| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第12-14页 |
| ·PRRSV 基因组结构 | 第12-13页 |
| ·PRRSV 非结构蛋白在病毒复制周期中功能 | 第13-14页 |
| ·PRRSV 致病机理 | 第14页 |
| ·Annexin A2 的生物学特性及其在病毒感染中的作用 | 第14-20页 |
| ·Annexin A2 的蛋白结构 | 第15页 |
| ·Annexin A2 与病毒感染的关系 | 第15-17页 |
| ·Annexin A2 与其它疾病的关系 | 第17-18页 |
| ·Annexin A2 作为病毒辅助因子与受体 | 第18-20页 |
| 第二章 猪肺泡巨噬细胞 CDNA 文库的制备 | 第20-27页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·病毒、细胞和菌株 | 第20页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第20页 |
| ·仪器设备 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-24页 |
| ·猪肺泡巨噬细胞的复苏与培养 | 第20-21页 |
| ·PAM 细胞总 RNA 的提取 | 第21页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第21页 |
| ·长距离 PCR（LD-PCR）扩增 dsDNA | 第21-22页 |
| ·dsDNA 产物的纯化 | 第22页 |
| ·酵母细胞 Y187 感受态的制备 | 第22-23页 |
| ·ds cDNA 和 pGADT7-Rec 酵母感受态细胞的转化 | 第23页 |
| ·文库的构建和收获 | 第23-24页 |
| ·文库的鉴定 | 第24页 |
| ·试验结果 | 第24-26页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第24页 |
| ·cDNA 的合成与纯化 | 第24-25页 |
| ·文库的收获结果 | 第25页 |
| ·菌落 PCR 的结果 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 酵母双杂交筛选与 PRRSV NSP9 相互作用的宿主蛋白 | 第27-39页 |
| ·试验材料 | 第27-29页 |
| ·毒株和菌株 | 第27页 |
| ·载体与质粒 | 第27页 |
| ·主要试剂来源 | 第27-28页 |
| ·培养基和抗生素的配制 | 第28-29页 |
| ·缓冲液及其他使用溶液 | 第29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-34页 |
| ·诱饵质粒 pGBKT7-NSP9 的构建 | 第29-31页 |
| ·互作蛋白的筛选 | 第31-33页 |
| ·阳性克隆的初步鉴定 | 第33页 |
| ·酵母回返试验对蛋白互作的验证 | 第33-34页 |
| ·试验结果 | 第34-37页 |
| ·诱饵质粒 pGBKT7-NSP9 的构建及自激活毒性检测 | 第34-35页 |
| ·相互作用蛋白的筛选及酵母验证 | 第35-36页 |
| ·酵母回返试验对蛋白互作的验证 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 PRRSV NSP9 与宿主蛋白 ANNEXINA2 相互作用鉴定 | 第39-48页 |
| ·材料 | 第39-41页 |
| ·菌株和细胞 | 第39页 |
| ·载体与质粒 | 第39页 |
| ·主要试剂来源 | 第39页 |
| ·培养基和抗生素的配置 | 第39-40页 |
| ·缓冲液及其它使用溶液 | 第40-41页 |
| ·试验方法 | 第41-44页 |
| ·真核表达质粒 pFlag-CMV4-NSP9、pCAGGS-HA-Annexin A2 的构建 | 第41-43页 |
| ·细胞培养和转染 | 第43页 |
| ·免疫共沉淀技术验证 NSP9 与 Annexin A2 蛋白的相互作用 | 第43页 |
| ·激光共聚焦技术验证 NSP9 与 Annexin A2 蛋白的共定位 | 第43-44页 |
| ·试验结果 | 第44-47页 |
| ·基因的扩增及克隆结果 | 第44-45页 |
| ·免疫共沉淀(Co-IP)试验结果 | 第45-46页 |
| ·激光共聚焦试验结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
