致谢 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-11页 |
Abstract | 第11-16页 |
英文缩写一览表 | 第16-20页 |
绪论 | 第20-30页 |
参考文献 | 第25-30页 |
第一部分 功能性小激活RNAs的筛选 | 第30-48页 |
·引言 | 第30-31页 |
·材料和方法 | 第31-39页 |
·细胞系和主要试剂 | 第31-32页 |
·主要仪器和设备 | 第32-33页 |
·dsRNA的设计及合成 | 第33-34页 |
·细胞培养及转染 | 第34页 |
·实时定量逆转录-聚合酶链反应(qPCR) | 第34-36页 |
·蛋白印迹(Western Blot) | 第36-39页 |
·统计学分析 | 第39页 |
·结果 | 第39-43页 |
·saRNA的设计 | 第39-41页 |
·dsRNA对肝癌细胞HepG2靶基因WT1 mRNA水平的影响 | 第41-42页 |
·dsRNA对肝癌细胞细胞HepG2靶基因WT1蛋白水平的影响 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·结论 | 第45页 |
·参考文献 | 第45-48页 |
第二部分 dsWT1-326诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及机制研究 | 第48-72页 |
·引言 | 第48页 |
·材料和方法 | 第48-56页 |
·细胞系和主要试剂 | 第48-50页 |
·主要仪器和设备 | 第50-51页 |
·细胞培养及转染 | 第51页 |
·四唑盐(MTT)比色法 | 第51-52页 |
·细胞体外成瘤能力检测(平板克隆形成实验) | 第52页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第52-53页 |
·蛋白印迹(Western Blot) | 第53-56页 |
·统计学分析 | 第56页 |
·结果 | 第56-66页 |
·dsWT1-326转染HepG2细胞48h和72h后的细胞形态学改变 | 第56-57页 |
·MTT实验检测不同浓度dsWT1-326对HepG2细胞作用的时效量效关系 | 第57-59页 |
·dsWT1-326对人肝癌HepG2细胞克隆形成的影响 | 第59页 |
·流式细胞仪检测dsWT1-326对HepG2细胞凋亡诱导作用 | 第59-63页 |
·dsWT1-326对HepG2细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bak的影响 | 第63-64页 |
·dsWT1-326对HepG2细胞中Caspase-3和PARP的影响 | 第64-66页 |
·讨论 | 第66-68页 |
·结论 | 第68页 |
·参考文献 | 第68-72页 |
总结和展望 | 第72-74页 |
文献综述 小RNA和基因转录上调 | 第74-86页 |
参考文献 | 第81-86页 |
附录1 作者简历 | 第86-87页 |
附录2 发表文章 | 第87-98页 |