| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·苏云金芽孢杆菌概述 | 第9-12页 |
| ·苏云金芽孢杆菌及晶体蛋白 | 第10页 |
| ·苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白的杀虫机理 | 第10-11页 |
| ·害虫对苏云金芽孢杆菌的抗性现状 | 第11-12页 |
| ·小菜蛾及昆虫对 Bt 的抗性研究 | 第12-14页 |
| ·小菜蛾概述 | 第12页 |
| ·利用近等基因系研究昆虫抗药性 | 第12-13页 |
| ·小菜蛾及昆虫对 Bt 抗性机理研究 | 第13-14页 |
| ·Bt 杀虫蛋白的受体类钙粘蛋白研究进展 | 第14-18页 |
| ·类钙粘蛋白的结构特征 | 第14-15页 |
| ·类钙粘蛋白的分布与定位 | 第15页 |
| ·类钙粘蛋白与 Bt Cry 类杀虫蛋白的结合特征 | 第15-16页 |
| ·类钙粘蛋白与 Bt 杀虫蛋白抗性的关系 | 第16-17页 |
| ·昆虫类钙粘蛋白片段在害虫防治上的应用价值 | 第17-18页 |
| ·研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 抗 Cry1Ac 小菜蛾近等基因系的建立及近等性评价 | 第19-26页 |
| ·材料与试剂 | 第19-20页 |
| ·供试小菜蛾 | 第19页 |
| ·供试蔬菜 | 第19页 |
| ·供试药剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器和材料 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·利用高世代回交法构建小菜蛾近等基因系 | 第20-21页 |
| ·利用双亲嵌合背景法建小菜蛾近等基因系 | 第21页 |
| ·利用 ISSR 分子标记评价近等基因系 | 第21-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-26页 |
| ·高世代回交法构建小菜蛾近等基因系 | 第23-24页 |
| ·双亲嵌合背景法建小菜蛾近等基因系 | 第24页 |
| ·各种群近遗传相似度测定 | 第24-26页 |
| 第三章 小菜蛾类钙粘蛋白基因片段融合表达载体的构建及表达及生物活性测定 | 第26-51页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·供试小菜蛾 | 第26页 |
| ·载体与菌株 | 第26页 |
| ·目的片段扩增所需引物 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·主要溶液试剂配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-39页 |
| ·小菜蛾 SS 的中肠总 RNA 提取 | 第29-30页 |
| ·合成 cDNA | 第30-31页 |
| ·小菜蛾 SS 类钙粘蛋白基因片段的 PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·类钙粘蛋白 DNA 片段的纯化回收 | 第32页 |
| ·类钙粘蛋白 DNA 片段与 T 载体的连接、转化与细菌培养 | 第32-33页 |
| ·阳性克隆子的鉴定、测序与序列分析 | 第33-34页 |
| ·重组 T 载体质粒和 pET28a 质粒的提取 | 第34-35页 |
| ·pET-28a 载体及重组质粒的双酶切 | 第35页 |
| ·胶回收 | 第35页 |
| ·目的片段与表达载体的连接 | 第35-36页 |
| ·连接产物转化入大肠杆菌 DH5α感受态细胞 | 第36页 |
| ·融合基因在大肠杆菌 BL21(DE3)中的诱导表达条件的优化 | 第36页 |
| ·蛋白表达 SDS-PAGE 检测 | 第36-37页 |
| ·不同温度下蛋白表达形式的检测 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的生物活性测定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-51页 |
| ·小菜蛾 SS 的中肠总 RNA 提取 | 第39页 |
| ·合成 cDNA 的 Actin 引物检测 | 第39-40页 |
| ·小菜蛾 SS 类钙粘蛋白片段的 PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·小菜蛾类钙粘蛋白片段序列结果分析 | 第41-43页 |
| ·小菜蛾类钙粘蛋白片段融合表达载体构建 | 第43-45页 |
| ·融合蛋白的诱导表达条件优化 | 第45-47页 |
| ·融合蛋白不同温度表达形式的 SDS-PAGE 验证 | 第47-48页 |
| ·小菜蛾类钙粘蛋白片段融合蛋白的表达 | 第48-49页 |
| ·融合蛋白生物活性测定 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
