| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩写对比表 | 第7-11页 |
| 第一部分 绪论 | 第11-28页 |
| ·铜绿假单胞菌耐药性研究概况 | 第11页 |
| ·P.a产生高度耐药性的机制 | 第11-17页 |
| ·外膜的低渗透性机制 | 第11-12页 |
| ·主动泵出系统机制 | 第12-14页 |
| ·产生灭活酶或抗生素修饰酶 | 第14-15页 |
| ·抗菌药物作用靶位点改变 | 第15-16页 |
| ·细菌生物被膜(biofilm)的产生 | 第16-17页 |
| ·铜绿假单胞菌biofilm的耐药机制 | 第17-21页 |
| ·细菌biofilm的渗透屏障作用 | 第18-19页 |
| ·营养限制机制 | 第19-20页 |
| ·免疫逃逸机制 | 第20页 |
| ·激活应激反应 | 第20-21页 |
| ·QS系统对细菌biofilm的作用 | 第21-26页 |
| ·细菌QS系统及其信号分子 | 第21-23页 |
| ·铜绿假单胞菌中QS系统组成 | 第23-25页 |
| ·QS系统对铜绿假单胞菌biofilm系统的调节 | 第25-26页 |
| ·研究内容和目的 | 第26-28页 |
| 第二部分 实验材料和方法 | 第28-44页 |
| ·实验材料 | 第28-33页 |
| ·菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·培养基及试剂 | 第29-32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-44页 |
| ·小剂量质粒提取 | 第33页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)的反应体系(50ul) | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌10B感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·DNA片段的酶切及连接 | 第34-35页 |
| ·DNA酶切反应(50ul体系) | 第34-35页 |
| ·DNA粘性末端的连接 | 第35页 |
| ·电转化 | 第35页 |
| ·启动子-报道子载体的构建 | 第35-37页 |
| ·双亲株杂交试验—将启动子报道子整合到染色体上 | 第37-38页 |
| ·三亲株杂交试验 | 第38页 |
| ·双层培养基纸片扩散法 | 第38-39页 |
| ·中药库的筛选以及最小抑制浓度的测定(初筛) | 第39-40页 |
| ·酶标仪高通量筛选(复筛) | 第40页 |
| ·PAO1体外biofilm模型的建立 | 第40-41页 |
| ·载体表面biofilm半定量 | 第41页 |
| ·MTT活菌计数 | 第41-42页 |
| ·测定biofilm条件下藻酸盐的释放量(1,3二羟基萘) | 第42页 |
| ·中药提取物对PAO1绿脓菌素的抑制 | 第42页 |
| ·弹性蛋白酶测定 | 第42-43页 |
| ·用浓硫酸－地衣酚方法进行鼠李糖脂含量及活性的测定 | 第43-44页 |
| 第三部分 实验结果 | 第44-59页 |
| ·铜绿假单胞菌biofilm相关基因启动子库的构建 | 第44-46页 |
| ·启动子报道子的体外整合 | 第44-45页 |
| ·启动子报道子的染色体整合结果 | 第45-46页 |
| ·中药提取物对biofilm相关基因的影响－初筛结果 | 第46-49页 |
| ·Biofilm体外模型建立以及载体表面半定量结果 | 第49-51页 |
| ·MTT活菌计数结果 | 第51-52页 |
| ·中药提取物对QS系统中各毒力因子表达的影响 | 第52-59页 |
| 第四部分 讨论 | 第59-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 附录 | 第68-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
