| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-24页 |
| ·Dicer的结构和功能 | 第13-15页 |
| ·Dicer基因的种类 | 第15页 |
| ·Dicer在生物体内的作用 | 第15-16页 |
| ·Dicer在生殖系统中的作用 | 第16-22页 |
| ·Dicer在卵母细胞和胚胎中的作用 | 第16-18页 |
| ·Dicer在卵巢颗粒细胞中的作用 | 第18-20页 |
| ·Dicer在子宫和输卵管中的作用 | 第20-22页 |
| ·Dicer与凋亡执行蛋白Caspase-3的关系 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·试验材料 | 第24-26页 |
| ·样本的采集 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第24-25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-34页 |
| ·反转录PCR获取鹅Dicer和Caspase-3mRNA部分序列 | 第26-31页 |
| ·RNA抽提 | 第26页 |
| ·总RNA的检测 | 第26-27页 |
| ·逆转录反应 | 第27页 |
| ·PCR引物设计 | 第27-28页 |
| ·不同片段的克隆及序列测定 | 第28-31页 |
| ·PCR扩增体系 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增反应的条件 | 第29页 |
| ·PCR产物的凝胶电泳检测 | 第29页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第29-30页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·回收产物与pMD-18T载体的连接 | 第30-31页 |
| ·连接物的转化 | 第31页 |
| ·阳性克隆筛选及鉴定 | 第31页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第31-33页 |
| ·Dicer和Caspase-3基因荧光定量引物设计与合成 | 第31-32页 |
| ·标准品的制备 | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
| ·激素的测定 | 第33-34页 |
| ·结果分析的主要工具和软件 | 第34页 |
| 3. 结果分析 | 第34-44页 |
| ·鹅Dicer和Caspase-3基因的克隆与序列分析 | 第34-36页 |
| ·卵巢总RNA提取及RT-PCR结果 | 第34-35页 |
| ·测序结果分析 | 第35-36页 |
| ·鹅Dicer蛋白保守结构域的预测及特征分析 | 第36-39页 |
| ·鹅Dicer蛋白保守结构域的预测 | 第36-37页 |
| ·鹅Dicer蛋白部分保守结构域特征 | 第37-38页 |
| ·鹅Dicer基因的二级结构 | 第38-39页 |
| ·鹅Dicer-a和Dicer-b的组织表达特性和卵泡发育表达特性 | 第39-41页 |
| ·鹅Dicer-a和Dicer-b基因的组织表达分析 | 第39-40页 |
| ·鹅Dicer-a和Dicer-b基因的卵泡发育的表达分析 | 第40-41页 |
| ·鹅Caspase-3的卵泡发育表达特性 | 第41页 |
| ·鹅Dicer-a和Dicer-b在卵泡发育中与Caspase-3的表达关系 | 第41-42页 |
| ·FSH和LH在鹅卵泡发育中的变化规律及其与Dicer-a、Dicer-b的关系 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-51页 |
| ·鹅Dicer基因及其剪切体的生物信息学分析 | 第44-45页 |
| ·鹅Dicer-a和Dicer-b基因的组织差异表达规律 | 第45-46页 |
| ·鹅Dice-a和Dicer-b基因的卵泡发育差异表达规律 | 第46-48页 |
| ·鹅Dicer-a和Dicer-b与Caspas-3的表达关系 | 第48-49页 |
| ·FSH和LH在鹅卵泡发育中的变化规律及其与Dicer-a、Dicer-b的关系 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
