中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-17页 |
·B7-H4 研究现状 | 第11-14页 |
·B7-H4 的生物学特性 | 第11-12页 |
·B7-H4 对 T 细胞功能的调节作用及其机制 | 第12-13页 |
·B7-H4 与肿瘤的关系 | 第13-14页 |
·NLS 的研究现状 | 第14-15页 |
·NLS 在结构上的特点 | 第14-15页 |
·NLS 的检测手段 | 第15页 |
·本课题研究的主要内容 | 第15-17页 |
第二章 B7-H4 在肿瘤细胞中的核转移研究 | 第17-23页 |
·引言 | 第17页 |
·材料 | 第17-18页 |
·普通试剂 | 第17页 |
·主要缓冲液的配置 | 第17-18页 |
·培养基的制备 | 第18页 |
·实验步骤 | 第18-20页 |
·免疫荧光分析 B7-H4 在 SK-BR-3 细胞中的定位 | 第18-20页 |
·免疫荧光分析 B7-H4 在 MDA-MB-453, MCF-7, THP-1 和 U937 细胞中的定位 | 第20页 |
·实验结果 | 第20-21页 |
·免疫荧光分析 B7-H4 在 SK-BR-3 细胞中的定位 | 第20-21页 |
·免疫荧光分析 B7-H4 在 MDA-MB-453, MCF-7, THP-1 和 U937 细胞中的定位 | 第21页 |
·本章小结 | 第21-23页 |
第三章 人 B7-H4 野生型基因的克隆及突变体基因的构建 | 第23-38页 |
·引言 | 第23页 |
·材料 | 第23-26页 |
·引物 | 第23-24页 |
·普通试剂 | 第24页 |
·主要缓冲液的配置 | 第24页 |
·培养基的制备 | 第24-25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·主要细胞与分子生物学试剂 | 第25页 |
·质粒和菌株 | 第25-26页 |
·实验步骤 | 第26-32页 |
·B7-H4 基因序列分析 | 第26-27页 |
·目的基因 B7-H4 的克隆 | 第27-29页 |
·重组真核质粒载体的构建 | 第29-31页 |
·B7-H4 突变体的构建 | 第31-32页 |
·实验结果与讨论 | 第32-37页 |
·B7-H4 序列分析结果 | 第32页 |
·乳腺癌细胞株 SK-BR-3 中提取的 RNA 的浓度与完整度测试 | 第32-33页 |
·人 B7-H4 野生型基因的克隆及突变体的获得 | 第33-37页 |
·本章小结 | 第37-38页 |
第四章 人 B7-H4 野生型基因及突变体基因转染细胞的构建及促细胞增殖的研究 | 第38-45页 |
·引言 | 第38页 |
·材料 | 第38-39页 |
·主要缓冲液的配置 | 第38页 |
·培养基的制备 | 第38-39页 |
·主要细胞与分子生物学试剂 | 第39页 |
·主要仪器 | 第39页 |
·实验步骤 | 第39-41页 |
·重组克隆质粒及真核质粒载体 pIRES2-EGFP 的提取 | 第39-40页 |
·基因瞬时转染细胞的构建 | 第40页 |
·转基因细胞的增殖率的分析 | 第40页 |
·抗肿瘤药物对转基因细胞的细胞毒性分析 | 第40-41页 |
·实验结果与讨论 | 第41-44页 |
·转基因细胞株的 GFP 鉴定 | 第41-42页 |
·化疗药对转基因细胞株的杀伤作用 | 第42-43页 |
·转基因细胞的增殖率的分析 | 第43-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
论文总结与展望 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第51-52页 |
附录 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |