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鸡胚生殖细胞减数分裂起始调控的研究

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-17页
缩略词表第17-19页
第一章 文献综述第19-37页
   ·减数分裂概况第19-24页
     ·减数分裂过程第19-21页
     ·卵子发生过程第21-23页
     ·精子的发生过程第23-24页
   ·生殖细胞减数分裂起始的调控第24-32页
     ·生殖细胞起始减数分裂的条件第24-25页
     ·RA起始减数分裂第25-28页
     ·调控减数分裂的其他因素第28-31页
     ·展望第31-32页
   ·鸡胚模型在生殖生理研究中的优势第32-35页
     ·易获取第32页
     ·体外发育,易于操作第32页
     ·内分泌研究时母体影响较小第32-33页
     ·转基因模型建立的优势第33-34页
     ·展望第34-35页
   ·本研究的目的和内容第35-37页
     ·研究的目的和意义第35页
     ·研究的目标和内容第35-37页
第二章 雌激素对鸡胚性腺生殖细胞发育的影响第37-55页
   ·引言第37-38页
   ·材料与方法第38-46页
     ·实验动物第38页
     ·主要器材第38页
     ·主要试剂及配制第38-39页
     ·胚胎处理及样品采集第39-40页
     ·性别鉴定第40-41页
     ·石蜡切片制作和形态学观察第41-42页
     ·免疫组织化学染色第42-43页
     ·冰冻切片免疫荧光染色第43页
     ·RNA提取第43-44页
     ·cDNA的合成第44页
     ·Real-time PCR第44-45页
     ·BrdU掺入鉴定生殖细胞的增殖第45-46页
     ·数据统计分析第46页
   ·结果第46-51页
     ·生殖细胞中的Dazl定位第46-47页
     ·雌激素处理后性腺的形态特征第47-48页
     ·卵巢皮质和卵巢样皮质内生殖细胞起始减数分裂第48-50页
     ·睾丸及睾丸精索状结构内生殖细胞保持有丝分裂状态第50页
     ·性腺内RA合成、代谢相关酶mRNA的表达变化第50-51页
   ·讨论第51-55页
第三章 垂体-卵巢轴激素对卵巢生殖细胞发育的影响第55-73页
   ·引言第55-56页
   ·材料与方法第56-62页
     ·实验动物第56页
     ·主要器材第56页
     ·主要试剂及配制第56-57页
     ·处理方法及组织收集第57-58页
     ·器官培养第58页
     ·RNA提取、cDNA合成及Real time PCR第58-59页
     ·Mi croRNA表达分析第59页
     ·免疫荧光共定位第59页
     ·BrdU掺入及检测第59页
     ·Western blot分析第59-62页
     ·统计分析第62页
   ·结果第62-70页
     ·FSH和LH调节生殖细胞减数分裂起始第62-63页
     ·FSH促进生殖细胞有丝分裂并延迟其减数分裂起始第63页
     ·促性腺激素调控miR181a及NR6A1 mRNA的转录第63-66页
     ·雌激素参与了FSH调节生殖细胞减数分裂及有丝分裂第66-67页
     ·LH通过P_4分泌调节减数分裂起始第67-69页
     ·FSH在生殖细胞发育中启主导作用第69-70页
   ·讨论第70-73页
第四章 孕酮在生殖细胞减数分裂起始中的作用第73-85页
   ·引言第73-74页
   ·材料与方法第74-77页
     ·实验动物第74页
     ·主要器材第74页
     ·主要试剂及配制第74页
     ·处理方法及组织收集第74页
     ·器官培养第74页
     ·RNA提取,cDNA合成及Real time PCR第74-75页
     ·免疫荧光共定位第75页
     ·高效液相色谱分析第75页
     ·生殖细胞-体细胞共培养模型建立第75-76页
     ·RNA干扰第76-77页
     ·数据的统计分析第77页
   ·结果第77-82页
     ·P_4促进雌性生殖细胞减数分裂起始第77-78页
     ·P_4促进体外雄性生殖细胞减数分裂起始第78-79页
     ·P_4诱发减数分裂不依赖于PR第79-80页
     ·P_4促进生殖细胞减数分裂不依赖于RA第80-82页
   ·讨论第82-85页
第五章 碱性成纤维细胞生长因子对鸡胚卵巢生殖细胞发育的影响第85-97页
   ·引言第85-86页
   ·材料与方法第86-89页
     ·实验动物第86页
     ·主要器材第86页
     ·主要试剂及配制方法第86页
     ·器官培养第86-87页
     ·鸡胚内注射bFGF第87页
     ·RNA提取、cDNA合成及Real-Time RT-PCR第87-88页
     ·FGFR1原位杂交第88页
     ·Giemsa染色检测生殖细胞减数分裂状态第88-89页
     ·免疫荧光染色第89页
     ·BrdU掺入检测生殖细胞的增殖第89页
     ·数据的统计分析第89页
   ·结果第89-94页
     ·bFGF及FGFR mRNA在卵巢发育过程中的表达情况第89-91页
     ·RA促进生殖细胞减数分裂起始第91-92页
     ·bFGF对RA引发的减数分裂起始的抑制作用第92-93页
     ·bFGF促进生殖细胞增殖第93-94页
   ·讨论第94-97页
第六章 成鸡卵巢生殖细胞再生的探索第97-103页
   ·引言第97-98页
   ·材料与方法第98-99页
     ·实验动物第98页
     ·主要器材第98页
     ·主要试剂及配制方法第98页
     ·RNA提取、cDNA合成及Real-Time RT-PCR第98-99页
     ·免疫荧光染色第99页
   ·结果第99-101页
     ·成鸡卵巢中原始生殖细胞的检测第99-100页
     ·成年鸡卵巢表达生殖细胞减数分裂起始相关基因第100-101页
   ·讨论第101-103页
第七章 提示和创新点第103-104页
参考文献第104-111页
致谢第111-113页
博士期间发表文章第113页

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