摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
·海藻糖及其理化性质 | 第12-13页 |
·海藻糖的发现及其化学结构 | 第12页 |
·海藻糖的理化性质 | 第12-13页 |
·海藻糖的功能 | 第13-14页 |
·海藻糖的生理功能 | 第13-14页 |
·海藻糖的其它功能 | 第14页 |
·海藻糖的应用 | 第14-16页 |
·海藻糖在食品工业中的应用 | 第15页 |
·海藻糖在医药工业中的应用 | 第15页 |
·海藻糖在化妆品工业中的应用 | 第15页 |
·海藻糖在农业中的应用 | 第15-16页 |
·海藻糖的生物合成 | 第16-18页 |
·磷酸海藻糖合成酶/磷酸海藻糖磷酸酶途径(TPS/TPP Pathway) | 第16-17页 |
·麦芽寡糖基海藻糖途径(TreY/TreZ Pathway) | 第17页 |
·海藻糖合成酶途径(TS Pathway) | 第17页 |
·海藻糖磷酸化酶途径(TreP Pathway) | 第17页 |
·海藻糖转糖苷合成酶途径(TreT Pathway) | 第17-18页 |
·海藻糖的制备 | 第18-19页 |
·抽提法制备海藻糖 | 第18页 |
·发酵法生产海藻糖 | 第18页 |
·海藻糖的酶法转化 | 第18-19页 |
·海藻糖合成酶研究概述 | 第19-21页 |
·低温酶和极地微生物 | 第21-22页 |
·低温菌和低温酶 | 第21-22页 |
·极地和极地微生物 | 第22页 |
·论文研究的目的和内容 | 第22-24页 |
第二章 产海藻糖合成酶极地低温菌S1 的筛选与验证 | 第24-36页 |
·引言 | 第24-25页 |
·材料与方法 | 第25-29页 |
·菌种 | 第25页 |
·培养基 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·产酶菌株的筛选流程 | 第26页 |
·反应产物的验证 | 第26-27页 |
·分析方法 | 第27-28页 |
·菌种保藏方法 | 第28页 |
·极地海洋菌S1 海藻糖合成酶的部分纯化 | 第28页 |
·部分纯化的S1 海藻糖合成酶的反应特性 | 第28-29页 |
·结果与讨论 | 第29-35页 |
·产海藻糖合成酶极地细菌的筛选 | 第29-31页 |
·DNS 法对菌株S1 和S2 酶反应液还原性分析结果 | 第31页 |
·菌株S1 酶反应产物的酶解特性 | 第31-32页 |
·部分纯化的S1 海藻糖合成酶的作用底物 | 第32-33页 |
·反应温度对S1 海藻糖合成酶活性的影响 | 第33-34页 |
·不同缓冲体系对S1 海藻糖合成酶活性的影响 | 第34页 |
·反应pH 对S1 海藻糖合成酶活性的影响 | 第34-35页 |
·本章小结 | 第35-36页 |
第三章 海藻糖合成酶产酶菌株S1 的培养特性及分类鉴定 | 第36-46页 |
·引言 | 第36页 |
·材料和方法 | 第36-38页 |
·实验菌株与主要培养基 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36-37页 |
·主要仪器 | 第37页 |
·菌体形态特征观察 | 第37页 |
·固体培养特征观察 | 第37页 |
·菌株S1 生长温度范围和最适生长温度的确定 | 第37页 |
·菌株S1 生长盐浓度范围的确定 | 第37页 |
·生理生化试验 | 第37-38页 |
·运动性检查 | 第38页 |
·16S rDNA 序列测定与分析 | 第38页 |
·结果与讨论 | 第38-45页 |
·S1 菌株的个体形态特征 | 第38-39页 |
·S1 菌株的固体培养特征 | 第39页 |
·菌株S1 生长温度范围和最适生长温度 | 第39-40页 |
·NaCl 浓度对菌株S1 生长的影响 | 第40页 |
·菌株S1 的生理生化特征 | 第40-42页 |
·菌株S1 的16S rDNA 序列分析 | 第42-45页 |
·本章小结 | 第45-46页 |
第四章 环境胁迫对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响 | 第46-54页 |
·引言 | 第46页 |
·材料和方法 | 第46-48页 |
·菌株 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46-47页 |
·培养基 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-48页 |
·分析方法 | 第48页 |
·结果与讨论 | 第48-53页 |
·P. putida S1 的的生长和产酶时间曲线 | 第48页 |
·热激对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响 | 第48-49页 |
·盐胁迫对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响 | 第49-50页 |
·冷激对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响 | 第50页 |
·热激和盐胁迫协同处理对P. putida S1 产海藻糖合成酶的影响 | 第50-51页 |
·热激处理条件的优化 | 第51-52页 |
·盐胁迫条件的优化 | 第52-53页 |
·本章小结 | 第53-54页 |
第五章 P. putida S1 海藻糖合成酶基因在E.coli 中的克隆与表达 | 第54-66页 |
·引言 | 第54页 |
·材料和方法 | 第54-57页 |
·菌株与质粒 | 第54页 |
·主要试剂 | 第54-55页 |
·主要仪器 | 第55页 |
·培养基与主要溶液 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-57页 |
·分析方法 | 第57页 |
·结果与讨论 | 第57-65页 |
·P. putida S1 菌株treS 基因的PCR 扩增与TA 克隆 | 第57-58页 |
·P. putida S1 菌株treS 基因的序列分析结果 | 第58-62页 |
·重组质粒pQE30T-TS 的构建及其在E.coli M15 的表达 | 第62-65页 |
·本章小结 | 第65-66页 |
第六章 重组海藻糖合成酶的分离纯化与酶学性质研究 | 第66-76页 |
·引言 | 第66页 |
·材料和方法 | 第66-69页 |
·菌株 | 第66页 |
·主要试剂 | 第66页 |
·主要仪器 | 第66-67页 |
·培养基与溶液 | 第67页 |
·实验方法 | 第67-68页 |
·分析方法 | 第68-69页 |
·结果与讨论 | 第69-75页 |
·重组海藻糖合成酶的分离与纯化 | 第69-70页 |
·重组海藻糖合成酶的凝血酶酶切处理 | 第70页 |
·重组海藻糖合成酶的最适作用温度和热稳定性 | 第70-71页 |
·重组海藻糖合成酶的最适作用pH 和pH 稳定性 | 第71-72页 |
·金属离子对重组海藻糖合成酶活性的影响 | 第72页 |
·重组海藻糖合成酶的反应动力学参数 | 第72-74页 |
·重组海藻糖合成酶与已报道海藻糖合成酶的比较 | 第74-75页 |
·本章小结 | 第75-76页 |
论文主要结论 | 第76-78页 |
论文主要创新点 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-93页 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第93-94页 |
附录:附图 | 第94-97页 |