摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-17页 |
缩略词表 | 第17-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-37页 |
·减数分裂概况 | 第19-24页 |
·减数分裂过程 | 第19-21页 |
·卵子发生过程 | 第21-23页 |
·精子的发生过程 | 第23-24页 |
·生殖细胞减数分裂起始的调控 | 第24-32页 |
·生殖细胞起始减数分裂的条件 | 第24-25页 |
·RA起始减数分裂 | 第25-28页 |
·调控减数分裂的其他因素 | 第28-31页 |
·展望 | 第31-32页 |
·鸡胚模型在生殖生理研究中的优势 | 第32-35页 |
·易获取 | 第32页 |
·体外发育,易于操作 | 第32页 |
·内分泌研究时母体影响较小 | 第32-33页 |
·转基因模型建立的优势 | 第33-34页 |
·展望 | 第34-35页 |
·本研究的目的和内容 | 第35-37页 |
·研究的目的和意义 | 第35页 |
·研究的目标和内容 | 第35-37页 |
第二章 雌激素对鸡胚性腺生殖细胞发育的影响 | 第37-55页 |
·引言 | 第37-38页 |
·材料与方法 | 第38-46页 |
·实验动物 | 第38页 |
·主要器材 | 第38页 |
·主要试剂及配制 | 第38-39页 |
·胚胎处理及样品采集 | 第39-40页 |
·性别鉴定 | 第40-41页 |
·石蜡切片制作和形态学观察 | 第41-42页 |
·免疫组织化学染色 | 第42-43页 |
·冰冻切片免疫荧光染色 | 第43页 |
·RNA提取 | 第43-44页 |
·cDNA的合成 | 第44页 |
·Real-time PCR | 第44-45页 |
·BrdU掺入鉴定生殖细胞的增殖 | 第45-46页 |
·数据统计分析 | 第46页 |
·结果 | 第46-51页 |
·生殖细胞中的Dazl定位 | 第46-47页 |
·雌激素处理后性腺的形态特征 | 第47-48页 |
·卵巢皮质和卵巢样皮质内生殖细胞起始减数分裂 | 第48-50页 |
·睾丸及睾丸精索状结构内生殖细胞保持有丝分裂状态 | 第50页 |
·性腺内RA合成、代谢相关酶mRNA的表达变化 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-55页 |
第三章 垂体-卵巢轴激素对卵巢生殖细胞发育的影响 | 第55-73页 |
·引言 | 第55-56页 |
·材料与方法 | 第56-62页 |
·实验动物 | 第56页 |
·主要器材 | 第56页 |
·主要试剂及配制 | 第56-57页 |
·处理方法及组织收集 | 第57-58页 |
·器官培养 | 第58页 |
·RNA提取、cDNA合成及Real time PCR | 第58-59页 |
·Mi croRNA表达分析 | 第59页 |
·免疫荧光共定位 | 第59页 |
·BrdU掺入及检测 | 第59页 |
·Western blot分析 | 第59-62页 |
·统计分析 | 第62页 |
·结果 | 第62-70页 |
·FSH和LH调节生殖细胞减数分裂起始 | 第62-63页 |
·FSH促进生殖细胞有丝分裂并延迟其减数分裂起始 | 第63页 |
·促性腺激素调控miR181a及NR6A1 mRNA的转录 | 第63-66页 |
·雌激素参与了FSH调节生殖细胞减数分裂及有丝分裂 | 第66-67页 |
·LH通过P_4分泌调节减数分裂起始 | 第67-69页 |
·FSH在生殖细胞发育中启主导作用 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-73页 |
第四章 孕酮在生殖细胞减数分裂起始中的作用 | 第73-85页 |
·引言 | 第73-74页 |
·材料与方法 | 第74-77页 |
·实验动物 | 第74页 |
·主要器材 | 第74页 |
·主要试剂及配制 | 第74页 |
·处理方法及组织收集 | 第74页 |
·器官培养 | 第74页 |
·RNA提取,cDNA合成及Real time PCR | 第74-75页 |
·免疫荧光共定位 | 第75页 |
·高效液相色谱分析 | 第75页 |
·生殖细胞-体细胞共培养模型建立 | 第75-76页 |
·RNA干扰 | 第76-77页 |
·数据的统计分析 | 第77页 |
·结果 | 第77-82页 |
·P_4促进雌性生殖细胞减数分裂起始 | 第77-78页 |
·P_4促进体外雄性生殖细胞减数分裂起始 | 第78-79页 |
·P_4诱发减数分裂不依赖于PR | 第79-80页 |
·P_4促进生殖细胞减数分裂不依赖于RA | 第80-82页 |
·讨论 | 第82-85页 |
第五章 碱性成纤维细胞生长因子对鸡胚卵巢生殖细胞发育的影响 | 第85-97页 |
·引言 | 第85-86页 |
·材料与方法 | 第86-89页 |
·实验动物 | 第86页 |
·主要器材 | 第86页 |
·主要试剂及配制方法 | 第86页 |
·器官培养 | 第86-87页 |
·鸡胚内注射bFGF | 第87页 |
·RNA提取、cDNA合成及Real-Time RT-PCR | 第87-88页 |
·FGFR1原位杂交 | 第88页 |
·Giemsa染色检测生殖细胞减数分裂状态 | 第88-89页 |
·免疫荧光染色 | 第89页 |
·BrdU掺入检测生殖细胞的增殖 | 第89页 |
·数据的统计分析 | 第89页 |
·结果 | 第89-94页 |
·bFGF及FGFR mRNA在卵巢发育过程中的表达情况 | 第89-91页 |
·RA促进生殖细胞减数分裂起始 | 第91-92页 |
·bFGF对RA引发的减数分裂起始的抑制作用 | 第92-93页 |
·bFGF促进生殖细胞增殖 | 第93-94页 |
·讨论 | 第94-97页 |
第六章 成鸡卵巢生殖细胞再生的探索 | 第97-103页 |
·引言 | 第97-98页 |
·材料与方法 | 第98-99页 |
·实验动物 | 第98页 |
·主要器材 | 第98页 |
·主要试剂及配制方法 | 第98页 |
·RNA提取、cDNA合成及Real-Time RT-PCR | 第98-99页 |
·免疫荧光染色 | 第99页 |
·结果 | 第99-101页 |
·成鸡卵巢中原始生殖细胞的检测 | 第99-100页 |
·成年鸡卵巢表达生殖细胞减数分裂起始相关基因 | 第100-101页 |
·讨论 | 第101-103页 |
第七章 提示和创新点 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-111页 |
致谢 | 第111-113页 |
博士期间发表文章 | 第113页 |