| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-39页 |
| ·铂化合物简介 | 第13-14页 |
| ·顺、反式铂化合物与DNA的反应 | 第14-16页 |
| ·含硫生物小分子对铂化合物与DNA作用的影响 | 第16-20页 |
| ·含硫小分子与铂化合物的作用 | 第16-19页 |
| ·含硫小分子对铂化合物与DNA作用的影响 | 第19-20页 |
| ·蛋白对铂化合物与DNA作用的影响 | 第20-24页 |
| ·蛋白与铂化合物的作用 | 第20-22页 |
| ·蛋白对铂化合物与DNA作用的影响 | 第22-24页 |
| ·组蛋白H1的功能以及它与铂化DNA的作用 | 第24-25页 |
| ·缓冲溶液对铂化合物与DNA作用的影响 | 第25-28页 |
| 参考文献 | 第28-39页 |
| 第二章 蛋氨酸能促进DNA与反式铂化合物的反应 | 第39-55页 |
| ·引言 | 第39-40页 |
| ·实验部分 | 第40-42页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·样品制备 | 第40页 |
| ·核磁共振谱实验 | 第40-41页 |
| ·质谱实验 | 第41页 |
| ·荧光光谱实验 | 第41页 |
| ·甲基-蛋氨酸残基~(13)C标记的泛素蛋白的表达 | 第41-42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-52页 |
| ·trans-EE与GMP、AcMet的反应 | 第42-43页 |
| ·trans-EE与GMP、AcMet的反应速率比较 | 第42页 |
| ·trans-EE与AcMet的单取代产物的制备与鉴定 | 第42-43页 |
| ·AcMet对trans-EE与DNA反应的影响 | 第43-49页 |
| ·trans-EE/AcMet单取代产物与GMP的反应 | 第43-45页 |
| ·trans-EE与AcMe、GMP的竞争反应 | 第45-47页 |
| ·trans-EE/AcMet单取代产物与单链DNA的反应 | 第47页 |
| ·trans-EE/AcMet单取代产物与双链DNA的反应 | 第47-48页 |
| ·trans-EE/AcMet单取代产物与天然DNA的反应 | 第48-49页 |
| ·pH对trans-EE/AcMet单取代产物与GMP反应的影响 | 第49-50页 |
| ·实验证明Pt-(S)-protein中间体的存在 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第三章 蛋氨酸对trans-EE与DNA反应的影响：产物热力学研究 | 第55-75页 |
| ·引言 | 第55-56页 |
| ·实验部分 | 第56-57页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·样品制备 | 第56-57页 |
| ·核磁共振谱实验 | 第57页 |
| ·质谱实验 | 第57页 |
| ·实验结果 | 第57-67页 |
| ·trans-EE与AcMet的反应产物 | 第57-61页 |
| ·双取代产物在反应初期已经形成 | 第57-59页 |
| ·高浓度NaCl对trans-EE与AcMet反应产物的影响 | 第59-61页 |
| ·trans-EE在Met存在时与GMP的反应 | 第61-62页 |
| ·trans-EE/AcMet双取代产物与GMP的反应 | 第62-63页 |
| ·trans-EE/GMP双取代产物不能与AcMet反应 | 第63-64页 |
| ·trans-EE/Met双取代产物的异构化和螯合反应 | 第64-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| ·trans-EE与过量Met的反应 | 第67页 |
| ·trans-EE/Met双取代产物的异构化与Met的螯合反应 | 第67-68页 |
| ·GMP与Met在与铂配位时的协同作用 | 第68-69页 |
| ·形成共价结合的Protein/Pt/DNA三元复合物的两种途径 | 第69页 |
| ·总结 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 第四章 缓冲体系组分、pH对trans-EE与GMP反应的影响 | 第75-91页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·实验部分 | 第76-77页 |
| ·实验材料 | 第76页 |
| ·样品制备 | 第76页 |
| ·实验仪器 | 第76-77页 |
| ·HPLC研究 | 第77页 |
| ·缓冲溶液的配制 | 第77页 |
| ·结果与讨论 | 第77-87页 |
| ·溶液pH的影响 | 第77-79页 |
| ·Hepes缓冲溶液的影响 | 第79-81页 |
| ·碳酸盐缓冲溶液的影响 | 第81-82页 |
| ·磷酸盐缓冲溶液的影响 | 第82-85页 |
| ·不同缓冲溶液的影响 | 第85-87页 |
| ·总结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 第五章 组蛋白H1对铂化合物与DNA相互作用的影响 | 第91-117页 |
| ·引言 | 第91-92页 |
| ·实验材料与方法 | 第92-100页 |
| ·pGBTNH-H1N90质粒构建 | 第92-95页 |
| ·H1N90基因获取 | 第93页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳纯化PCR产物 | 第93页 |
| ·从琼脂糖凝胶电泳回收DNA片段 | 第93页 |
| ·连接载体与目的基因 | 第93-95页 |
| ·GB1-H1N90融合蛋白的表达与纯化 | 第95-96页 |
| ·GB1-H1N90融合蛋白复性 | 第96页 |
| ·TEV酶对GB1-H1N90融合蛋白进行酶切 | 第96-97页 |
| ·TEV酶表达与纯化 | 第96页 |
| ·TEV酶酶切 | 第96-97页 |
| ·H1N90目标蛋白的纯化 | 第97-98页 |
| ·阳离子交换柱纯化 | 第97页 |
| ·凝胶过滤色谱纯化 | 第97-98页 |
| ·HPLC色谱纯化 | 第98页 |
| ·Histone H1的N端7肽的制备与纯化 | 第98-99页 |
| ·实验方法 | 第99-100页 |
| ·15%SDS-PAGE电泳 | 第99页 |
| ·质谱 | 第99页 |
| ·HPLC分离条件 | 第99-100页 |
| ·实验结果 | 第100-113页 |
| ·H1N7肽与不同铂的反应 | 第100-109页 |
| ·H1N7肽与顺铂的反应 | 第100-103页 |
| ·H1N7肽与trans-EE的反应 | 第103-107页 |
| ·H1N7肽与trans-PTZ的反应 | 第107-109页 |
| ·蛋白H1N90的鉴定 | 第109页 |
| ·H1N90与不同铂的反应 | 第109-110页 |
| ·质谱检测cis-DDP与H1N90的反应产物 | 第109页 |
| ·质谱检测trans-EE与H1N90的反应产物 | 第109-110页 |
| ·质谱检测trans-PTZ与H1N90的反应产物 | 第110页 |
| ·H1N90将铂向DNA转运 | 第110-113页 |
| ·cis-DDP/H1N90与DNA的反应产物 | 第111页 |
| ·trans-PTZ/H1N90与DNA的反应产物 | 第111-113页 |
| ·总结 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第118页 |
