中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
图目录 | 第10-12页 |
表目录 | 第12-13页 |
缩写对比表 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-30页 |
·多环芳烃概述 | 第14-16页 |
·多环芳烃的来源 | 第14页 |
·多环芳烃的危害 | 第14-15页 |
·修复多环芳烃化合物污染的方法 | 第15-16页 |
·微生物降解多环芳烃污染的研究 | 第16-26页 |
·多环芳烃降解菌的多样性 | 第16-17页 |
·高分子量多环芳烃降解微生物的分离筛选 | 第17-18页 |
·高分子量多环芳烃微生物降解的基因组学研究 | 第18-22页 |
·高分子量多环芳烃微生物降解机理及降解途径研究进展 | 第22-26页 |
·微生物降解多环芳烃的蛋白质组学研究 | 第26-28页 |
·本研究的内容及意义 | 第28-30页 |
第二章 实验材料和方法 | 第30-52页 |
·实验材料 | 第30-35页 |
·菌株和质粒 | 第30页 |
·引物 | 第30-31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·仪器及设备 | 第32-34页 |
·培养基的配置 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-52页 |
·细菌基因组DNA的小量制备 | 第35-36页 |
·碱裂解法小量制备质粒 | 第36页 |
·DNA的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第36-37页 |
·琼脂糖凝胶DNA片段的纯化回收 | 第37页 |
·DNA浓度和纯度的检测 | 第37-38页 |
·聚合酶链式反应(PCR)体系 | 第38页 |
·酶切和连接反应 | 第38-39页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
·电转化 | 第39-40页 |
·PAHs降解菌株的分离与纯化 | 第40页 |
·细菌形态特征观察 | 第40页 |
·细菌生理生化特征鉴定 | 第40-41页 |
·抗生素敏感性的测定 | 第41页 |
·温度对降解菌株生长影响的测定 | 第41页 |
·pH对降解菌株生长影响的测定 | 第41-42页 |
·降解菌株生长曲线的测定 | 第42页 |
·16S rRNA序列分析和系统发育树的构建 | 第42页 |
·PAHs浓度对菌株生长影响的测定 | 第42页 |
·菌株在荧葸条件下生长曲线的测定 | 第42-43页 |
·荧蒽降解率的测定 | 第43页 |
·鼠李糖脂的含量测定 | 第43-44页 |
·降解酶活性测定 | 第44-45页 |
·随机转座突变体库的构建 | 第45-46页 |
·与荧蒽降解相关的转座突变体的筛选 | 第46-47页 |
·随机PCR | 第47-48页 |
·转座子插入位点的确定 | 第48页 |
·转座突变体生长的测定 | 第48页 |
·设计简并引物扩增同源基因 | 第48-49页 |
·基因敲除(Gene Knockout)的原理 | 第49-50页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第50页 |
·二维电泳(2-DE)及质谱鉴定 | 第50-52页 |
第三章 实验结果 | 第52-79页 |
·降解菌株的分离与鉴定 | 第52-56页 |
·菌株的形态特征和生理生化指标 | 第52-53页 |
·16S rRNA序列比对与系统发育分析 | 第53-54页 |
·菌株DN002最适生长条件的测定 | 第54-56页 |
·降解菌株的降解特性研究 | 第56-61页 |
·菌株DN002对不同PAHs的降解效果 | 第56页 |
·菌株DN002对荧蒽的降解 | 第56-57页 |
·表面活性剂对菌株DN002降解的影响 | 第57-58页 |
·DN002菌株中降解相关酶蛋白活性的检测 | 第58-61页 |
·降解菌株的基因组学研究 | 第61-68页 |
·随机转座突变体库的构建 | 第61页 |
·荧葸降解相关转座突变体的筛选 | 第61-62页 |
·降解相关基因的确定 | 第62-66页 |
·基因功能研究 | 第66-68页 |
·降解菌株的蛋白质组学研究 | 第68-79页 |
·SDS-PAGE结果分析 | 第68-69页 |
·双向电泳(2-DE)结果分析 | 第69-71页 |
·差异蛋白质点的研究 | 第71-79页 |
第四章 小结与讨论 | 第79-84页 |
参考文献 | 第84-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第93页 |