| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-31页 |
| ·甘草酸及其衍生物 | 第10-13页 |
| ·甘草酸及其衍生物的结构 | 第10-11页 |
| ·甘草酸及其衍生物的应用 | 第11-12页 |
| ·甘草酸改性方法 | 第12-13页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶的研究进展 | 第13-22页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶的来源 | 第13-14页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶的结构 | 第14-18页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶的催化特性 | 第18-20页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶的应用 | 第20-22页 |
| ·基因克隆技术的研究 | 第22-24页 |
| ·构建文库 | 第22页 |
| ·交错式热不对称 PCR | 第22-23页 |
| ·cDNA 末端快速克隆 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌表达系统的研究进展 | 第24-25页 |
| ·载体的选择 | 第24页 |
| ·宿主的选择 | 第24-25页 |
| ·高效表达优化策略 | 第25页 |
| ·酶的人工改造 | 第25-29页 |
| ·理性设计 | 第26页 |
| ·非理性设计 | 第26-29页 |
| ·本文选题依据及研究内容 | 第29-31页 |
| ·选题依据 | 第29页 |
| ·研究内容 | 第29-31页 |
| 第二章 β-葡萄糖醛酸苷酶基因的克隆及序列分析 | 第31-56页 |
| 引言 | 第31页 |
| ·材料 | 第31-34页 |
| ·菌种 | 第31-32页 |
| ·药品试剂 | 第32-33页 |
| ·主要设备 | 第33-34页 |
| ·主要溶液 | 第34页 |
| ·主要培养基 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-44页 |
| ·菌体的培养 | 第34页 |
| ·基因组提取 | 第34-35页 |
| ·总 RNA 提取 | 第35-36页 |
| ·总 RNA 中 DNA 的去除 | 第36页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·热击转化 | 第37页 |
| ·土曲霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因扩增 | 第37-39页 |
| ·焦曲霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因扩增 | 第39-43页 |
| ·基因生物信息学分析 | 第43-44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-55页 |
| ·土曲霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因的克隆 | 第44-46页 |
| ·焦曲霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因的克隆 | 第46-49页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶进化树分析 | 第49-50页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶序列分析 | 第50-54页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶空间结构分析 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第三章 非保守序列截除对 AtGUS 酶学特性的影响 | 第56-77页 |
| 引言 | 第56页 |
| ·材料 | 第56-58页 |
| ·菌种与基因 | 第56-57页 |
| ·药品试剂 | 第57页 |
| ·主要设备 | 第57页 |
| ·主要溶液 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-62页 |
| ·原核表达载体构建及转化 | 第58页 |
| ·蛋白质表达条件的优化 | 第58-59页 |
| ·蛋白质分离纯化 | 第59页 |
| ·蛋白质浓度检测 | 第59-60页 |
| ·蛋白质 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第60页 |
| ·酶活测定方法 | 第60-61页 |
| ·酶学特性研究 | 第61-62页 |
| ·圆二色谱分析 | 第62页 |
| ·荧光光谱分析 | 第62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-76页 |
| ·AtGUS 非保守序列的截除 | 第62-63页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第63-64页 |
| ·诱导条件的优化 | 第64-66页 |
| ·蛋白质表达及纯化 | 第66-69页 |
| ·酶学特性分析 | 第69-74页 |
| ·圆二色谱分析 | 第74-75页 |
| ·荧光光谱分析 | 第75-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 第四章 非保守序列亲/疏水肽段截除对 AtGUS 酶学特性的影响 | 第77-94页 |
| 引言 | 第77页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·菌种及基因 | 第77页 |
| ·药品试剂 | 第77页 |
| ·主要设备 | 第77-78页 |
| ·主要溶液 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-80页 |
| ·AtGUS 非保守肽段亲/疏水性分析方法 | 第78-79页 |
| ·原核表达载体构建及转化 | 第79页 |
| ·蛋白质表达及纯化 | 第79-80页 |
| ·酶学特性研究 | 第80页 |
| ·圆二色谱分析 | 第80页 |
| ·荧光光谱分析 | 第80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-93页 |
| ·AtGUS 亲/疏水肽段截除位点 | 第80-81页 |
| ·基因克隆及载体构建 | 第81-83页 |
| ·蛋白质表达及纯化 | 第83-86页 |
| ·酶学特性分析 | 第86-91页 |
| ·圆二色谱分析 | 第91-92页 |
| ·荧光光谱分析 | 第92-93页 |
| ·小结 | 第93-94页 |
| 第五章 非保守序列极性氨基酸重组对 AtGUS 酶学特性的影响 | 第94-108页 |
| 引言 | 第94页 |
| ·材料 | 第94-95页 |
| ·菌种及基因 | 第94页 |
| ·药品试剂 | 第94页 |
| ·主要设备 | 第94-95页 |
| ·主要溶液 | 第95页 |
| ·方法 | 第95-96页 |
| ·AtGUS 非保守序列极性氨基酸序列的合成 | 第95页 |
| ·基因克隆及载体构建 | 第95-96页 |
| ·蛋白质表达及纯化 | 第96页 |
| ·酶学特性分析 | 第96页 |
| ·圆二色谱分析 | 第96页 |
| ·荧光光谱分析 | 第96页 |
| ·结果与讨论 | 第96-106页 |
| ·基因克隆及载体构建 | 第96-99页 |
| ·蛋白质表达纯化 | 第99-101页 |
| ·酶学特性分析 | 第101-105页 |
| ·圆二色谱分析 | 第105-106页 |
| ·荧光光谱分析 | 第106页 |
| ·小结 | 第106-108页 |
| 第六章 结论与展望 | 第108-111页 |
| ·结论 | 第108-110页 |
| ·创新点 | 第110页 |
| ·对今后工作的建议与展望 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-121页 |
| 发表文章及科研情况说明 | 第121-123页 |
| 附录 | 第123-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
