| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 缩写名词 | 第8-11页 |
| 第一部分 引言 | 第11-23页 |
| ·miRNA 的研究概述 | 第11-16页 |
| ·miRNA 的定义及命名规则 | 第12页 |
| ·miRNA 的生物形成过程及结构特点 | 第12-14页 |
| ·miRNA 的作用机制及功能研究 | 第14-16页 |
| ·miRNA 研究方法 | 第16-21页 |
| ·miRNA 的克隆 | 第16-18页 |
| ·高通量测序 | 第18-19页 |
| ·miRNA 的检测 | 第19-20页 |
| ·靶基因预测及验证 | 第20-21页 |
| ·本课题研究的理论意义 | 第21-23页 |
| 第二部分 中华绒螯蟹卵巢 miRNA 的分离及鉴定 | 第23-32页 |
| ·材料与方法 | 第23-26页 |
| ·样品采集 | 第23页 |
| ·中华绒螯蟹不同时期卵巢 RNA 的抽提 | 第23-24页 |
| ·中华绒螯蟹卵巢 miRNA 的 solexa 测序及分析 | 第24-26页 |
| ·Solexa 测序结果与分析 | 第26-29页 |
| ·各时期卵巢组织总 RNA 抽提结果鉴定 | 第26页 |
| ·中华绒螯蟹不同发育时期卵巢内小 RNA 的 solexa 测序 | 第26-27页 |
| ·中华绒螯蟹卵巢内 miRNA 的鉴定 | 第27-28页 |
| ·miRNA 的进化分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-32页 |
| 第三部分 miRNA 靶基因的预测 | 第32-42页 |
| ·材料和方法 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-40页 |
| ·cyclin B 和 cdc2 激酶 | 第33-35页 |
| ·MIH（molt-inhibiting hormone）基因 | 第35-36页 |
| ·蜕皮激素调节蛋白（Ecdysteroid-regulated protein）靶基因预测 | 第36-37页 |
| ·Cytokine signaling 2 和 ILF | 第37-39页 |
| ·其余 11 个 mRNA 序列的靶基因预测 | 第39-40页 |
| ·结论 | 第40-42页 |
| 第四部分 三个 miRNA 在中华绒螯蟹卵母细胞过程中的表达及靶基因验证 | 第42-57页 |
| ·材料与方法 | 第42-50页 |
| ·miRNA 荧光定量分析 | 第42-44页 |
| ·miR-2 前体的扩增及测序分析 | 第44-46页 |
| ·cyclin B 靶基因载体的构建 | 第46-48页 |
| ·靶基因验证 | 第48-50页 |
| ·结果 | 第50-55页 |
| ·荧光定量分析 | 第50-52页 |
| ·miRNA 前体的扩增 | 第52-53页 |
| ·Cyclin B 靶基因载体的构建 | 第53-55页 |
| ·荧光报告基因检测 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| References | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-75页 |
| 附录一 中华绒螯蟹卵巢 miRNAs 及 miRNA candidates | 第62-68页 |
| 附录二 剩余 10 个基因的靶位点预测 | 第68-73页 |
| 附录三 实验所用试剂及仪器 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
