| 常用缩略词表 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 前言 | 第13-21页 |
| 一 神经干细胞 | 第14-16页 |
| 二 低氧对神经干细胞的影响 | 第16-17页 |
| 三 低氧调控的分子机制 | 第17-18页 |
| 四 低氧与 miRNAs | 第18-21页 |
| 第一部分 低氧对神经干细胞中 miR-210 的表达调控 | 第21-65页 |
| 一、 实验材料和试剂 | 第21-25页 |
| （一） 实验动物 | 第21页 |
| （二） 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| （三） 抗体 | 第22-23页 |
| （四） 主要试剂及常用配方 | 第23-25页 |
| 二、 实验方法 | 第25-36页 |
| （一） 原代大鼠神经干细胞的分离培养和传代 | 第25-26页 |
| （二） 免疫荧光 | 第26页 |
| （三） RT-PCR 检测 mRNA 表达 | 第26-28页 |
| （四） Realtime-PCR 检测 miRNA 表达 | 第28-30页 |
| （五） 蛋白提取和 Western blot | 第30-33页 |
| （六） MiR-210-sensor 载体构建 | 第33-34页 |
| （七） 细胞存活率分析 | 第34页 |
| （八） BrdU 掺入检测细胞增殖率 | 第34-35页 |
| （九） TUNEL 试剂盒检测细胞凋亡 | 第35-36页 |
| （十） 双荧光素酶检测 | 第36页 |
| （十一）数据处理与统计学分析 | 第36页 |
| 三、 实验结果 | 第36-62页 |
| （一） 低氧对体外培养 NSCs 中 miR-210 表达的影响 | 第36-37页 |
| （二） DNA 甲基化对 miR-210 表达的调控 | 第37-39页 |
| （三） MiR-210 对神经干细胞存活的影响 | 第39-42页 |
| （四） MiR-210 对神经干细胞凋亡的影响 | 第42-44页 |
| （五） MiR-210 对神经干细胞增殖的影响 | 第44-47页 |
| （六） MiR-210 靶基因筛选 | 第47-50页 |
| （七） 低氧对 HIF-1 及其靶基因 BNIP3 表达的影响 | 第50-52页 |
| （八） MiR-210 与 BNIP3 相互作用靶位点的预测与验证 | 第52-54页 |
| （九） MiR-210 对 BNIP3 蛋白表达的影响 | 第54-57页 |
| （十） MiR-210 通过 BNIP3 调节低氧下 NSCs 存活 | 第57-59页 |
| （十一）MiR-210 抑制 AIF 入核 | 第59-62页 |
| 四、 讨论 | 第62-64页 |
| 五、 结论 | 第64-65页 |
| 第二部分 低氧对循环 miR-210 分泌的影响及其初步的功能研究 | 第65-82页 |
| 一、 实验材料和试剂 | 第65-67页 |
| （一） 主要仪器设备 | 第65-66页 |
| （二） 实验动物 | 第66页 |
| （三） 主要试剂及常用配方 | 第66-67页 |
| 二、 实验方法 | 第67-70页 |
| （一） Realtime-PCR 检测循环 miRNA 的表达 | 第67-69页 |
| （二） 免疫荧光 | 第69页 |
| （三） 细胞存活率分析 | 第69页 |
| （四） 超速离心分离囊泡 | 第69-70页 |
| （五） 数据处理与统计学分析 | 第70页 |
| 三、 实验结果 | 第70-80页 |
| （一） 低氧促进神经干细胞分泌 miR-210 | 第70-72页 |
| （二） 检测培养上清中含有循环 miR-210 的囊泡 | 第72-75页 |
| （三） 循环 miR-210 对 NSCs 存活的影响 | 第75-77页 |
| （四） 低氧对大鼠脑脊液和血液中 miR-210 含量的影响 | 第77-80页 |
| 四 讨论 | 第80-81页 |
| 五 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-89页 |
| 附录 Ⅰ. 攻读博士学位期间论文发表，专利申请以及获奖情况 | 第89-90页 |
| 综述 | 第90-100页 |
| 参考文献 | 第95-100页 |
| 个人简历 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
