | 第40-42页 |
| ·鸡抗CVI988/Rispens高免血清蛋白的制备 | 第42页 |
| ·间接免疫荧光 | 第42页 |
| ·Western-blot检测新ORF在鸡体中的免疫原性 | 第42-43页 |
| ·RT-PCR方法检测ORF5.6/75.9和ORF97.3在鸡体的转录情况 | 第43-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-55页 |
| ·CVI988/Rispens复苏结果及PFU测定 | 第45页 |
| ·RNA质量检测及RT-PCR结果 | 第45-47页 |
| ·新ORF基因克隆测序和表达载体构建结果 | 第47-48页 |
| ·表达重组菌诱导条件筛选及目的蛋白的纯化结果 | 第48-52页 |
| ·间接免疫荧光 | 第52页 |
| ·Western-blot结果 | 第52-54页 |
| ·ORF5.6/ORF75.9和ORF97.3基因在鸡体中的转录情况检测 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-60页 |
| ·新ORF的初步筛选 | 第56页 |
| ·RT-PCR、间接免疫荧光和Western-blot方法 | 第56页 |
| ·三个新ORF的鉴定情况 | 第56-57页 |
| ·MDV-1具有免疫原性的蛋白 | 第57页 |
| ·MDV-1重复长区 | 第57-58页 |
| ·新ORF生物信息学 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介及攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
