| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-30页 |
| ·渗透压补偿溶质概述 | 第12-15页 |
| ·渗透压补偿溶质简介 | 第12页 |
| ·渗透压补偿溶质的分类 | 第12-14页 |
| ·渗透压补偿溶质的作用机制 | 第14-15页 |
| ·Ectoine概述 | 第15-20页 |
| ·Ectoine的基本性质 | 第15-17页 |
| ·Ectoine的生理功能 | 第17-19页 |
| ·Ectoine的应用 | 第19-20页 |
| ·Ectoine制备技术 | 第20-23页 |
| ·高密度发酵 | 第20-21页 |
| ·细菌挤奶 | 第21-22页 |
| ·生长细胞和静息细胞两阶段联合制备Ectoine | 第22-23页 |
| ·Ectoine生物合成及其合成酶基因 | 第23-25页 |
| ·Ectoine生物合成途径 | 第23-24页 |
| ·Ectoine合成酶基因 | 第24-25页 |
| ·Ectoine合成酶基因重组表达及其调控 | 第25-28页 |
| ·本论文的目的、内容及意义 | 第28-30页 |
| 第2章 C.marina的Ectoine合成酶基因克隆 | 第30-35页 |
| ·实验材料和试剂 | 第30页 |
| ·实验菌株 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-31页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第30页 |
| ·染色体步移PCR技术获取ectABC基因 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第31页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第31页 |
| ·实验结果 | 第31-35页 |
| 第3章 Ectoine基因重组表达载体的构建 | 第35-43页 |
| ·材料和试剂 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·PCR方法及引物设计 | 第35-36页 |
| ·PCR产物精制 | 第36页 |
| ·ectABC重组表达载体构建 | 第36-37页 |
| ·重组表达载体转化E.coli BL21 | 第37页 |
| ·重组子鉴定 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-43页 |
| ·C.marina的重组目的DNA片段扩增 | 第38页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·转化E.coli BL21 | 第39-43页 |
| 第4章 Ectoine合成酶基因ectABC的诱导表达 | 第43-51页 |
| ·材料和试剂 | 第43-44页 |
| ·实验菌株和试剂 | 第43页 |
| ·培养基和溶液的配制 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·重组子诱导表达 | 第44页 |
| ·Ectoine浓度测定 | 第44-45页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第45页 |
| ·~1H-NMR鉴定 | 第45-46页 |
| ·实验结果与讨论 | 第46-51页 |
| ·重组表达 | 第46-47页 |
| ·诱导表达对ectABC表达的影响 | 第47-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录1 C.marina CICC 10367核苷酸序列 | 第59-63页 |
| 附录2 质粒pECT43.1a结构图 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间公开发表论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
