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极地细菌Pseudomonas putida S1海藻糖合成酶的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 绪论第12-24页
   ·海藻糖及其理化性质第12-13页
     ·海藻糖的发现及其化学结构第12页
     ·海藻糖的理化性质第12-13页
   ·海藻糖的功能第13-14页
     ·海藻糖的生理功能第13-14页
     ·海藻糖的其它功能第14页
   ·海藻糖的应用第14-16页
     ·海藻糖在食品工业中的应用第15页
     ·海藻糖在医药工业中的应用第15页
     ·海藻糖在化妆品工业中的应用第15页
     ·海藻糖在农业中的应用第15-16页
   ·海藻糖的生物合成第16-18页
     ·磷酸海藻糖合成酶/磷酸海藻糖磷酸酶途径(TPS/TPP Pathway)第16-17页
     ·麦芽寡糖基海藻糖途径(TreY/TreZ Pathway)第17页
     ·海藻糖合成酶途径(TS Pathway)第17页
     ·海藻糖磷酸化酶途径(TreP Pathway)第17页
     ·海藻糖转糖苷合成酶途径(TreT Pathway)第17-18页
   ·海藻糖的制备第18-19页
     ·抽提法制备海藻糖第18页
     ·发酵法生产海藻糖第18页
     ·海藻糖的酶法转化第18-19页
   ·海藻糖合成酶研究概述第19-21页
   ·低温酶和极地微生物第21-22页
     ·低温菌和低温酶第21-22页
     ·极地和极地微生物第22页
   ·论文研究的目的和内容第22-24页
第二章 产海藻糖合成酶极地低温菌S1 的筛选与验证第24-36页
   ·引言第24-25页
   ·材料与方法第25-29页
     ·菌种第25页
     ·培养基第25页
     ·主要试剂第25页
     ·主要仪器第25-26页
     ·产酶菌株的筛选流程第26页
     ·反应产物的验证第26-27页
     ·分析方法第27-28页
     ·菌种保藏方法第28页
     ·极地海洋菌S1 海藻糖合成酶的部分纯化第28页
     ·部分纯化的S1 海藻糖合成酶的反应特性第28-29页
   ·结果与讨论第29-35页
     ·产海藻糖合成酶极地细菌的筛选第29-31页
     ·DNS 法对菌株S1 和S2 酶反应液还原性分析结果第31页
     ·菌株S1 酶反应产物的酶解特性第31-32页
     ·部分纯化的S1 海藻糖合成酶的作用底物第32-33页
     ·反应温度对S1 海藻糖合成酶活性的影响第33-34页
     ·不同缓冲体系对S1 海藻糖合成酶活性的影响第34页
     ·反应pH 对S1 海藻糖合成酶活性的影响第34-35页
   ·本章小结第35-36页
第三章 海藻糖合成酶产酶菌株S1 的培养特性及分类鉴定第36-46页
   ·引言第36页
   ·材料和方法第36-38页
     ·实验菌株与主要培养基第36页
     ·主要试剂第36-37页
     ·主要仪器第37页
     ·菌体形态特征观察第37页
     ·固体培养特征观察第37页
     ·菌株S1 生长温度范围和最适生长温度的确定第37页
     ·菌株S1 生长盐浓度范围的确定第37页
     ·生理生化试验第37-38页
     ·运动性检查第38页
     ·16S rDNA 序列测定与分析第38页
   ·结果与讨论第38-45页
     ·S1 菌株的个体形态特征第38-39页
     ·S1 菌株的固体培养特征第39页
     ·菌株S1 生长温度范围和最适生长温度第39-40页
     ·NaCl 浓度对菌株S1 生长的影响第40页
     ·菌株S1 的生理生化特征第40-42页
     ·菌株S1 的16S rDNA 序列分析第42-45页
   ·本章小结第45-46页
第四章 环境胁迫对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响第46-54页
   ·引言第46页
   ·材料和方法第46-48页
     ·菌株第46页
     ·主要试剂第46页
     ·主要仪器第46-47页
     ·培养基第47页
     ·实验方法第47-48页
     ·分析方法第48页
   ·结果与讨论第48-53页
     ·P. putida S1 的的生长和产酶时间曲线第48页
     ·热激对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响第48-49页
     ·盐胁迫对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响第49-50页
     ·冷激对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响第50页
     ·热激和盐胁迫协同处理对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响第50-51页
     ·热激处理条件的优化第51-52页
     ·盐胁迫条件的优化第52-53页
   ·本章小结第53-54页
第五章 P. putida S1 海藻糖合成酶基因在E.coli 中的克隆与表达第54-66页
   ·引言第54页
   ·材料和方法第54-57页
     ·菌株与质粒第54页
     ·主要试剂第54-55页
     ·主要仪器第55页
     ·培养基与主要溶液第55页
     ·实验方法第55-57页
     ·分析方法第57页
   ·结果与讨论第57-65页
     ·P. putida S1 菌株treS 基因的PCR 扩增与TA 克隆第57-58页
     ·P. putida S1 菌株treS 基因的序列分析结果第58-62页
     ·重组质粒pQE30T-TS 的构建及其在E.coli M15 的表达第62-65页
   ·本章小结第65-66页
第六章 重组海藻糖合成酶的分离纯化与酶学性质研究第66-76页
   ·引言第66页
   ·材料和方法第66-69页
     ·菌株第66页
     ·主要试剂第66页
     ·主要仪器第66-67页
     ·培养基与溶液第67页
     ·实验方法第67-68页
     ·分析方法第68-69页
   ·结果与讨论第69-75页
     ·重组海藻糖合成酶的分离与纯化第69-70页
     ·重组海藻糖合成酶的凝血酶酶切处理第70页
     ·重组海藻糖合成酶的最适作用温度和热稳定性第70-71页
     ·重组海藻糖合成酶的最适作用pH 和pH 稳定性第71-72页
     ·金属离子对重组海藻糖合成酶活性的影响第72页
     ·重组海藻糖合成酶的反应动力学参数第72-74页
     ·重组海藻糖合成酶与已报道海藻糖合成酶的比较第74-75页
   ·本章小结第75-76页
论文主要结论第76-78页
论文主要创新点第78-79页
致谢第79-80页
参考文献第80-93页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第93-94页
附录:附图第94-97页

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