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PCBP1对帕金森病大鼠模型的影响

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
前言第10-13页
第一部分 帕金森病大鼠模型的建立及6-OHDA损伤剂量筛选第13-25页
   ·实验材料第13-14页
     ·实验动物第13页
     ·药品与试剂第13页
     ·主要仪器第13-14页
     ·方法第14-18页
     ·主要溶液配制第14-15页
     ·动物分组及处理第15-17页
     ·数据处理和统计学检验第17-18页
   ·结果第18-22页
     ·6-OHDA注射纹状体出现由APO诱发的偏侧旋转行为第18-19页
     ·6-OHDA注射纹状体导致黑质DA能神经元渐进性缺失第19-22页
   ·讨论第22-25页
     ·6-OHDA注射纹状体制备的PD大鼠模型的选择及其可能的机制第22-23页
     ·6-OHDA注射纹状对黑质DA能神经元的影响第23页
     ·阿扑吗啡诱发大鼠产生旋转行为的机制和结果分析第23页
     ·6-OHDA注射纹状体对黑质DA能神经元数目的影响第23-25页
第二部分 pSNAV1.0-pCBP1的构建第25-36页
     ·实验材料第25-26页
     ·药品与试剂第25页
     ·主要仪器第25-26页
   ·实验方法第26-31页
     ·从pcDNA4c-PCBP1质粒上获得目的基因第26页
     ·产物纯化第26-27页
     ·纯化产物酶切第27页
     ·pSNAV1.0质粒的扩增第27-28页
     ·连接构建成pSNAV1.0-pCBP1第28-30页
     ·所得pSNAV1.0-pCBP1重组质粒产物测序第30-31页
   ·结果第31-35页
     ·PCBP1目的条带的扩增pcDNA 4c-PCBP1第31页
     ·pSNAVl.0酶切产物鉴定第31-32页
     ·连接产物转化大肠杆菌DH5 α后进行克隆筛选第32页
     ·pSNAV1.0-PCBP1重组质粒酶切鉴定第32-33页
     ·pSNAV1.0-pCBP1重组质粒测序第33-35页
   ·讨论第35-36页
第三部分 rAAV2-PCBP1-EGFP病毒包装第36-45页
   ·实验材料第36页
   ·实验方法第36-42页
     ·载体细胞株的建立第36页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP的大规模制备第36页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP的纯化及纯度检测第36-37页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP的目的基因的PCR鉴定第37-38页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP的滴度测定第38-39页
     ·滴度测定样品处理第39页
     ·阳性对照质粒的处理第39-42页
   ·结果第42-44页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP经负染后用电子显微镜观察第42页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP的目的基因的PCR鉴定第42-43页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP的滴度测定第43-44页
   ·讨论第44-45页
第四部分 PCBP1对帕金森大鼠的影响第45-62页
   ·实验材料第45-46页
     ·行为学测试TRUSCAN第45页
     ·免疫组化第45页
     ·western第45-46页
   ·实验方法第46-49页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP表达时效和剂量的摸定第46页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP注射纹状体对帕金森大鼠的治疗效应第46-49页
     ·结果第49-60页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP 表达时效和剂量第49-50页
     ·行为学测试结果第50-54页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP注射纹状体后大鼠脑内PCBP1的表达第54-56页
     ·Western-blot检测中脑中TH,HSP70第56-60页
   ·讨论第60-62页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP在大鼠脑内的表达第60页
     ·模型的建立原则第60-61页
     ·rAAV2-PCBP1-EGFP对PD大鼠行为的影响第61页
     ·PCBP1的表达量的变化以及rAAV2-PCBP1-EGFP对HSP70的上调作用第61-62页
结论第62-63页
附录:文章缩略词一览表第63-65页
参考文献第65-68页
文献综述第68-75页
 参考文献第72-75页
个人简历第75-76页
致谢第76-77页
硕士期间发表文章第77页

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