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Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶HATL4的表达及其单克隆抗体的研制

中文摘要第1-7页
Abstract第7-12页
一、引言第12-14页
二、材料与方法第14-28页
 1 实验材料第14-18页
   ·标本及细胞系第14页
   ·主要试剂与材料第14-16页
   ·主要仪器和设备第16-17页
   ·常用缓冲液及配制第17-18页
 2 实验方法第18-28页
   ·HATL4 mRNA 在人恶性血液病细胞系和白血病患者骨髓细胞中的表达情况第18-21页
   ·II 型跨膜丝氨酸蛋白酶 HATL4 融合蛋白的原核表达、纯化及复性第21-23页
   ·鼠抗人 HATL4 单克隆抗体的制备第23-25页
   ·HATL4 真核表达载体的构建及表达第25-28页
三、结果第28-37页
   ·HATL4 在恶性血液病细胞系和白血病患者骨髓标本中的表达第28-29页
   ·HATL4 原核表达载体的构建、表达及纯化第29-32页
     ·RT-PCR 扩增目的基因第29页
     ·重组克隆质粒 pMD 18-T simple-HATL4 的鉴定第29-30页
     ·重组表达质粒 pQE30-HATL4 的鉴定第30页
     ·6×His-HATL4 融合蛋白的表达及可溶性鉴定第30-31页
     ·HATL4 融合蛋白纯化、复性、浓缩后鉴定第31页
     ·HATL4 融合蛋白的 Western blotting 鉴定第31-32页
   ·单克隆抗体的制备第32-33页
     ·细胞融合第32页
     ·单克隆抗体腹水的纯化及含量测定第32-33页
   ·HATL4 真核表达载体的构建及在 CHO 细胞的表达第33-34页
     ·HATL4 目的片段的扩增及载体的构建第33页
     ·HATL4 在 CHO 细胞的表达第33-34页
   ·单克隆抗体的鉴定第34-37页
     ·蛋白质免疫印迹法及流式细胞术检测 HATL4 在 CHO 细胞中的表达情况第34-35页
     ·流式细胞术分析 HATL4 在白血病细胞系的表达第35-36页
     ·免疫荧光分析 HATL4 在白血病细胞系的表达第36-37页
四、讨论第37-39页
五、展望第39-40页
参考文献第40-43页
综述第43-52页
 参考文献第49-52页
中英文缩略词对照表第52-54页
硕士学位期间发表的论文第54-55页
本课题所获得基金资助第55-56页
致谢第56-57页

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