摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第10-13页 |
第一部分 帕金森病大鼠模型的建立及6-OHDA损伤剂量筛选 | 第13-25页 |
·实验材料 | 第13-14页 |
·实验动物 | 第13页 |
·药品与试剂 | 第13页 |
·主要仪器 | 第13-14页 |
·方法 | 第14-18页 |
·主要溶液配制 | 第14-15页 |
·动物分组及处理 | 第15-17页 |
·数据处理和统计学检验 | 第17-18页 |
·结果 | 第18-22页 |
·6-OHDA注射纹状体出现由APO诱发的偏侧旋转行为 | 第18-19页 |
·6-OHDA注射纹状体导致黑质DA能神经元渐进性缺失 | 第19-22页 |
·讨论 | 第22-25页 |
·6-OHDA注射纹状体制备的PD大鼠模型的选择及其可能的机制 | 第22-23页 |
·6-OHDA注射纹状对黑质DA能神经元的影响 | 第23页 |
·阿扑吗啡诱发大鼠产生旋转行为的机制和结果分析 | 第23页 |
·6-OHDA注射纹状体对黑质DA能神经元数目的影响 | 第23-25页 |
第二部分 pSNAV1.0-pCBP1的构建 | 第25-36页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·药品与试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-31页 |
·从pcDNA4c-PCBP1质粒上获得目的基因 | 第26页 |
·产物纯化 | 第26-27页 |
·纯化产物酶切 | 第27页 |
·pSNAV1.0质粒的扩增 | 第27-28页 |
·连接构建成pSNAV1.0-pCBP1 | 第28-30页 |
·所得pSNAV1.0-pCBP1重组质粒产物测序 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-35页 |
·PCBP1目的条带的扩增pcDNA 4c-PCBP1 | 第31页 |
·pSNAVl.0酶切产物鉴定 | 第31-32页 |
·连接产物转化大肠杆菌DH5 α后进行克隆筛选 | 第32页 |
·pSNAV1.0-PCBP1重组质粒酶切鉴定 | 第32-33页 |
·pSNAV1.0-pCBP1重组质粒测序 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
第三部分 rAAV2-PCBP1-EGFP病毒包装 | 第36-45页 |
·实验材料 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-42页 |
·载体细胞株的建立 | 第36页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP的大规模制备 | 第36页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP的纯化及纯度检测 | 第36-37页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP的目的基因的PCR鉴定 | 第37-38页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP的滴度测定 | 第38-39页 |
·滴度测定样品处理 | 第39页 |
·阳性对照质粒的处理 | 第39-42页 |
·结果 | 第42-44页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP经负染后用电子显微镜观察 | 第42页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP的目的基因的PCR鉴定 | 第42-43页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP的滴度测定 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
第四部分 PCBP1对帕金森大鼠的影响 | 第45-62页 |
·实验材料 | 第45-46页 |
·行为学测试TRUSCAN | 第45页 |
·免疫组化 | 第45页 |
·western | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-49页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP表达时效和剂量的摸定 | 第46页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP注射纹状体对帕金森大鼠的治疗效应 | 第46-49页 |
·结果 | 第49-60页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP 表达时效和剂量 | 第49-50页 |
·行为学测试结果 | 第50-54页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP注射纹状体后大鼠脑内PCBP1的表达 | 第54-56页 |
·Western-blot检测中脑中TH,HSP70 | 第56-60页 |
·讨论 | 第60-62页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP在大鼠脑内的表达 | 第60页 |
·模型的建立原则 | 第60-61页 |
·rAAV2-PCBP1-EGFP对PD大鼠行为的影响 | 第61页 |
·PCBP1的表达量的变化以及rAAV2-PCBP1-EGFP对HSP70的上调作用 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
附录:文章缩略词一览表 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
文献综述 | 第68-75页 |
参考文献 | 第72-75页 |
个人简历 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
硕士期间发表文章 | 第77页 |