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脐血CD34~+干细胞分离与体外扩增的实验研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
第一章 文献综述第11-31页
 1.1 前言第11页
 1.2 脐血造血干细胞的生物学特性第11-15页
  1.2.1 高度的自我更新能力和增殖分化能力第11-12页
  1.2.2 造血干细胞的免疫表型特点第12-14页
  1.2.3 脐血造血干细胞及其移植的优势第14-15页
 1.3 脐血造血干细胞的分离纯化第15-18页
  1.3.1 阴性选择第15-16页
  1.3.2 阳性选择第16-18页
 1.4 脐血造血干细胞的体外扩增第18-28页
  1.4.1 扩增起始细胞的形式第18-19页
  1.4.2 扩增所需的细胞因子第19-21页
  1.4.3 细胞因子的合理组合第21-22页
  1.4.4 扩增培养基的选择第22页
  1.4.5 扩增时间长度的选择第22-23页
  1.4.6 造血微环境第23页
  1.4.7 扩增培养体系第23-26页
  1.4.8 生物反应器的作用第26页
  1.4.9 氧浓度的影响第26页
  1.4.10 贮存方法第26-27页
  1.4.11 扩增后评价第27-28页
 1.5 体外扩增造血干细胞的临床应用现状与前景第28-30页
  1.5.1 造血干细胞移植第28-29页
  1.5.2 免疫治疗第29页
  1.5.3 基因治疗第29-30页
 1.6 本论文的工作目的及主要内容第30-31页
第二章 脐血造血干细胞的预分离第31-42页
 2.1 前言第31页
 2.2 实验材料第31-33页
  2.2.1 脐血标本来源第31页
  2.2.2 实验仪器第31-32页
  2.2.3 实验试剂第32页
  2.2.4 相关溶液第32-33页
 2.3 实验方法第33-36页
  2.3.1 脐血的采集第33页
  2.3.2 脐血单核细胞的分离第33-34页
  2.3.2 细胞计数及活力测定第34-35页
  2.3.3 造血集落形成单位的测定第35页
  2.3.4 苏木精-伊红染色观察造血集落第35页
  2.3.5 统计学处理:第35-36页
 2.4 实验结果第36-39页
  2.4.1 不同分离方法对MNC回收率的影响第36-37页
  2.4.2 不同分离方法对细胞体外培养增殖能力的影响第37-39页
  2.4.3 造血集落形态观察第39页
 2.5 讨论第39-41页
 2.6 本章小结第41-42页
第三章 免疫磁珠法分离纯化CD34+造血干细胞第42-50页
 3.1 前言第42页
 3.2 实验材料第42-43页
  3.2.1 细胞来源第42页
  3.2.2 实验仪器第42-43页
  3.2.3 实验试剂第43页
 3.3 实验方法第43-45页
  3.3.1 免疫磁珠法纯化CD34+造血干细胞第43-44页
  3.3.2 流式细胞术检测CD34+抗原纯度第44页
  3.3.3 各种观察指标的计算方法第44-45页
 3.4 实验结果第45-48页
  3.4.1 免疫磁珠法分离细胞的动态洗脱过程第45-46页
  3.4.2 流式细胞术检测结果第46页
  3.4.3 阳性细胞比例计算第46-48页
 3.5 讨论第48-49页
 3.5 本章小结第49-50页
第四章 脐血造血干细胞的体外扩增第50-70页
 4.1 前言第50-51页
 4.2 实验材料第51-52页
  4.2.1 扩增靶细胞第51页
  4.2.3 实验试剂第51-52页
  4.2.4 相关溶液第52页
 4.3 实验方法第52-53页
  4.3.1 CD34+细胞的液体悬浮培养第52-53页
  4.3.2 细胞换液第53页
  4.3.3 造血集落形成单位检测第53页
  4.3.4 数据处理第53页
 4.4 实验结果第53-66页
  4.4.1 CD34+造血干细胞的生长形态观察第53-56页
  4.4.2 细胞因子单因素对CD34+细胞扩增的影响第56-57页
  4.4.3 细胞因子浓度及其组合对总细胞数和集落扩增的影响第57-62页
  4.4.5 细胞接种密度和换液频率对细胞扩增的影响第62-64页
  4.4.5 长期培养过程中总细胞数和CFU数的扩增考察第64-66页
 4.5 讨论第66-68页
 4.6 本章小节第68-70页
第五章 结论与展望第70-73页
 5.1 结论第70-71页
 5.2 展望第71-73页
参考文献第73-80页
附录第80-84页
 附录1:主要英文缩略词第80-82页
 附录2:流式细胞术检测报告第82-83页
 附录3:均匀设计表及其使用表:第83-84页
 附录4:逐步回归分析运行结果(部分)第84页
致谢第84-86页

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