中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-31页 |
1.1 前言 | 第11页 |
1.2 脐血造血干细胞的生物学特性 | 第11-15页 |
1.2.1 高度的自我更新能力和增殖分化能力 | 第11-12页 |
1.2.2 造血干细胞的免疫表型特点 | 第12-14页 |
1.2.3 脐血造血干细胞及其移植的优势 | 第14-15页 |
1.3 脐血造血干细胞的分离纯化 | 第15-18页 |
1.3.1 阴性选择 | 第15-16页 |
1.3.2 阳性选择 | 第16-18页 |
1.4 脐血造血干细胞的体外扩增 | 第18-28页 |
1.4.1 扩增起始细胞的形式 | 第18-19页 |
1.4.2 扩增所需的细胞因子 | 第19-21页 |
1.4.3 细胞因子的合理组合 | 第21-22页 |
1.4.4 扩增培养基的选择 | 第22页 |
1.4.5 扩增时间长度的选择 | 第22-23页 |
1.4.6 造血微环境 | 第23页 |
1.4.7 扩增培养体系 | 第23-26页 |
1.4.8 生物反应器的作用 | 第26页 |
1.4.9 氧浓度的影响 | 第26页 |
1.4.10 贮存方法 | 第26-27页 |
1.4.11 扩增后评价 | 第27-28页 |
1.5 体外扩增造血干细胞的临床应用现状与前景 | 第28-30页 |
1.5.1 造血干细胞移植 | 第28-29页 |
1.5.2 免疫治疗 | 第29页 |
1.5.3 基因治疗 | 第29-30页 |
1.6 本论文的工作目的及主要内容 | 第30-31页 |
第二章 脐血造血干细胞的预分离 | 第31-42页 |
2.1 前言 | 第31页 |
2.2 实验材料 | 第31-33页 |
2.2.1 脐血标本来源 | 第31页 |
2.2.2 实验仪器 | 第31-32页 |
2.2.3 实验试剂 | 第32页 |
2.2.4 相关溶液 | 第32-33页 |
2.3 实验方法 | 第33-36页 |
2.3.1 脐血的采集 | 第33页 |
2.3.2 脐血单核细胞的分离 | 第33-34页 |
2.3.2 细胞计数及活力测定 | 第34-35页 |
2.3.3 造血集落形成单位的测定 | 第35页 |
2.3.4 苏木精-伊红染色观察造血集落 | 第35页 |
2.3.5 统计学处理: | 第35-36页 |
2.4 实验结果 | 第36-39页 |
2.4.1 不同分离方法对MNC回收率的影响 | 第36-37页 |
2.4.2 不同分离方法对细胞体外培养增殖能力的影响 | 第37-39页 |
2.4.3 造血集落形态观察 | 第39页 |
2.5 讨论 | 第39-41页 |
2.6 本章小结 | 第41-42页 |
第三章 免疫磁珠法分离纯化CD34+造血干细胞 | 第42-50页 |
3.1 前言 | 第42页 |
3.2 实验材料 | 第42-43页 |
3.2.1 细胞来源 | 第42页 |
3.2.2 实验仪器 | 第42-43页 |
3.2.3 实验试剂 | 第43页 |
3.3 实验方法 | 第43-45页 |
3.3.1 免疫磁珠法纯化CD34+造血干细胞 | 第43-44页 |
3.3.2 流式细胞术检测CD34+抗原纯度 | 第44页 |
3.3.3 各种观察指标的计算方法 | 第44-45页 |
3.4 实验结果 | 第45-48页 |
3.4.1 免疫磁珠法分离细胞的动态洗脱过程 | 第45-46页 |
3.4.2 流式细胞术检测结果 | 第46页 |
3.4.3 阳性细胞比例计算 | 第46-48页 |
3.5 讨论 | 第48-49页 |
3.5 本章小结 | 第49-50页 |
第四章 脐血造血干细胞的体外扩增 | 第50-70页 |
4.1 前言 | 第50-51页 |
4.2 实验材料 | 第51-52页 |
4.2.1 扩增靶细胞 | 第51页 |
4.2.3 实验试剂 | 第51-52页 |
4.2.4 相关溶液 | 第52页 |
4.3 实验方法 | 第52-53页 |
4.3.1 CD34+细胞的液体悬浮培养 | 第52-53页 |
4.3.2 细胞换液 | 第53页 |
4.3.3 造血集落形成单位检测 | 第53页 |
4.3.4 数据处理 | 第53页 |
4.4 实验结果 | 第53-66页 |
4.4.1 CD34+造血干细胞的生长形态观察 | 第53-56页 |
4.4.2 细胞因子单因素对CD34+细胞扩增的影响 | 第56-57页 |
4.4.3 细胞因子浓度及其组合对总细胞数和集落扩增的影响 | 第57-62页 |
4.4.5 细胞接种密度和换液频率对细胞扩增的影响 | 第62-64页 |
4.4.5 长期培养过程中总细胞数和CFU数的扩增考察 | 第64-66页 |
4.5 讨论 | 第66-68页 |
4.6 本章小节 | 第68-70页 |
第五章 结论与展望 | 第70-73页 |
5.1 结论 | 第70-71页 |
5.2 展望 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-80页 |
附录 | 第80-84页 |
附录1:主要英文缩略词 | 第80-82页 |
附录2:流式细胞术检测报告 | 第82-83页 |
附录3:均匀设计表及其使用表: | 第83-84页 |
附录4:逐步回归分析运行结果(部分) | 第84页 |
致谢 | 第84-86页 |