| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 一 文献综述 | 第9-16页 |
| ·狂犬病研究概况 | 第9-10页 |
| ·狂犬病主要危害 | 第9页 |
| ·我国狂犬病发生近况 | 第9-10页 |
| ·狂犬病的诊断方法 | 第10页 |
| ·狂犬病病毒基因分型 | 第10页 |
| ·狂犬病病毒分子生物学研究 | 第10-12页 |
| ·狂犬病病毒L蛋白研究进展 | 第12-14页 |
| ·狂犬病病毒L基因的分子生物学概述 | 第12页 |
| ·狂犬病病毒L蛋白 | 第12-14页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第14-16页 |
| 二 材料和方法 | 第16-33页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·重组质粒、质粒载体、菌株、细胞和实验动物 | 第16页 |
| ·主要仪器和设备 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16-17页 |
| ·基因克隆与质粒构建主要试剂 | 第16页 |
| ·蛋白提纯主要试剂 | 第16-17页 |
| ·蛋白鉴定与抗体检测主要试剂 | 第17页 |
| ·细胞培养与转染所用试剂 | 第17页 |
| ·实验试剂配制 | 第17-20页 |
| ·5×TBE DNA电泳缓冲液配制 | 第17页 |
| ·细菌普通培养基LB、LA配制 | 第17页 |
| ·制备感受态细用试剂的配制 | 第17-18页 |
| ·SDS-PAGE试剂的配制 | 第18-19页 |
| ·纯化蛋白相关试剂配制 | 第19-20页 |
| ·Western blot试剂的配制 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-33页 |
| ·实验技术路线 | 第20-21页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·L基因的克隆 | 第21-23页 |
| ·目的基因与pMD18-T连接 | 第23-25页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第26-29页 |
| ·重组蛋白的纯化与复性 | 第29-30页 |
| ·抗体制备与抗体检测 | 第30-33页 |
| 三 结果 | 第33-43页 |
| ·L蛋白基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·重组表达质粒pET-32a(+)-L的鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第35-39页 |
| ·pET-32a(+)-L转化大肠杆菌BL21的诱导表达产物SDS-PAGE检测 | 第35-36页 |
| ·pET-32a(+)-L转化大肠杆菌Rosetta的诱导表达产物SDS-PAGE检测 | 第36-37页 |
| ·pET-32a(+)-L转化大肠杆菌Rosetta的诱导表达产物Western blot检测 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白表达形式鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的纯化与复性 | 第39页 |
| ·L多克隆抗体血清的特异性鉴定 | 第39-42页 |
| ·L多克隆抗体与重组菌的反应性 | 第39-40页 |
| ·L多克隆抗体与重组蛋白的反应性 | 第40-42页 |
| ·L多克隆血清与提纯的病毒反应 | 第42-43页 |
| 四 讨论 | 第43-47页 |
| ·L重组蛋白的原核表达策略 | 第43页 |
| ·表达菌株的选择 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第44页 |
| ·多克隆抗体的反应性与特异性 | 第44-47页 |
| 五 小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |
