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猪轮状病毒DN30209株的驯化培养

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-21页
   ·轮状病毒的基因组与形态结构第11-12页
   ·轮状病毒的分群与分型第12-13页
   ·轮状病毒的理化性质及培养特性第13-14页
   ·轮状病毒的致病性及流行特点第14-16页
   ·轮状病毒小鼠模型免疫研究第16页
   ·猪轮状病毒的诊断与防治第16-20页
     ·诊断方法第16-17页
     ·药物防治第17页
     ·轮状病毒疫苗研究进展第17-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
2 材料与方法第21-29页
   ·实验材料第21-22页
     ·种毒、细胞系及实验动物第21页
     ·引物第21页
     ·试剂与耗材第21页
     ·主要试剂及培养基的配制第21-22页
     ·仪器设备第22页
   ·试验方法第22-29页
     ·PRV DN30209 分型的鉴定第22-23页
     ·MA-104 细胞系的复苏与培养第23-24页
     ·细胞系的纯净性检测第24页
     ·MTT 法检测胰酶对 MA-104 细胞系最大无毒浓度第24页
     ·病毒最佳培养条件的测定第24-25页
     ·种毒库的建立第25-26页
     ·种毒的理化性质第26-27页
     ·种毒特异性与纯净性检测第27页
     ·种毒免疫效果第27-29页
3 结果与分析第29-39页
   ·PRV DN30209 定型分析第29-31页
     ·猪轮状病毒 DN30209 株 E 血清型定型分析(NSP4)第29页
     ·猪轮状病毒 DN30209 株 I 血清型定型分析(VP6)第29-30页
     ·猪轮状病毒 DN30209 株 G 血清型定型分析(VP7)第30-31页
   ·MA-104 细胞系的复苏与传代第31页
   ·细胞系的纯净性检测第31-32页
     ·MA-104 细胞系的细菌和霉菌检测第31-32页
     ·MA-104 细胞系的支原体检测第32页
   ·胰酶对细胞的最大无毒浓度第32-33页
   ·病毒最佳培养条件的确定第33-34页
   ·病毒传代的监测第34-35页
     ·连续传代的 PRV 的 RT-PCR 鉴定第34页
     ·各代病毒 TCID50的变化趋势第34-35页
   ·种毒的理化性质第35页
     ·热敏实验第35页
     ·氯仿敏感试验第35页
     ·PH 稳定性试验第35页
   ·种毒特异性检测第35-37页
     ·间接免疫荧光第35-36页
     ·外源病毒的检测第36-37页
   ·种毒纯净性检测第37-38页
   ·刺激动物体免疫效果第38-39页
4 讨论第39-42页
   ·轮状病毒的分型研究第39页
   ·胰酶对病毒增殖的影响第39-40页
   ·连续传代培养对病毒滴度和毒力的影响第40-41页
   ·病毒理化性质的探究第41页
   ·免疫接种实验的分析第41-42页
5 结论第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-52页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第52页

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